BADANIE OGÓLNE MOCZU
Analityka ogólna i techniki pobierania materiału
Katedra Analityki Medycznej
Zakład Chemii Klinicznej
02/03.10.12
Iwona Bil-Lula
Brunzel NA. Diagnostyka Laboratoryjna.
Część I i II. Kemona H, Mantur M
(Red.). Elsevier U&P, Wrocław, 2010.
European Urinalysis
Guidelines
Efektywna diagnostyka chorób (w tym układu
moczowego) powinna się opierać o standaryzowane
procedury obejmujące: zbiórkę materiału, transport i
analizę sensu stricto.
W okresie od lat 1990 do 2000 wiele towarzystw i
grup roboczych (Finnich Working Group, NCCLS,
JCCLS) na całym świecie podejmowało próby
sformułowania rekomendacji obejmujących badanie
moczu.
W 2000 roku European Urinalysis Group (EUG) we
współpracy z ESCMID (European Society for Clinical
Microbiology and Infectious Diseases) pod
patronatem European Confederation of Laboratory
Medicine (ECLM) opracowała European Urinalysis
Guidelines.
Ze względu na brak nowszych zaleceń, wytyczne te
obowiązują do dnia dzisiejszego.
Cel badania ogólnego moczu
BADANIE OGÓLNE MOCZU JEST PRZYDATNE DO:
-
wykrywania i/lub różnicowania: chorób nerek i dróg
moczowych oraz chorób ogólnoustrojowych wpływających
na zmiany składu moczu: chorób wątroby, dróg
ż
ółciowych, zaburzeń gosp. wodno-elektrolitowej,
zaburzeń metabolicznych, zatruć (w ramach badania
przesiewowego)
-
oceny postępu zmian chorobowych
-
oceny skuteczności leczenia lub wystąpienia powikłań
Badanie ogólne moczu
•
Ocena właściwości fizycznych
•
Ocena właściwości chemicznych
•
Badanie mikroskopowe osadu moczu
Próbki moczu- najczęściej wykorzystywane do
analizy
(zalecenia ECLM)
1. Pierwsza poranna próbka moczu
(próbka standardowa)
- bezpośrednio po spoczynku nocnym (co najmniej 8 godz., pozycja leżąca), mocz
utrzymywany co najmniej 4 h w pęcherzu (mocz odpowiednio zagęszczony, dogodne
warunki do namnażania się bakterii)
- na czczo, bez wysiłku fizycznego
- środkowa porcja strumienia
- próbka zalecana do badania ogólnego moczu, badania cytologicznego, do oceny
białkomoczu ortostatycznego
2. Druga poranna próbka moczu
- Pojedyncza próbka, pobrana po 2-4 h od pierwszej porannej mikcji, po wypiciu 200 ml wody
po
godzinie 22.00 dnia poprzedniego
- Próbka podlega zmianom wynikającym z przyjmowania posiłków i aktywności fizycznej
- bardziej praktyczna w przypadku pacjentów ambulatoryjnych (gdy czas i warunki transportu
próbki
nie spełniają wymaganych kryteriów)
Rodzaje próbek moczu- najczęściej
wykorzystywanych do analizy c.d.
(zalecenia ECLM)
3. Próbka losowa
(oddana o dowolnej porze dnia, w dowolnej objętości, bez
przygotowania pacjenta).
- wykorzystywana głównie do wskazań doraźnych, nagłych np. ozn. narkotyków
- Obarczona wysokim prawdopodobieństwem wyników fałszywie ujemnych i/lub
dodatnich
- jako badanie ogólne przesiewowe (w wyniku należy uwzględnić, iż wartość
diagnostyczna wyniku jest ograniczona ze wzgl. na nieznane czynniki).
- Próbka ta idealnie nadaję się do badań cytologicznych , pobrana ze środkowego
strumienia po
uprzednim nawodnieniu pacjenta lub wykonaniu wysiłku fizycznego.
4. Próbka okresowa (pobierana w określonym przedziale czasowym) np.:
Próbka ze zbiórki dobowej:
-
odrzucić pierwszą poranną porcję moczu!!!
-
każdą kolejną zbierać do sterylnego pojemnika o poj. 2-3 L ze środkiem
konserwującym lub/i przechowywać w temp. +4°C, w zaciemnieniu
-
zbiórkę zakończyć dokładnie po 24 h, dołączając pierwszą poranną porcję moczu.
-
Zmierzyć objętość moczu dobowego , pobrać próbkę ok. 200 ml i przesłać w ciągu 30
min do lab.
Próbka okresowa - najczęstsze błędy
Włączenie do zbiórki dobowej dwóch porannych porcji moczu;
„zgubienie” próbki, co zmniejsza objętość całkowitą zbiórki i wpływa na stężenie
oznaczanych składników;
Niedokładny pomiar objętości całkowitej zbiórki;
Brak wymieszania próbki okresowej przed pobraniem próbki do badania
(niejednorodność próbki);
Nieprawidłowe przechowywanie próbki moczu pobieranego w ramach zbiórki
okresowej;
Ponieważ odpowiednio przeprowadzona zbiórka okresowa moczu ma znaczący wpływ
na
wiarygodność uzyskanego wyniku badania, należy bezwzględnie poinstruować pacjenta
(PISEMNA INSTRUKCJA)o prawidłowym przeprowadzeniu zbiórki okresowej !!!
Pobranie moczu do badania- inne metody
Metoda cewnikowania pęcherza moczowego
-
pacjent nieprzytomny
-
niemowlęta
-
dorośli ze wskazań doraźnych
(głównie do badań mikrobiologicznych lub badania ogólnego, nie pobierać moczu
z worka założonego na stałe)
Za pomocą punkcji nadłonowej pęcherza
-
u noworodków
-
u chorych z zakażeniem bakteryjnych dróg moczowych
-
u chorych z przerostem gruczołu krokowego, z założoną urostomią pęcherzową
-
wykonuje lekarz
Specjalne sterylne worki plastikowe, mocowane plastrami
(noworodki)
zbiórka maks. do 1 godziny (gwałtowny wzrost prawdopodobieństwa kontaminacji)
wysokie ryzyko zanieczyszczenia florą fizjologiczną skóry
POJEMNIKI NA PRÓBKI MOCZU
Próbka standardowa Zbiórka 24-h Mocz z cewnika Worki dla
niemowląt
(co najmniej 50 ml) (3 l)
Prawidłowe pobieranie próbki moczu do
badania- uwagi ogólne
Jakość próbki moczu jest kluczowa dla wiarygodności wyniku badania.
Niezbędnym warunkiem uzyskania wiarygodnego wyniku, odzwierciedlającego
aktualny stan zdrowia pacjenta jest uzyskanie próbki o właściwym zagęszczeniu!!!
Stopień zagęszczenia pobranej próbki jest zależny głównie od stopnia nawodnienia
pacjenta oraz od czasu inkubacji moczu w pęcherzu moczowym.
Nieprawidłowe pobranie jak również przechowywanie próbki moczu może
prowadzić do zmian jej składu, a przez to będą miały wpływ na wiarygodność
wyniku badania!!!
DLATEGO BEZWGLĘDNIE KAśDEGO PACJENTA NALEśY POINFORMOWAĆ USTNIE I
PISEMNIE
(najlepiej w formie popartej pismem obrazkowym)
O ZASADACH POPRAWNEGO POBRANIA PRÓBKI MOCZU DO BADANIA
LABORATORYJNEGO!!!
Pobieranie standardowej próbki moczu do badania
(wg. ECLM i EUG)
1.
Mocz do badania ogólnego należy pobrać rano, na czczo, po wypoczynku
nocnym, przy zachowaniu standardowej diety, po odstawieniu leków (jeśli
nie zaburza to leczenia).
2.
Mocz do badania należy pobrać po porannej toalecie zewnętrznych
narządów moczowo-płciowych; (mycie tylko wodą!, osuszenie ręcznikiem
papierowym)
3.
Mocz należy oddać do czystego, suchego, sterylnego (badanie
mikrobiologiczne) i przeźroczystego naczynia jednorazowego użytku (50-
100 ml)
4.
Pobrać porcję świeżego moczu z porannej mikcji, po odrzuceniu
pierwszej porcji (ze środkowego strumienia), unikając kontaktu moczu z
okolicami narządów płciowych i rękami
5.
Próbkę dostarczyć do laboratorium w możliwie najkrótszym czasie od
pobrania (do 30 min). W przeciwnym razie należy próbkę odpowiednio
Pobieranie standardowej próbki moczu do badania
(wg. ECLM i EUG)- instrukcja w formie graficznej
Zalecenia przed planowanym pobraniem
moczu
Unikanie znacznych wysiłków i długotrwałych marszów;
Unikanie pobrań w okresie okołomenstruacyjnym i podczas
miesiączki;
Unikanie stosunków płciowych przynajmniej na dzień przed
pobraniem moczu do badania (podwyższona ilość białka i komórek
w moczu);
Unikanie skrajnego ograniczenia lub nadmiernego przyjmowania
płynów przez pobraniem moczu;
PRAWIDŁOWE OZNAKOWANIE PRÓBKI
MOCZU
Pojemnik zawierający próbkę moczu, przesłany do laboratorium powinien zawierać
następujące
informacje:
Imię i nazwisko pacjenta
Numer pesel (data urodzenia)
Metoda pobrania próbki
Data i godzina pobrania próbki (czas zbiórki)
Symbol dodanego środka konserwującego
lub kod identyfikujący pacjenta i rodzaj próbki
Informacje należy umieścić na pojemniku. Nie umieszczać na zakrętce!!!
KONSERWACJA PRÓBEK MOCZU
Materiał powinno się dostarczyć do laboratorium czasie do 30 min od pobrania (nie dłuższym niż 2 godz.)!
Środek/sposób
konserwujący
Zastosowanie
Zalety/Wady
Schłodzenie próbki do
temp. 4°C
Badanie ogólne moczu do 4 godzin od pobrania
Tak pobrana próbka nie nadaje się do oceny krystalurii (w schłodzonym
moczu wytrącają się np. moczany i fosforany);
Zamrożenie do
-20°C
Oznaczanie: bilirubiny, urobilinogenu; aminokwasów,
Kreatyniny;
Zniszczenie elementów morfotycznych;
Kwas borowy
Kw. ortoborowy
Oznaczanie: białka, mocznika, 5-HIAA, hydroksyproliny;
Konserwuje białka i el. upostaciowione;
Nie interferuje w badaniu ogólnym (poza pH);
Działa bakteriostatycznie
Może interferować w pomiarach leków i hormonów
Kwas solny
Oznaczenia: fosforanów, aminokwasów, Ca, amin
katecholowych, szczawianów, cytrynianów, cystyny, 5-
HIAA, hydroksyproliny, kwasu homowalininowyego
(HVA), kwasu wanilino-migdałowego (VMA)
Uszkadza elementy komórkowe, wytrąca substancje rozpuszczone;
Nie może być stosowany w analizie ogólnej moczu;
Lodowaty kw. octowy
Oznaczenia: hormony, kwas wanilinomigdałowy, kwas
homowanilinowy
Uszkadza elementy komórkowe, wytrąca substancje rozpuszczone;
Nie może być stosowany w analizie ogólnej moczu;
Tymol
Konserwacja osadu;
Hamuje wzrost bakterii i drożdży; Zabezpiecza glukozę przed rozpadem;
Konserwuje el. upostaciowione;
interferuje w ozn. białka;
Utrwalacz Saccomanno
Badanie cytologiczne;
Konserwacja elementów komórkowych;
Formalina
Konserwacja osadu;
Konserwuje El. upostaciowione;
Silny reduktor- zaburzenia oznaczeń chemicznych;
Na
2
Co
3
Oznaczanie porfiryn i porfobilinogenu; URB
Nie może być stosowany do ogólnej analizy moczu;
NaF
Oznaczanie glukozy i leków;
Hamuje glikolizę;
Zaburza pomiary na testach paskowych;
ZMIANY PODCZAS PRZECHOWYWANIA
np..:
Zmiana koloru (np. utlenianie bilirubiny do zielonej biliwerdyny, Hb do
MetHb, URB do urobiliny)
Zapach amoniakalny (rozkład mocznika- do amoniaku)
Wzmocniona woń (namnażanie Pseudomonas sp.)
Wzrost zmętnienia (wzrost bakterii, krystalizacja subst. rozpuszczonych)
Wzrost pH- (rozkład mocznika do amoniaku)
Spadek pH (rozkład bakteryjny glukozy do kwasów metabolicznych )
Spadek ilości glukozy (glikoliza bakteryjna, glikoliza komórkowa)
Spadek ilości ciał ketonowych (spontaniczne ult. kwasu acetooctowego do
acetonu, lotny; rozkład bakteryjny kw. acetooctowego)
Spadek bilirubiny sprzężonej (utlenianie do biliwerdyny, hydroliza do wolnej
bilirubiny)
Wzrost azotynów (wzrost bakterii)
Degradacja elementów morfotycznych (zwłaszcza w moczu hipotonicznym,
zasadowym)
SCHEMAT BADANIA MOCZU
TESTY PASKOWE
Wstępne badanie moczu
Chemia sucha (reakcja wybranego składnika moczu z układem
odczynników umieszczonym na stałym podłożu, reagującym
zmianą barwy na obecność poszukiwanego składnika)
Badanie półilościowe (ocena wzrokowa) i ilościowe (czytnik
pasków- pomiar reflektometryczny)
Szybkie i proste w użyciu
Stosowane w moczu nie odwirowanym
Mała czułość (zależna od producenta!!!), niska swoistość
Przed interpretacją wyniku należy zapoznać się z
charakterystyką testu
Obecnie większość laboratoriów stosuje testy paskowe do
rutynowej analizy chemicznej moczu
Każdy nieprawidłowy składnik moczu wykryty testem
paskowym wymaga potwierdzenia badaniem biochemicznym i
mikroskopowym !
TESTY PASKOWE C.D.
Pasek testowy (np. Multistix 10 SG, Siemens) zawiera pola testowe
(1-kilkunastu) nasączonych odczynnikami do wykrywania m.in. :
-
Białka
-
Glukozy
-
Ciał ketonowych
-
Barwników żółciowych (BIL, URB)
-
Związków nitrowych
- Erytrocytów
-
Leukocytów
-
pH
-
Bakterii
-
Ciężaru właściwego
-
Wit.C
BADANIE TESTEM PASKOWYM:
1)
Mocz dokładnie wymieszać w pojemniku
2)
Zanurzyć pasek testowy w moczu, tak aby nasączyć wszystkie pola
testowe
3)
Po wyciągnięciu nasączonego paska, należy trzymać go w pozycji
poziomej, aby zapobiec przelewaniu moczu pomiędzy polami
reakcyjnymi
4)
Usunąć nadmiar moczu, przesuwając poziomo ułożony pasek
wzdłuż dłuższej krawędzi i pionowo wzdłuż krótszej po brzegu
pojemnika z moczem lub dotykając paskiem bibuły
5)
Inkubować pasek w pozycji poziomej przez czas zalecany przez
producenta, w temp. pokojowej
6)
Odczytać wyniki oznaczeń. Zabarwienie pól testowych należy
porównać wzrokowo z barwną skalą załączoną do opakowania lub
naklejoną na opakowaniu. Pasek położyć na białym, dobrze
oświetlonym podłożu lub trzymać poziomo przy barwnej skali na
opakowaniu, tak aby odczytywane pola korespondowały z polami
na skali barwnej
Pole kompensacyjne- zabarwienie tego pola świadczy o obecności w moczu
substancji barwnych, które barwią bibułę testową i mogą być przyczyną
błędnych odczytów. Należy zbadać mocz metodami chemicznymi i
INNE TESTY PASKOWE
-
albumina i/lub kreatynina
np. CLINITEK® Mikroalbumin lub MicroalbuPHAN
-
(większa czułość (nawet 12-20 mg/l) i swoistość niż standardowe paski do badania moczu)
-
Metody immunochemiczne (Immunodip, Paski odczynnikowe Micral)
-
Reakcje chemiczne (Clinitek, MultistixPRO)
Badania przesiewowe:
-
cukrzyca,
-
choroby nerek,
-
nadciśnienie,
-
Uogólniona choroba naczyń
TESTY PASKOWE
Parametr
badany
Zasada testu
Składniki wykrywane
Czułość testu na
podstawie
Multistix ,
Chemstrip,
Rapignost
Wynik fałszywie
pozytywny
Wynik fałszywi ujemny
Gęstość
względna
zmiana zabarwienia wskaźnika
(błękit bromotymolowy)
protony polielektrolitów
uwalniane w zależności
od ilości subst.
zjnizowanych w moczu
Test nie uwzględnia zw.
niedysocjujących
(glukoza, mocznik,
kreatynina)
1,000-1,030
duże stężenia jonów
dwuwartościowych,
duże stężenie białka,
kwas mlekowy i
ketokwasy
silnie alkaliczne środowisko
St. Glukozy i mocznika > 1g/dl
pH
zmiana zabarwienia wskaźnika
(błękit bromotymolowy i
czerwień metylowa)
H
+
pH 5-9
zbyt długie przechowywanie moczu może prowadzić
do jego alkalizacji (rozkład mocznika do amoniaku
przez bakterie)
- inhibitory anhydrozy węglanowej powodują
alkalizację moczu
- leki zakwaszające
- interferencja dużej ilości białka
Białko
zmiana zabarwienia wskaźnika
(błękit tetrabromofenolowy) w
zależności od ilość białek, które
są akceptorami H
+
Albumina, mniej czułe na
globuliny, Hb,
mukoproteiny
Praktycznie nie
wykrywają białka B-J
15-30 mg/dl
chinina, chlorchinina
alkalizacja moczu
nadmierny wysiłek
fizyczny i pozycja
stojąca
duża gęstość wzgl.
Obecność białka innego niż
albumina, silne zabarwienie
moczu
Glukoza
reakcja oksydazy glukozy z
wytworzeniem nadtlenku
wodoru utleniającego
chromogen w obecności
peroksydazy
glukoza
40-75 mg/dl
detergenty obecne w
moczu (utl.)
HCL
kwas askorbinowy, ketony,
środowisko H
+,
; glikoliza
wynikająca z niewłaściwego
przechowywania próbki
Parametr
badany
Zasada testu
Składniki
wykrywane
Czułość
Wynik fałszywie
pozytywny
Wynik fałszywie ujemny
Bilirubina
sprzęganie z solą diazoniową w
środowisku H
+
bilirubina
zestryfikowana
0,4-0,8 mg/dl
fenazopirydyna
(w moczu o zmienionej
barwie zaleca się
wykonanie próby Rosina
lub zastosowanie testu
tabletkowego)
rozkład pod wpływem światła
zbyt długie przechowywanie
moczu,
azotyny (inhibitory)
kwas. askorbinowy
URB
sprzęganie z p-DEABA w środowisku
H
+
urobilinogen
0,2-1 mg/dl
Kw. p-aminobenzoesowy,
sulfonamidy,
porfobilinogen
rozpad pod wpływem światła
rozpad pod wpływem formaliny
(środek konserwujący)
nie wykrywa niedoboru!!!
Ketony
R. kwasu acetooctowego i acetonu z
nitropruzydkiem sodu i glicyną w
środowisku OH-
(paski Chemstrip i Rapignost)
kwas acetooctowy,
aceton
5-10 mg/dl
Substancje zawierające
grupy –SH;
fenyloketony
wysoka g.wzgl.
silne zabarwienie moczu;
lewodopa
zbyt długie przechowywanie
moczu;
Obecność kwasu beta-
hydroksymasłowego
Erytrocyty
(krew)
reakcja utleniania nadtlenku
kumenu i tetrametylobenzydyny
pod wpływem aktywności
pseudoperoksydazowej Hb i Mb
Hb erytrocytów,
Hb wolna,
mioglobina
5-20/µl
0,02-0,06 mg/dl
bakteriuria (peroksydazy)
leki (metronidazol, L-dopa)
barwniki spożywcze
krew menstruacyjna
zespół zmiażdżenia
Silne środki utl.(mydła,
detergenty)
białkomocz, kwas askorbinowy i
inne reduktory
wysoka g. wzgl.
formaldehyd
Ponieważ istnieje niebezpieczeństwo uzyskania wyników fałszywie poz/neg przy zastosowaniu jedynie testu
paskowego, wg.
zaleceń ECLM ocena morfologiczna osadu moczu stanowi integralną część badania ogólnego !!! W
praktyce lab. dodatni
Parametr
badany
Zasada testu
Składniki
wykrywane
Czułość
Wynik fałszywie
pozytywny
Wynik fałszywie
ujemny
Leukocyty
Liza leukocytów, uwolnienie
estareazy granulocytarnej,
utlenianie estru indoksylu i r.
z solą dwuazową
granulocyty i monocyty,
makrofagi
5-20/µl
wydzielina z pochwy
nieswoista reakcja z
peroksydazą
bakteryjną,
formaldehyd
detergenty ult.
Intensywne
zabarwienie moczu
wysoka g. wzgl.; wysokie st.
glukozy >20 g/L, białka >5g/L,
Tetracykliny, cefalosporyny
nie wykrywa limfocytów!!!
Wit.C
Azotyny
Redukcja azotanów
pokarmowych do azotynów
przez bakterie, reakcja z
aminą aromatyczną z
utworzeniem soli
dwuazowej, sprzęganie soli
dwuazowej z pochodną
aromatyczną do barwnej
pochodnej
azotyny powstające pod
wpływem reduktazy
azotanowej
Klebsiella, E. coli,
Proteus., Aerobacter,
Citrobacter ,
Staphylococcus spp.,
0,05-0,1mg/dl
Mocz barwny,
Namnażanie się
bakterii w wyniku
złego
przechowywania
bakterie nie wytwarzające
reduktazy;
zbyt krótkie zatrzymanie
moczu w pęcherzu (<4 h);
zbyt małe stężenie azotanów w
moczu
kwas askorbinowy,
bakterie gram+
Kwas
askorbinowy
odbarwienie 2,6-
dwuchlorofenoloindofenolu
w ujawnieniem koloru
podłoża
kwas askorbinowy
>10 mg/dl
inne substancje
redukujące
obecność substancji silnie
utleniających
KONTROLA JAKOŚCI PASKÓW
codzienna kontrola wyglądu pasków testowych;
codzienna kontrola numeru partii;
Codzienna kontrola pól reakcyjnych przy użyciu kontroli co najmniej
pozytywnej i negatywnej:
o
Jako
kontrolę negatywną
można zastosować wodę destylowaną
o
Jako
kontrolę pozytywną
można stosować materiał
wieloskładnikowy przygotowany we własnej pracowni lub dostępny
na rynku materiał kontrolny;
o
Należy pamiętać, aby dobór stężeń parametrów w materiale
kontrolnym odpowiadał zakresowi krytycznemu danego parametru
na pasku !!!
AUTOMATYCZNE CZYTNIKI PASKÓW
ECLM zaleca ocenę testów paskowych przy użyciu czytników
automatycznych. W ten sposób istnieje szansa ograniczenia błędów
wynikających z subiektywnej obserwacji analityka i zachowania
stałych
warunków odczytu.
Zalety:
Stałość czasu odczytu pasków
Stałość odczytu intensywności barwy pól reakcyjnych
Eliminacja wpływu czynników jak:
-
naświetlenie
-
Subiektywna ocena zabarwienia analityka
Duża przepustowość ( nawet kilkaset wyników/godz.)
Wady:
Brak zdolności niektórych czytników do kompensacji barw wynikających
z różnego zabarwienia moczu
AUTOMATYCZNE CZYTNIKI PASKÓW
Wynik moczu prawidłowego- wydruk z czytnika
TESTY TABLETKOWE I CHEMICZNE
PRÓBÓWKOWE
WYKONYWANE W CELU:
1)
POTWIERDZENIA WYNIKÓW UZYSKANYCH TESTEM PASKOWYM;
2)
JAKO METODY DO PRÓBEK MOCZU O INTENSYWNYM ZABARWIENIU;
3)
JAKO TESTY O WIĘKSZEJ CZUŁOŚCI DLA OKREŚLONYCH PARAMETRÓW;
4)
ZE WZGLĘDU NA INNĄ SWOISTOŚĆ NIś TESTY PASKOWE
TESTY TABLETKOWE
TESTY CHEMICZNE PRÓBÓWKOWE
Np.:Icotest (BIL), Clinitest (cukry redukujące), Acetest
(ketony)
• Ulegają uszkodzeniu przy ekspozycji na światło,
nadmiernej temp., wilgoci
• Konieczność codziennej kontroli jakości tabletek
(zmiana barwy, zanieczyszczenie, uszkodzenie,
przekroczona data ważności);
• Używane jako metoda alternatywna do próbek
moczu o intensywnym zabarwieniu
(zafałszowane wyniki testów paskowych);
• Reakcja identyczna jak na pasku;
•
ś
wieże odczynniki,
• codzienna kontrola jakości odczynników
WYNIK BADANIA OGÓLNEGO MOCZU
Wyniki jakościowe
(dodatni, ujemny)
Jednostki ustalone arbitralnie w skali porządkowej
(ujemny, 1+, 2+, 3+...)
•
Pojedyncze stężenie ustalone arbitralnie: 1+ (0,3 g/L) lub
•
Zakres pomiarowy:1+ (0,2-1,0 g/L)
Wyniki ilościowe
(konkretna wartość liczbowa oceniona metodą ilościową)
WŁAŚCIWOŚCI FIZYCZNE MOCZU
WŁAŚCIWOŚCI FIZYCZNE MOCZU
Barwa
bezbarwny
jasnożółty
żółty
ciemnożółty
pomarańczowożółty
czerwony
krwisty
brunatny
Przejrzystość
klarowny
lekko mętny
mętny
Zapach
Swoisty (obecnie nie umieszczany na wyniku badania)
Nieswoisty
Ciężar właściwy
1,003-1,035 g/cm
3
WŁAŚCIWOŚCI CHEMICZNE MOCZU
Parametr
Odczyn
kwaśny
obojętny
zasadowy
Białko
brak
Glukoza
brak
Bilirubina
brak
Urobilinogen
prawidłowy
Ciała ketonowe
brak
Krew
brak
DOBOWA OBJĘTOŚĆ MOCZU
600 ml- 2500 ml /dobę
uzależniona od podaży płynów
300 ml/dobę - objętość minimalna, pozwalająca usunąć zbędne produkty
przemiany materii
OLIGURIA (skąpomocz)- zmniejszone wydalanie moczu do 400 ml/dobę
ANURIA (bezmocz)- wydalanie moczu w ilości mniejszej niż 100 ml/dobę
POLIURIA (wielomocz)- wydalanie moczu w ilości przekraczającej 3 l/ dobę
NYKTURIA- wydalanie w ciągu nocy więcej niż 500 ml moczu (możliwość
wystąpienia przewlekłej, postępującej niewydolności nerek)
Przyczyny zaburzonej objętości wydalanego moczu:
- choroby miąższowe nerek; przewlekła niewydolność nerek (
faza zaawansowana)
-
kamica nerkowa
- cukrzyca (nawet do 8 l na dobę)
- zaburzenia wydzielenia ADH (moczówka prosta)
ZMĘTNIENIE MOCZU
Przyczyny
Uwagi
Wytrącenie się
kryształów
(bezpostaciowych fosforanów w moczu obojętnym lub zasadowym) lub bezpostaciowych
moczanów (mocz obojętny lub kwaśny).
Niska temp. (4°C) przechowywania moczu sprzyja krystalizacji!
Forma sprawdzenia: fosforany zanikają pod wpływem silnego kwasu nieorganicznego moczany
zanikają po podgrzaniu moczu
Obecność ropy
Infekcje
Forma sprawdzenia: zmętnienie nasila się po dodaniu kwasu i nie zanika po podgrzaniu
Drobnoustroje
zmętnienie jednolite, opalizujące, nie zanika po odwirowaniu
Erytrocyty
Forma sprawdzenia: mocz brunatnieje po dodaniu silnego kwasu i/lub po ogrzaniu; erytrocyty
opadają na dno po odwirowaniu
Ś
luz, kał, kontrast
radiologiczny,
kamienie
Przetoka odbytniczo-pęcherzowa
Zanieczyszczenie
Leukocyty,
Drożdże, rzęsistek
Plemniki
Proces zapalny
Traktowane jako zanieczyszczenia z dróg rodnych
Traktowane jako zanieczyszczenie
Tłuszcz,
Chłonka,
Parafina
Zespół nerczycowy,
Niedrożność przewodów limfatycznych,
Kremy dopochwowe
Barwa moczu
ZMIANY ZABARWIENIA MOCZU
BARWA
PRZYCZYNA
UWAGI
śółty
urochrom,
urobilina, uroerytryna (prawidłowe ilości)
Barwa prawidłowa
Bezbarwny, jasnożółty
Rozcieńczenie moczu
Moczówka prosta, Środki moczopędne
Duża podaż płynów
Cytrynowo-żółta
Senes, chryzarobina, tetracykliny
Mocz kwaśny
śółty
Ryboflawina
Preparaty witaminowe (B)
śółto-pomarańczowa
Zagęszczenie moczu
Bilirubina, urobilina, sulfsalazyna
Utrata płynów, niska podaż płynów,
odwodnienie, gorączka
ś
ółta piana, mocz zasadowy,
śółto-zielona
Bilirubina, biliwerdyna
Ryboflawina
ś
ółta piana
Bursztynowa
Bilirubina, biliwerdyna, nitrofurantoina
ś
ółta piana (bilirubina)
Czerwona lub brązowa
Hb, Ery, krew menstruacyjna.
mioglobina,
Porfiryny
MetHb
Barwniki: fuksyna, buraki, b. anilinowe
L-dopa, tymol, preparaty żelaza
Dodatnie białko w teście paskowym, krew
Mentsruacyjna, skrzepy, śluz, uszkodzenie mięśni
Ujemne białko w teście paskowym, może
być bezbarwny
Kwaśne pH
Barwniki w żywności, środki konserwujące
Czerwono-pomarańczowa
Senes, chryzarobina
Rifampicyna
Mocz zasadowy
Leczenie przeciwgruźlicze
Czerwono-różowa
moczany
Masywna krystaluria
Purpurowa
Porfiryny
Możliwość moczu bezbarwnego
Brązowo-czarna
MetHb, kw. homogentyzynowy,
melanina
Krew, środowisko kwaśne, alkaptonuria
OBECNOŚĆ PIANY
MOCZ PRAWIDŁOWY
MOCZ O
PODWYśSZONYM
STĘśENIU BIAŁKA
(albuminy)
MOCZ O
PODWYśSZONYM
STĘśENIU BILIRUBINY
Po odpowiednio długim
mieszaniu biała piana,
zanikająca krótko po
odstawieniu próbki
Biała, gęsta piana o dużej
stabilności
ś
ółta piana
ODCZYN MOCZU
pH=4,5-8,0 (w zależności od diety),
przy diecie mieszanej, świeży mocz pH ok. 5,0-6,0
Ocena testem paskowym (pH) , papierkiem wskaźnikowym (kwaśny, obojętny,
zasadowy) lub pehametrem
Badanie przydatne do monitorowania leczenia (leki alkalizujące/zakwaszające) (UTI,
kamienie) i u pacjentów z zaburzeniami równowagi kwasowo-zasadowej
Mocz kwaśny
Mocz zasadowy
Mocz obojętny:
•
Dieta mięsna, wysokobiałkowa
•
Gorączka
•
Kwasica metaboliczna
- cukrzyca
- głodówka
- mocznica
•
Kwasica oddechowa
•
Niewydolność nerek
•
Leki zakwaszające np. wic.C
•
Infekcje dróg moczowych
bakteriami wytwarzającymi
kwasy np. Escherichia coli
•
Infekcje dróg moczowych
bakteriami wytwarzającymi
ureazę
•
Dieta jarska
•
Dieta niskowęglowadanowa
•
Zasadowica metaboliczna
•
Zasadowica oddechowa
•
Mocz dziecięcy
• Dieta jarska
CIĘśAR WŁAŚCIWY MOCZU
Przypadkowa próbka moczu: 1,001-1,035 g/cm
3
(1001-1035 g/dm
3
)
Mocz dobowy: 1,015-1,020 g/cm
3
Wartości <1,010 mogą świadczyć o nadmiernym nawodnieniu a >1,020 o
odwodnieniu pacjenta
Zależy od:
- podaży płynów
- zawartości substancji rozpuszczonych (zjonizowanych i niezjonizowanych)
(elektrolity, glukoza, fosforany, węglany, kontrast radiologiczny )
- zdolności nerek do zagęszczania i rozcieńczania moczu
Ocena gęstości względnej:
•
Urometr (coraz rzadziej stosowany) (pomiar gęstości)
•
Densytometr drgań harmonicznych w stacjach roboczych do analizy moczu
( fale dźwiękowe) (pomiar gęstości)
•
test paskowy (zmiany pKa w polielektrolicie)
•
refraktometr (metoda referencyjna) (współczynnik refrakcji)
CIĘśAR WŁAŚCIWY MOCZU C.D.
ZWIĘKSZONY CIĘśAR WŁAŚCIWY
MOCZU
ZMNIEJSZONY CIĘśAR WŁAŚCIWY
MOCZU
Odwodnienie
Zmniejszona diureza
Proteinuria
Glukozuria
Choroby gorączkowe
Obecność środków kontrastowych
Podaż środków wielkocząsteczkowych
(mannitol)
Nadmierna podaż płynów
Ś
rodki moczopędne
Moczówka prosta
Choroby nerek:
- Zapalenie kłębuszków nerkowych
- Odmiedniczkowe zapalenie nerek
- Nadciśnienie nerkopochodne
- Przewlekła niewydowlność nerek
- Uszkodzenie cewek nerkowych przez leki
Wstrząs i ostra niewydolność krążenia
OSMOLALNOŚĆ
Osmolalność moczu- stężenie substancji osmotycznie czynnych
(mole/milimole) na 1 kg rozpuszczalnika (wody).
Wartość prawidłowa: 275-900 mOsm/kg H
2
O
Zależy gównie od stężenia elektrolitów, mocznika i amoniaku.
Pomiar za pomocą osmometru (obniżenie punktu zamarzania moczu w
stosunku do punktu zamarzania wody).
1 miliosmol (1 mmol/kg wody) powoduje spadek temp. zamarzania
cieczy o 1,86°C.
Lepsza ocena zagęszczenia moczu. Powinna być oceniania u chorych
na intensywnej terapii i żywionych pozajelitowo.
ZAPACH MOCZU
Swoisty (świeżo oddany mocz osoby zdrowej)
* Obecnie nie umieszcza się informacji o zapachu swoistym. Zmiana
swoistego
zapachu wymaga odnotowania na wyniku badania.
Brak zapachu – małe dzieci i mocz rozcieńczony
Zapach owocowy- obecność związków ketonowych (aceton)
Zapach H
2
S- obecność ropy lub cystynurii
Zapach amoniaku- zbyt długie przechowywanie moczu (temp. pok.)
Zapach spoconych stóp- kwasica izowalerianowa i glutarowa
Zapach syropu klonowego- Choroba syropu klonowego
Zapach mysi- fenyloketonuria
Zapach kapusty- malabsorpja metioniny
Mocz zjełczały- tyrozynemia
WŁAŚCIWOŚCI CHEMICZNE MOCZU-
GLUKOZA
Mocz prawidłowy: nieobecna (15-60 mg/dl; < 300 mg/dobę- ilość
niewykrywalna metodami rutynowymi)
Glukozuria (cukromocz)- zwiększone wydalanie glukozy z moczem wynika
z :
1) podwyższonego stężenia glukozy w surowicy i przekroczenia progu
nerkowego (160-180 mg/dl)
(wartość progu nerkowego jest zmienna osobniczo; w nefropatii
cukrzycowej ulega obniżeniu)
2) zaburzonej resorpcji glukozy w kanalikach nerkowych
GLUKOZURIA PRZEDNERKOWA
GLUKOZURIA NERKOWA
Cukrzyca
Ch. wątroby i trzustki
Zespół Cushinga
Akromegalia
Nadczynność tarczycy
Stres, stany lękowe
Udar mózgowo-naczyniowy
Zatrucie metalami ciężkimi
Choroby genetyczne
Ciąża
Zespół Fanconiego
TESTY PASKOWE DO WYKRYWANIA I
OZNACZANIA GLUKOZY
oksydaza glukozy
glukoza + O
2
+ H
2
O kwas glukonowy + H
2
O
2
peroksydaza chrzanowa
H
2
O
2
+ chromogen (red) chromogen (utl) + H
2
O
AKCEPTORY O
2
w reakcji wskaźnikowej:
4-aminofenazon (klasyczna reakcji Trindera, λ=500 nm)
4- aminoantypiryna
3-metylo-2-benzotiazolina
Wyniki fałszywie dodatnie: detergenty obecne w moczu (utl.), HCL, peroksydazy
Wyniki fałszywie ujemne: kwas askorbinowy, ketony> 40 mg/dl, kwas. gentyzynowy,
ś
rodowisko H
+,
; glikoliza wynikająca z niewłaściwego przechowywania próbki
WYKRYWANIE CUKRÓW W MOCZU- METODY
CHEMICZNE
nieswoiste dla glukozy (cukry: glukoza, fruktoza, maltoza, galaktoza i
pentoza i inne substancje redukujące)
wyniki fałszywie dodatnie:
mocz stężony
duża zawartość kreatyniny, barwników moczowych, kw.
glukuronowego
proteinuria
podaż kofeiny, morfiny, dekstranu
PRÓBY REDUKCYJNE
1
) Próba Benedicta (powszechnie jako test tabletkowy)
glukoza, aldo-, ketocukry
Siarczan miedziowy różny odcień barwy w zależności od
(zasadowy r-ór winianu sodowo-potasowego)
stężenia cukru (żółty/czerwony)
Czułość: 0,25 g/dl
2)
Próba Fehlinga
(czułość 0,1 g/dl)
glukoza
temp.
Wodorotlenek miedzi Tlenek miedzi Czerwony osad
(
zasadowy r-ór winianu sodowo-potasowego
)
*
redukcja bez ogrzewania (kwas homogentyzynowy)
3)
Próba Nylandera
(najlepsza)
glukoza
Wodorotlenek bizmutu Bizmut metaliczny (czarny osad)
(zasadowy r-ór winianu sodowo-potasowego)
Czułość: 0,05 g/dl
PRÓBY REDUKCYJNE
RÓśNICOWANIE CUKRÓW
REDUKUJĄCYCH
Dodatni test skryningowy na obecność cukrów redukujących u
dorosłych w większości przypadków wskazuje na glukozurię.
W przypadku dzieci < 2 r.ż. rutynowe badanie moczu powinno
zawsze włączać test skryningowy na obecność substancji
redukujących (np. Clinitest) ze względu na ryzyko wrodzonej
galaktozemii prowadzącej do ciężkich powikłań (test paskowy
wykrywa glukozę).
W przypadku dodatniego testu na obecność cukrów
redukujących , konieczna jest ich identyfikacja. Obecnie do tego
celu stosuje się metody chromatograficzne (chromatografia
bibułowa, chromatografia cienkowarstwowa).
GLUKOZA W MOCZU
Obecnie, stężenie glukozy w moczu jest zastępowane oznaczaniem
stężenia glukozy we krwi.
Oceny w moczu dokonuję się jednak, w celu:
o
Sprawdzenia niepoprawnego oznaczenia we krwi
o
U chorych nie pozwalających na pobranie krwi
o
U kobiet w ciąży
OZNACZENIE ILOŚCIOWE GLUKOZY
Stężenie glukozy w moczu zależy od szeregu czynników, m.in. :
- wielkości diurezy,
- podaży i rodzaju spożywanych pokarmów węglowodanowych,
- wartości progu nerkowego (cecha odmienna osobniczo),
- czasu gromadzenia moczu w pęcherzu,
- metabolizmu leukocytów i bakterii,
- czasu przechowywania moczu przez badaniem.
Z tego względu uważa się , że ocena stężenia glukozy w moczu ma małą wartość
diagnostyczną, a ocena półilościowa testem paskowym niesie wystarczającą
informację dla klinicysty. Na prośbę klinicysty glukozę można oznaczyć w moczu
metodami enzymatycznymi (heksokinazową, GOD/POD)
METODY ENZYMATYCZNE OZNACZANIE
GLUKOZY
METODA HEKSOKINAZOWA
ZASADA: ufosforylowanie glukozy pod wpływem heksokinazy do glukozo-6-fosforanu, który pod wpływem
dehydrogenazy jest specyficznie utleniany do 6-fosfoglukonianiu, redukując NADP+ do NADPH
2
.
Pomiaru absorbancji dokonuje się przy 340 nm.
Obserwuje się wzrost absorbancji proporcjonalny do stężenia glukozy.
heksokinaza
glukoza + ATP glukozo-6-P + ADP
dehydrogenaza G-6-P
glukozo-6-P + NADP
+
6-fosfoglukonian + NADPH + H
referencyjna
ilościowa
czuła i swoista
dobra dokładność
wysoka precyzja
kinetyczna lub punktu końcowego
manualna lub zautomatyzowana
GOD/POD
ZASADA: glukoza w środowisku O
2
, ulega utl. pod wpływem oksydazy do kw. glukonowego i
H
2
O
2
wykorzystany w reakcji wskaźnikowej z peroksydazą..
oksydaza glukozy
glukoza + O
2
+ H
2
O kwas glukonowy + H
2
O
2
peroksydaza chrzanowa
H
2
O
2
+ chromogen (red) chromogen (utl) + H
2
O
AKCEPTORY O
2
w reakcji wskaźnikowej:
4-aminofenazon (klasyczna reakcji Trindera, λ=500 nm)
4- aminoantypiryna
3-metylo-2-benzotiazolina
Pierwsza reakcja jest swoista i specyficzna, natomiast reakcja wskaźnikowa nie
jest specyficzna !!
ilościowa
dobra swoistość, dokładność, precyzja
kinetyczna lub punktu końcowego
manualna lub zautomatyzowana, stosowana w paskach testowych przy zastosowaniu KI
BARWNIKI śÓŁCIOWE
BILIRUBINA W MOCZU
Substancja progowa (2 mg/dl)
Wartość prawidłowa w moczu : <0,02 mg/dl
W warunkach prawidłowych w moczu obecne są niewielkie ilości
bilirubiny związanej (wolna - patologia)
Zwiększone stężenie bilirubiny związanej:
-
Zwiększona produkcja w wątrobie
-
Niedrożność przewodów żółciowych (zapalenie, kamica, guz)
METODY WYKRYWANIA BILIRUBINY W MOCZU
1)
Ocena wzrokowa próbki moczu
Podwyższone stężenie bilirubiny w moczu nadaje mu barwę ciemnożółto-
brążową.Po wstrząśnięciu próbki, na powierzchni tworzy się żółta piana.
2)
Test paskowy i tabletkowy (Icotest)
H
+
Sól dwuazoniowa + bilirubina sprzeżona → azobilirubina (zmiana barwy)
Czułość: 0,5 mg/dl (test paskowy), 0,05-0,1 mg/dl (Icotest)
Wynik fałszywie dodatni: fenazopirydyna, chlorpromazyny
Wynik fałszywie ujemny: rozkład pod wpływem światła, zbyt długie przechowywanie
moczu,azotyny (inhibitory),kwas. askorbinowy
METODY CHEMICZNE (PRÓBÓWKOWE)
WYKRYWANIA BILIRUBINY W MOCZU
Próba Foucheta
FeCl
3
Bilirubina (BaCl
2
) zielona biliwerdyna
Największa czułość: 0,1 mg/dl
Próba Rosina
Jod (utl.)
Bilirubina zielona biliwerdyna na granicy płynów
Próba Gmelina
stęż. kwas azotowy (utl.)
Bilirubina
zielona biliwerdyna
(wykonywać przy braku obecności białka w moczu)
UROBILINGEN
Wartość prawidłowa: ≤ 1 mg/dl
Zaleca się oznaczanie w próbce 2-godzinnej zebranej pomiędzy godz. 14.00 a 16.00 (najwyższe
stężenie, związane z większym wydalaniem URB w moczu zasadowym; podwyższenie pH moczu po
posiłku)
WZROST STĘŻENIE URB W MOCZU
BRAK URB W MOCZU
Nasilony katabolizm Hb :
- anemia hemolityczna
- hemoliza wewnątrznaczyniowa
- nadkrwistość
Zwiększona produkcja URB:
- stany zapalne jelit
- stany zapalne dróg żółciowych
Zaburzenia funkcji hepatocytów:
- WZW (ostre i przewlekłe)
- marskość wątroby
- toksyczne uszkodzenie wątroby
- uszkodzenie wtórne ( ostra
choroba niedokrwienna serca,
zatrucie CO)
- rak wątroby
Przerwanie krążenia wrotno-wątrobowego:
(zamknięcie lub uszkodzenie żyły wrotnej)
- zaburzenia produkcji żółci
- niedrożność przewodu żółciowego
- brak flory bakteryjnej w przewodzie
pokarmowym
WYKRYWANIE URB W MOCZU
PRÓBA ERLICHA- test paskowy Multistix
Mocz świeży!!! (utlenianie URB)
H
+
URB + p-dimetyloaminobenzaldehyd
czerwony kompleks
Czułość: 0,2-1 mg/dl
Wyniki fałszywie dodatnie: Kw. p-aminobenzoesowy, sulfonamidy, porfobilinogen
Wyniki fałszywie ujemne: rozpad pod wpływem światła, rozpad pod wpływem formaliny
(środek konserwujący), azotyny, nie wykrywa niedoboru!!!
WYKRYWANIE URB W MOCZU
Metoda Watsona-Schwartza
(modyfikacja metody Erlicha)
H+
Mocz+ odcz. Erlicha + octan sodowy → czerwone zabarwienie
czerwone zabarwienie + chloroform → Górna warstwa wodna (porfobilinogen i inne)
Dolna warstwa chloroformowa (URB)
Ekstrakcja warstwy wodnej butanolem.
Czułość: 0,6 mg/dl dla porfobilinogenu
PORFIRYNY
Glicyna + bursztynylo-CoA
kwas delta-aminolewulinowy
uroporfirynogen
porfobilinogen
koproporfirynogen
protoporfirynogen
protoporfiryna
Hem
PORFIRYNY C.D.
PORFIRIE
to grupa chorób metabolicznych, w większości uwarunkowanych genetycznie,
spowodowanych obniżoną aktywnością poszczególnych enzymów biorących udział w
biosyntezie hemu. Bloki enzymatyczne na co najmniej 7 poziomach syntezy prowadzą do
gromadzenia się produktów pośrednich syntezy hemu.
PORFIRYNY
Czerwone zabarwienie moczu (brak obecności Ery, Hb)
Dodatnia próba na URB (próba Erlicha)
1) Metoda Hoescha (
porfobilinogen)
2 ml odcz. Erlicha + 2 krople moczu czerwone zabarwienie na
powierzchni a po wstrząśnięciu w
całej objętości
Wykrywalność: 20 mg/l
2)
Metoda Watsona-Schwartza
(modyfikacja metody Erlicha)
H+
Mocz+ odcz. Erlicha + octan sodowy → czerwone zabarwienie
czerwone zabarwienie + chloroform → Górna warstwa wodna (porfobilinogen i inne)
Dolna warstwa chloroformowa (URB)
Ekstrakcja warstwy wodnej butanolem.
Czułość: 0,6 mg/dl dla porfobilinogenu
CIAŁA KETONOWE W MOCZU
78% Kwas β-hydroksymasłowy (nie wykrywany testem paskowym, próbą
Legala)
20% Kwas acetylooctowy
2% Aceton (również dekarboksylacja kw. acetylooctowego in vitro)
< 2 mg/dl, <20 mg/dobę (niewykrywalne rutynowymi metodami)
Substancja wydalana z moczem w mechanizmie progowym (70 mg/dl)
Zwiększone wydalanie:
-
Cukrzyca
-
Mocznica
-
Głodówka
-
Dieta uboga w węglowodany a bogata w tłuszcze
-
Stany gorączkowe
-
Odwodnienie
-
Ś
piączka ketonowa
-
Znaczny wysiłek fizyczny
CIAŁA KETONOWE W MOCZU- TESTY
PASKOWE
OH-, nitropruzydek sodu
Acetylooctan
purpurowe zabarwienie (
Multistix, Ketostix
)
OH-, nitropruzydek sodu
Aceton purpurowe zabarwienie
(Chemstrip, Rapignost)
Acetylooctan
Glicyna
o
Wyniki jakościowe lub półilościowe
o
Czułość: dla acetylooctanu 5-10 mg/dl, dla acetonu: 50-70 mg/dl
Wyniki fałszywie pozytywne: Substancje zawierające grupy –SH; fenyloketony, wysoka g.wzgl., silne
zabarwienie moczu; lewodopa
Wyniki fałszywie negatywne: zbyt długie przechowywanie moczu
CIAŁA KETONOWE W MOCZU- Acetest
OH-, nitropruzydek sodu
Aceton purpurowe zabarwienie
Acetylooctan
Glicyna, laktoza
o
Wyniki jakościowe
o
Czułość: dla acetylooctanu 5-10 mg/dl, 20 mg/dl dla acetonu
Wyniki fałszywie pozytywne: Substancje zawierające grupy –SH; fenyloketony, wysoka g.wzgl., silne
zabarwienie moczu; lewodopa
Wyniki fałszywie negatywne: zbyt długie przechowywanie moczu (próbki schładzać i natychmiast badać)
Glicyna- umożliwia reakcję z acetonem
Laktoza- zwiększa intensywność zabarwienia produktu
CIAŁA KETONOWE W MOCZU- METODY
CHEMICZNE
Próba Legala
OH-, nitropruzydek sodu kw. Octowy
Aceton wiśniowe zabarwienie intensywności
Acetylooctan
•
niespecyficzność: kreatynina (zanika po zakwaszeniu)
•
15-20-krotnie większa czułość dla acetylooctanu niż dla acetonu
Próba Langego
(obecnie rzadko stosowana)
nawarstwienie
amoniaku
Aceton + nitropruzydek + H
+
fioletowy pierścień na granicy płynów
Acetylooctan
KRWIOMOCZ-hematuria
Obecność ≥3 RBC/ HPF
w dwóch na trzy przebadane próbki moczu.
(American Urological Association)
HPF
-
w polu widzenia mikroskopu pod powiększeniem x 400)
RBC- erytrocyty
KRWIOMOCZ-hematuria
Ostre lub przewlekłe kłębuszkowe zapalenie
nerek,
Toczeń trzewny,
Zespół Goodpasteure`a
Nefropatia IgA,
Zapalenie kłębkowe przy zapaleniu naczyń
Zmiany cukrzycowe
Choroby śródmiąższowe nerek
Choroby naczyń nerkowych (zawał nerki,
zakrzepica)
Kamica
Gruźlica nerki
Choroby metaboliczne
Infekcje dróg moczowych
Kamica
Nowotwory w obrębie pęcherza
KRWIOMOCZ, HEMOGLOBINURIA,
MIOGLOBINURIA
Krwiomocz
Hemoglobinuria
Mioglobinuria
Choroby nerek i dróg
moczowych
Silna gorączka
Urazy
Wysiłek fizyczny
Nowotwory
Leki przeciwkrzepliwe
Hemoliza
wewnątrznaczyniowa
Oparzenia o dużej
powierzchni
Zakażenie krętkiem bladym
Wysiłek fizyczny
Uszkodzenie mięśni:
-Zespół zmiażdżenia,
-Ostre niedokrwienie
-Oparzenia
Drgawki
Alkoholizm i narkomania
Zapalenie wielomięśniowe
Toksyczne uszkodzenie
Wysiłek fizyczny
Zasada
testów paskowych
wykorzystuje właściwości
pseudoperoksydazowe cząsteczki HEMU. Test wykrywa erytrocyty, Hb
i Mb!!!
Testy chemiczne próbowkowe również wykrywają Ery, Hb i Mb
KONIECZNE RÓśNICOWANIE poprzez badanie mikroskopowe
moczu, ocenę barwy osocza, chemiczne badanie osocza
KREW W MOCZU- PRÓBA CHEMICZNA
PRÓBA PIRAMIDONOWA
(właściwości pseudoperoksydazowe HEMU)
HEM, H
+
H
2
O
2
+ piramidon fioletowy pochodna
Do 4 ml przegotowanego i ostudzonego moczu dodać kilka kropli lodowatego
kwasu
octowego i 4 ml nadtlenku wodoru. Wymieszać.
Nawarstwić alkoholowym roztworem piramidonu.
* Gotowanie usuwa wpływ peroksydazy leukocytarnej.
KREW W MOCZU
o
Ś
wieże i nieuszkodzone krwinki czerwone nie ulegają rozpuszczeniu w moczu.
o
Metodą różnicowania obecności krwinek świeżych vs hemoglobiny w moczu jest jego
WIROWANIE.
Po odwirowaniu, świeże krwinki opadają na dno próbówki
Hb ulega rozpuszczeniu w moczu i można ją wykryć zarówno w moczu wirowanym
jak i nieodwirowanym.
Testy paskowe wykrywają ERY, Hb i mioglobinę.
Obecność krwinek czerwonych w osadzie i jednocześnie ujemny wynik testu
paskowego „na krew” sugerują interferencję np. kwasu askorbinowego.
Brak krwinek czerwonych w osadzie i dodatni wynik testu paskowego „na krew” może
ś
wiadczyć o obecności Hb i/lub mioglobiny oraz rozpadzie krwinek czerwonych lub
interferencji np. peroksydaz bakteryjnych, silnych utleniaczy itp..
Różnicowanie hemoglobinurii i mioglobinurii
TEST
HEMOGLOBINURIA
MIOGLOBINURIA
Ocena wzrokowa barwy moczu
Test paskowy ‘na krew’
Ocena wzrokowa wyglądu
osocza
Ocena aktywności CK w moczu
Testy chemiczne w osoczu:
Ocena stężenia mioglobiny
(testy immunochemiczne)
Ocena stężenia haptoglobiny
(testy immunochemiczne,
elektroforetyczne)
Od różowego do brązowego
+
Różowe (hemoliza)
< 10x górna granica
przedziału referencyjnego
N
↓
Brązowa
+
Wygląd prawidłowy
>40x górna granica
przedziału
referencyjnego
↑
N