3530765278

magnezu lekko wzmagają jego aktywność, natomiast kompleksany (EDTA, EGTA) hamują ją, podobnie jak specyficzny inhibitor proteinaz serynowych - pMSF. Molekuły enzymu nie zawierają koordynacyjnie związanych jonów cynku. Zablokowanie grup sulfhydrylowych nie wpływa na jego aktywność. Enzym nie hydrolizuje elastyny w przedziale pH 7,4-9,0, czym różni się od proteinazy z gruczołów penetracyjnych Neoglyphe sobolevi. Jest odporny na działanie 0,05% detergentu niejonowego - Tritonu X-100, który ułatwia ekstrakcję enzymu (wykonawca T. Moczoń).

8.    Badania nad wykorzystaniem metod molekularnych do wykrywania inwazji pasożytów (kontynuacja)

Kierownik: prof. dr hab. Halina Wędrychowicz

Celem badań było ustalenie przydatności rekombinowanej katepsyny B3 (CB3) motylicy wątrobowej do diagnozowania inwazji tej przywry u owiec metodą ELISA. Owce (13 sztuk) zarażono dawką 250 metacerkarii, natomiast 3 osobniki będące kontrolą negatywną nie były zarażane. Krew pobierano co 2 tygodnie, a uzyskaną surowicę przechowywano w -20°C do dalszych badań. W 12 tygodniu zwierzęta poddano ubojowi w celu określenia liczby przywr w wątrobach. Już w 4 tygodniu po zarażeniu stwierdzono wartość OD trzykrotnie wyższą w porównaniu z kontrolą i względem poziomu zerowego. Poziom przeciwciał reagująch z CB3 narastał do 10 tygodnia inwazji kiedy to wartość OD była 9x wyższa niż u kontroli Uzyskane wyniki wskazują, że rekombinowany enzym katepsyna B3 F. hepatica jest antygenem przydatnym do diagnozowania inwazji tej przywry u owiec metodą ELISA. Jednakże w porównaniu z wynikami uzyskanymi w poprzednich badaniach metodą Westem-blottingu przy użyciu tego białka wykrywalność inwazji jest opóźniona o 2 tygodnie (wykonawcy: L. Jedlina, P. Wilkowski, H. Wędrychowicz).

9.    Immunoprewencja inwazji helmintów (kontynuacja)

Kierownik: prof. dr hab. Halina Wędrychowicz

Zadania badawcze:

Ocena skuteczności szczepionki cDNA przeciwko inwazji F. hepatica opartej o rekombinowane antygeny F. hepatica połączeniu z cDNA kodującym cząsteczkę CTLA-4 (Cytotoxic T-Lymphocyte Antygen 4) specyficzną dla szczepionego gatunku zwierząt (nowe zadanie)