Interpretacja i
Interpretacja i
opracowywanie wyników
opracowywanie wyników
na potrzeby lekarzy
na potrzeby lekarzy
na potrzeby lekarzy
na potrzeby lekarzy
dr n. wet. T. Dzieciątkowski
dr n. wet. T. Dzieciątkowski
Zalecany tok postępowania
Zalecany tok postępowania
diagnostycznego
diagnostycznego
Skrinig pacjentów
Skrinig pacjentów
metodą PCR (jeśli
metodą PCR (jeśli
dostępna)
dostępna)
wynik dodatni (+)
wynik dodatni (+)
wynik ujemny (
wynik ujemny (--))
powtórzenie badania
powtórzenie badania
po upływie 7
po upływie 7--14 dni
14 dni
badanie statusu
badanie statusu
immunologicznego
immunologicznego
pacjenta testami
pacjenta testami
ELISA
ELISA
monitorowanie
monitorowanie
poziomu wiremii za
poziomu wiremii za
pomocą real
pomocą real--time
time
PCR
PCR
powtórzenie badania
powtórzenie badania
po upływie 14
po upływie 14--21 dni
21 dni
powtórzenie badania
powtórzenie badania
po upływie 3
po upływie 3--5 dni
5 dni
Jakościowy real
Jakościowy real--time PCR
time PCR
możliwość stosowania jako czułego testu
możliwość stosowania jako czułego testu
przeglądowego do badań dużych populacji
przeglądowego do badań dużych populacji
pacjentów
pacjentów
używany w badaniach, gdzie metody
używany w badaniach, gdzie metody
ilościowe są zbędne
ilościowe są zbędne
(wynik: jest
(wynik: jest--nie ma)
nie ma)
ilościowe są zbędne
ilościowe są zbędne
(wynik: jest
(wynik: jest--nie ma)
nie ma)
wskazany do badania występowania mutacji
wskazany do badania występowania mutacji
w obrębie genomu
w obrębie genomu
wykorzystywany do diagnostyki wymazów
wykorzystywany do diagnostyki wymazów
bezpośrednich i/lub bioptatów
bezpośrednich i/lub bioptatów
używany do wykrywania i monitorowania
używany do wykrywania i monitorowania
wiremii
wiremii
stosowany do badania potencjalnej
stosowany do badania potencjalnej
Ilościowy real
Ilościowy real--time PCR
time PCR
stosowany do badania potencjalnej
stosowany do badania potencjalnej
skuteczności terapii przeciwwirusowej
skuteczności terapii przeciwwirusowej
zastosowanie tylko w materiałach, które
zastosowanie tylko w materiałach, które
umożliwiają oznaczenia bezwzględne (krew,
umożliwiają oznaczenia bezwzględne (krew,
surowica, PMR)
surowica, PMR)
Badania jakościowe
Badania jakościowe
Wydajemy wynik:
Wydajemy wynik:
„jest
„jest –
– nie ma”
nie ma”
Interpretacja zależy od lekarza
Interpretacja zależy od lekarza
Podobnie do klinicysty należy wybór
Podobnie do klinicysty należy wybór
Podobnie do klinicysty należy wybór
Podobnie do klinicysty należy wybór
postępowania terapeutycznego
postępowania terapeutycznego
Zakażenia wirusowe u osób z
Zakażenia wirusowe u osób z
immunosupresją
immunosupresją
Badanie jakościowe wirusa opryszczki w przypadku zapalenia nerwu
Badanie jakościowe wirusa opryszczki w przypadku zapalenia nerwu
trójdzielnego
trójdzielnego
herpeswirusy: HSV
herpeswirusy: HSV--1/2, VZV, CMV, EBV, HHV
1/2, VZV, CMV, EBV, HHV--6,
6,
HHV
HHV--8
8
adenowirusy: 4, 7, 11, 40, 41
adenowirusy: 4, 7, 11, 40, 41
poliomawirusy: BK, JC
poliomawirusy: BK, JC
Zakażenia wirusowe u osób z
Zakażenia wirusowe u osób z
immunosupresją
immunosupresją
poliomawirusy: BK, JC
poliomawirusy: BK, JC
parwowirusy: parwowirus B19
parwowirusy: parwowirus B19
reowirusy: rotawirus
reowirusy: rotawirus
orto
orto-- i paramyksowirusy: grypa, paragrypy, RSV
i paramyksowirusy: grypa, paragrypy, RSV
enterowirusy
enterowirusy
w chwili obecnej brak jest jednoznacznych
w chwili obecnej brak jest jednoznacznych
wytycznych dotyczących monitorowania zakażeń
wytycznych dotyczących monitorowania zakażeń
wirusowych u pacjentów z niedoborami
wirusowych u pacjentów z niedoborami
odporności
odporności
Zakażenia wirusowe u osób z
Zakażenia wirusowe u osób z
immunosupresją
immunosupresją
odporności
odporności
zasady monitorowania obejmują
zasady monitorowania obejmują
wyłącznie
wyłącznie
badania CMV u osób po przeszczepach komórek
badania CMV u osób po przeszczepach komórek
krwiotwórczych
krwiotwórczych
pozostała diagnostyka wirusologiczna wdrażana
pozostała diagnostyka wirusologiczna wdrażana
jest sporadycznie, wraz z zaistniałymi objawami
jest sporadycznie, wraz z zaistniałymi objawami
klinicznymi, lub do celów naukowych
klinicznymi, lub do celów naukowych
Badania ilościowe:
Badania ilościowe:
HSV
HSV--1/2 oraz VZV w surowicy i PMR
1/2 oraz VZV w surowicy i PMR
CMV w surowicy i PMR
CMV w surowicy i PMR
Zakażenia wirusowe u osób z
Zakażenia wirusowe u osób z
immunosupresją
immunosupresją
CMV w surowicy i PMR
CMV w surowicy i PMR
EBV w surowicy i PMR
EBV w surowicy i PMR
HHV
HHV--6 w surowicy i PMR
6 w surowicy i PMR
adenowirusy w surowicy, BAL i PMR
adenowirusy w surowicy, BAL i PMR
poliomawirus BK
poliomawirus BK
parwowirus B19
parwowirus B19
Zakażenia wirusowe u osób z
Zakażenia wirusowe u osób z
immunosupresją
immunosupresją
Badanie ilościowe EBV w przypadku limfohistiocytozy hemofagocytarnej
Badanie ilościowe EBV w przypadku limfohistiocytozy hemofagocytarnej
Zakażenia wirusowe u osób z
Zakażenia wirusowe u osób z
immunosupresją
immunosupresją
Porównanie metod ilościowego monitorowania poziomu wiremii CMV
Porównanie metod ilościowego monitorowania poziomu wiremii CMV
Punkty uchwytu leków
Punkty uchwytu leków
przeciwwirusowych
przeciwwirusowych
1. Na poziomie transkrypcji:
1. Na poziomie transkrypcji:
analogi nukleozydów
analogi nukleozydów
-- Acyklowir, Gancyklowir,
Acyklowir, Gancyklowir,
Rybawiryna, Widarabina
Rybawiryna, Widarabina
nukleozydowe inhibitory odwrotnej transkryptazy
nukleozydowe inhibitory odwrotnej transkryptazy
(NRTI)
(NRTI) --
Lamiwudyna, Zydowudyna
Lamiwudyna, Zydowudyna
nienukleozydowe inhibitory odwrotnej transkryptazy
nienukleozydowe inhibitory odwrotnej transkryptazy
nienukleozydowe inhibitory odwrotnej transkryptazy
nienukleozydowe inhibitory odwrotnej transkryptazy
(NNRTI)
(NNRTI) –
–
Delawirdyna, Newirapina
Delawirdyna, Newirapina
inne
inne
–
– Foskarnet, Fomivirsen
Foskarnet, Fomivirsen
2. Na poziomie dojrzewania białek wirusowych :
2. Na poziomie dojrzewania białek wirusowych :
inhibitory proteaz wirusowych
inhibitory proteaz wirusowych –
–
Amprenawir,
Amprenawir,
Indinawir, Saquanawir
Indinawir, Saquanawir
3. Na poziomie penetracji i uwalniania wirusa:
3. Na poziomie penetracji i uwalniania wirusa:
Amantadyna, Rymantadyna, Oseltamwir
Amantadyna, Rymantadyna, Oseltamwir
W
W komórce
komórce ulegają
ulegają fosforylacji
fosforylacji do
do aktywnych
aktywnych
metabolitów,
metabolitów, które
które są
są analogami
analogami naturalnych
naturalnych
nukleozydów
nukleozydów (wyjątek
(wyjątek stanowią
stanowią NNRTI)
NNRTI)..
Związki działające na poziomie
Związki działające na poziomie
wirusowej transkrypcji
wirusowej transkrypcji
Wbudowanie
Wbudowanie
„fałszywych”
„fałszywych”
nukleozydów
nukleozydów
powoduje
powoduje przedwczesne
przedwczesne zakończenie
zakończenie replikacji
replikacji
wirusa
wirusa poprzez
poprzez blokowanie
blokowanie DNA
DNA--polimerazy
polimerazy lub
lub
niespecyficzną
niespecyficzną terminację
terminację łańcucha
łańcucha DNA
DNA..
Rozszczepienie
Rozszczepienie
wirusowch
wirusowch
poliprotein
poliprotein
ma
ma
podstawowe
podstawowe
znaczenie
znaczenie
w
w
dojrzewaniu
dojrzewaniu
wirusa
wirusa..
Inhibitory
Inhibitory proteaz
proteaz wiążąc
wiążąc się
się kompetycyjnie
kompetycyjnie z
z
centrum
centrum
aktywnym
aktywnym
enzymu,
enzymu,
hamują
hamują
proces
proces
rozszczepiania
rozszczepiania..
Prowadzi
Prowadzi
to
to
do
do
powstanie
powstanie
niedojrzałych
niedojrzałych ii niezakaźnych
niezakaźnych cząstek
cząstek wirusa
wirusa..
Inhibitory wirusowych proteaz
Inhibitory wirusowych proteaz
(PI)
(PI)
niedojrzałych
niedojrzałych ii niezakaźnych
niezakaźnych cząstek
cząstek wirusa
wirusa..
Związki
Związki te
te wykazują
wykazują niezwykle
niezwykle silne
silne działanie,
działanie,
zarówno
zarówno w
w fazie
fazie ostrej,
ostrej, jak
jak ii przewlekłej
przewlekłej zakażenia
zakażenia..
Nie
Nie powodują
powodują całkowitej
całkowitej eliminacji
eliminacji wirusa,
wirusa, lecz
lecz
obniżenie
obniżenie jego
jego miana
miana do
do poziomu
poziomu niewykrywalnego
niewykrywalnego..
Szybko
Szybko narastająca
narastająca oporność
oporność na
na lek
lek zmusza
zmusza do
do
stosowania
stosowania
ich
ich
w
w
terapii
terapii
zespolonej
zespolonej
(HAART)
(HAART)
wespół
wespół
z
z
nukleozydowym
nukleozydowym
ii nienukleozydowym
nienukleozydowym
inhibitorem
inhibitorem odwrotnej
odwrotnej transkryptazy
transkryptazy..
Zarówno
Zarówno proces
proces wnikania,
wnikania, jak
jak ii uwalniania
uwalniania się
się
z
z komórek
komórek jest
jest niezwykle
niezwykle istotny
istotny dla
dla przebiegu
przebiegu
zakażenia
zakażenia każdym
każdym wirusem
wirusem..
Związki działające na poziomie
Związki działające na poziomie
penetracji i uwalniania wirusów
penetracji i uwalniania wirusów
zakażenia
zakażenia każdym
każdym wirusem
wirusem..
Chemioterapeutyki
Chemioterapeutyki z
z tej
tej grupy
grupy upośledzają
upośledzają
wnikanie
wnikanie wirusów,
wirusów, ich
ich pakowania
pakowania do
do kapsydów
kapsydów
oraz
oraz
uwalnianie
uwalnianie
wirusów
wirusów
potomnych
potomnych..
Ich
Ich
działanie
działanie ogranicza
ogranicza się
się jednak
jednak głównie
głównie do
do orto
orto-- ii
paramyksowirusów
paramyksowirusów..
Rekomendowane połączenia leków
Rekomendowane połączenia leków
antyretrowirusowych
antyretrowirusowych
A
A
B
B
Inhibitory proteazy
Inhibitory proteazy
NRTI
NRTI
Terapia anty
Terapia anty--HIV
HIV
Inhibitory proteazy
Inhibitory proteazy
NRTI
NRTI
Nelfinavir
Nelfinavir
Ritonavir
Ritonavir
Saquanavir
Saquanavir
AZT + ddI
AZT + ddI
d4T + ddI
d4T + ddI
AZT + 3TC
AZT + 3TC
NNRTI
NNRTI
Nevirapine
Nevirapine
rozpoczęcie HAART: CD4 200
rozpoczęcie HAART: CD4 200 –
– 350/
350/
µµµµµµµµ
ll
RNA: <50 kopii/mL
RNA: <50 kopii/mL
„one pill, once daily”
„one pill, once daily”
tenofovir/emtricitabine/efavirenz
tenofovir/emtricitabine/efavirenz
Terapia anty
Terapia anty--HIV
HIV
tenofovir/emtricitabine/efavirenz
tenofovir/emtricitabine/efavirenz
nowe inhibitory proteaz:
nowe inhibitory proteaz:
tipranavir, darunavir
tipranavir, darunavir
miejscowe stosowanie leków
miejscowe stosowanie leków
profilaktyka pre
profilaktyka pre--ekspozycyjna (
ekspozycyjna (
tenofovir
tenofovir
))
HIV
HIV
HBV
HBV
HCV
HCV
W Polsce powyższe badania technikami biologii
W Polsce powyższe badania technikami biologii
Badania wirusów przenoszonych
Badania wirusów przenoszonych
poprzez krew
poprzez krew
W Polsce powyższe badania technikami biologii
W Polsce powyższe badania technikami biologii
molekularnej są obligatoryjne przy
molekularnej są obligatoryjne przy
wszystkich
wszystkich
donacjach
donacjach
CMV
CMV
parwowirus B19
parwowirus B19
wirus Zachodniego Nilu
wirus Zachodniego Nilu
influenza
influenza
HTLV 1/2
HTLV 1/2
HHV
HHV--8
8