Ćwiczenie 4

Izolowanie likopenu z pomidorów

Próbkę pasty z pomidorów (5 g) umieszcza się w niewielkiej kolbce okrągłodennej 50 ml

owiniętej folią Al. W celu uchronienia karotenoidów przed reakcjami fotochemicznego

utleniania. Do kolby dodaje się 10 ml 95% etanolu i ogrzewa do wrzenia pod chłodnicą

zwrotną przez 5 minut. Gorącą mieszaninę sączy się przez lejek ze spiekiem, a żółty filtrat

przelewa się do kolby erlenmajerki 100 ml, również owiniętej w folię Al. Pozostały na sączku

osad przenosi się z powrotem do kolbki, dodaje się 10 ml dichlorometanu i ogrzewa do

wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 3-4 minuty. Ponownie sączy się na gorąco na lejku ze

spiekiem. Przesącz dodaje się do kolby zawierającej przesącz etanolowy. Ekstrakcję

dichlorometanem powtarza się jeszcze trzykrotnie i wszystkie ekstrakty zbiera się w tej samej

erlanmajerce. Połączone ekstrakty (50 ml) przenosi się do rozdzielacza, przemywa

nasyconym roztworem NaCl. Warstwę dolną zlewa się do suchej erlenmajerki przez sączek ze

spiekiem wysypany środkiem suszącym. Otrzymany klarowny roztwór analizuje się na płytce

chromatograficznej pokrytej żelem krzemionkowym, stosując cykloheksan:octan etylu (9:1)

jako eluent. Plamki odpowiadające położeniu analizowanych substancji widoczne są bez

wywoływania (można je też wywołać parami jodu). Uwaga – całe używane szkło musi być

suche.

Paweł Kafarski, Piotr Wieczorek, Ćwiczenia laboratoryjne z chemii bionieorganicznej, 1997, str. 69