2808184961

SZCZEPIONKI NOWEJ GENERACJI:

Z ćwiczeń 3 Szczepionki:

-Patennowane -P np. przez delecję genó odpowiedzialnych za wirulencję

-Pzabite mikroorganizmy

-Pbiałka

Zalety atemiacji (musimy mieć pewność, że atenuacja jest nieodwracalna):

Indukcja intensywniejszej odpowiedzi imm., zabite arg, indukuję bardzo słabą Stasowanie atenuowanych organizmów do przeniesienia antygenów innych patogenów

-P odwrotna wakcynologia

mamy sekwencję genomu-> analiza in silico -Pprogram wykrywa geny kodujące białka powierzchniowe

WYKORZ YST ANIE BAKTERII MLEKOWYCH JAKO NOŚNIKA ANTYGENU:

-atenuowanae bakterie mlekowe

-antygen wklanowany do DNA bakterii mlekowych

-antygen powinien ulegać ekspresji promotory konstytutywne lub indukowalne -antygen powinien być wydzielany na zewnąrz komórki-Ppowinien mieć sekwencję syngałową -antygen może być albo na plazmidzie (w wielu kopiach-plazmidy wielakopijne)

-antygen może być na chromosomie (+silny pramatar) rozważa się użycie bakterii LAB jaka nośników antygenów

Izolacja genów kodujących determinanty patogenezy

Listeria manocytogenes:

•    Organizm modelowy w badaniach nad odp.imm.generowaną wewnątrzkom.

•    Izolacja i charakterystyka mutantów insercyjnych-Pokreślenie funkcji i lokalizacji genów kodujących determinanty patogenezy

•    Determinanty patogenezy Listeria:

-listeriolizyna O (LLO, genhly, egzotoksyna, główny czynnik wirulencji, z rodziny hemolizyn) -fosfolipaza

•    Listeria wnika drogąpnkarmową (odporna jest na działanie HC1 i enzymów trawiennych)

•    Przylega do komórki (adhezyny, intemaliny)

•    Przenika do kępek Peyera, ma intemalinę, która wywołuje fagocytozę

• Zdolność przenikania bakterii przez błony wakuoli jest uwarunkowana aktywnościąhemolityczną-P wydzielenie LLO, białko Act A odpowiedzialne jest za ruch, fosfolipaza odpowiedzialna jest za hydrolizę lipidów

Listeria pobudza I i II układ zgodności tkankowej

Wykorzystanie w szczepionkach antygenów zewnętrznych (MHC I)(nukleoprateina wirusa grypy NP), antygeny powierzchniowe- najbardziej zmienne=> szczepionki stająsię nieskuteczne Wykorzystanie białek wewnętrznych => są lepsze, bo stabilniejsze!!!