3870137129

14 W BOCIAN L KOZERSKI

2cro 4CDD ecco góro

Gy T²/rr?

R\sunek 9 PFG-NMR, nach) lenie prost} ch proporcjonalne jest do współczynników dyfuzji wolnego DNA,

wolnej kamptotecyn\ (CPT) i kompleksu CPT DNA

Spektroskopię NMR \Yykorzystuje się również coraz częściej w badaniach prze-siewowĄch (ang. screemng) [22] oddziaływania ligandóyy, w urn zwłaszcza potencjalnych leków, z biocząsteczkami. Metody pozwalające zidentyfikować te oddziaływania można podzielić na dwie główne kategorie:

1)    monitorujące sygnały NMR pochodzące z ligandu,

2)    monitorujące sygnały NMR pochodzące z biocząsteczki.

Metody należące do pierwszej kategorii, wykorzystują zwykle duże różnice w szy bkości rotacji i translacji małej cząsteczki (ligandu) \y stanie yyolnym i yy stanie zyyiązanym z dużą biocząsteczką. W spektroskopii NMR różnice te obsenyuje się badając zmiany- yyartości czasóyy relaksacji 7j i T, oraz zmiany yyspólczy unika dyfuzji. Czasem yyykorzystuje się róyynież yy eyynątrzcząsteczkoyyy lub międzycząs-teczkoyyy transfer magnetyzacji. Zaletą metod monitorujących ligandjest to, że y\y-magają relatywnie nieyyielkich ilości nie znaczonej biocząsteczki. oraz umożliyyiają przebadanie yvielu ligandóyy yy trakcie jednego eksperymentu, istnieje jednak niebezpieczeństwo nie wykrycia ligandóyy bardzo silnie związanych z biocząsteczką.

Metod}^- z kategorii drugiej, monitorujące biocząsteczkę, yyymagają zyyykle użycia wzbogaconych izotopoyyobiocząsteczek (^l3C i ^l5N). Dająjednak możłiyyość uzys-kania cennych informacji strukturalnych, takich jak miejsce yyiązania ligandu. oraz informacji o naturze oddziaływań. Metody- te bazują głóymie na pomiarach zmian przesunięć chemicznych oraz na pomiarach yyykorzystujących transfer polaryzacji.

WZAJEMNE ODDZIAŁYWANIA BIOCZĄSTECZEK

Wzajemne oddziaływania cząsteczek biologicznych są podmiotem genomiki i proteomiki funkcjonalnej, kierunkóyy badań biologicznych rozwijanych szczegół-