2906542578

238 K. WOROWSKI, W. ROSZKOWSKA [10]

HjN-A.........(A)*— -A Aj-A^A,- A’₂- A', • - (A)_x-.......A-COOH

— s-s-

Ryc. 4. Struktura centrum reaktywnego ziemniaczanych inhibitorów endoproteaz, zmodyfikowane (56).

warunkuje specyficzność działania antyproteolitycznego. W centrum reaktywnym inhibitorów trypsyny tym aminokwasem jest lizyna lub ar-ginina a inhibitorów chymotrypsyny leucyna (Tabela 3).

Do identyfikacji aminokwasów tworzących centrum reaktywne inhibitorów ziemniaczanych stosuje się metody enzymatyczne oraz selektywne chemicznie modyfikacje grup funkcyjnych poszczególnych aminokwasów (16, 57, 58, 60). Przeglądu tych metod dokonała ostatnio Muszyńska (59). W metodach enzymatycznych używa się katalityczne ilości enzymu w środowisku kwaśnym. W takich warunkach wiązanie peptydowe A₅—— centrum reaktywnego ulega wybiórczej hydrolizie, w wyniku czego powstaje zmodyfikowana cząsteczka inhibitora z nową wolną grupą karboksylową i aminową. Fragmenty zmodyfikowanego inhibitora łączy mostek

Tabela 3

Struktura centrum reaktywnego ziemniaczanych inhibitorów proteaz

Inhibitor ziemniaczany	Centrum reaktywne	Struktura centrum reaktywnego	Pozycja piśmien nictwa
' I	antychymotrypsy-	—Leu56—	35
	nowe	—Asx57—
II-a	antytrypsynowe	—L.ys6ł—	37
		—Ser64—
| Il-b	antytrypsynowc	—Lys -Ser—	38
proteaz	antytrypsynowe	—Lys46—	57
serynowych		—Gln47—
	antychymotrypsy-	—Leu75—	58
	nowe	—Val76—
poliwalen-	antytrypsynowe	—Arg—X—	30
cyjny

dwusiarczkowy, którego obecność warunkuje działanie antyproteolityczne. Redukcja i karboksymetylacja mostka dwusiarczkowego zmodyfikowanego inhibitora powoduje rozerwanie cząsteczki na dwa fragmenty, co unieczynnia inhibitor. Odszczepienie od zmodyfikowanego antytrypsyno-wego centrum reaktywnego C-końcowej lizyny, za pomocą karboksypep-tydazy B lub od zmodyfikowanego antychymotrypsynowego centrum reaktywnego C-końcowej leucyny, za pomocą karboksypeptydazy A, unie-