Właściwości przeciwciał
Naturalne
Odpornościowe
IgM
IgG
• Ciężar 900,000
150,000
• Stęż. w surowicy 80-200mg/dl
1-1,5
• Nie przechodza przez łożysko przechodzą przez łożysko
• Wiązanie komplementu – tak
czasami
• Optym. temp. reakcji z Ag 4-18
o
C 37
o
C
• Czas reakcji z Ag minuty około 30 min.
• Środowisko reakcji z Ag
150mMNaCl
środowisko niskojonowe
• Traca aktywność w temp. 70
o
C ciepłostabilne w temp.
70
o
C
• ABO, Lewis, MNS wszystkie układy grupowe
krwinek czerwonych
ALLOPRZECIWCIAŁA
NATURALNE
ODPORNOŚCIOWE
REGULARNE
NIEREGULARNE
KOMPLETNE
NIEKOMPLETNE
ZIMNE
CIEPŁE
anty- A, anty- B
(bardzo rzadko,
naturalne,
odpornościowe)
anty- M,
anty-P
1
; anty-
N; anty- Le;
anty- Lu
a
;
anty- I; anty-
H;
anty- D; anty- C; anty- E; anty- C
W
;
anty- e; anty- c; anty- K; anty- k;
anty- Jk; anty- Fy
a
; anty- S; anty-
Lu
b
;
IgM; 4- 18°C;
IgG, IgM, IgA; 37°C;
Testy antyglobulinowe
Pośredni test antyglobulinowy
(PTA)
najczęściej stosowany test do
wykrywania wolno krążących w surowicy
przeciwciał odpornościowych
• Pozwala na wykrycie przeciwciał
odpornościowych oraz składników komplementu
związanych z krwinkami czerwonymi w
następstwie reakcji z nimi przeciwciał klasy IgG i
IgM – wykonuje się go przy próbie krzyżowej
• Najczęściej stosuje się poliwalentne surowice
antyglobulinowe, które zawierają przeciwciała
dla IgGi IgM oraz składników dopełniacza
Zasada wykonania PTA:
1 etap „in vitro” uczulania (inkubacji w temp. 37
o
C)
krwinek zawierających określone antygeny z surowicą,
w której badamy obecność przeciwciał przeciwko
antygenom krwinek
2 etap – usunięcie przeciwciał, które nie związały się z
antygenami krwinek, poprzez kilkakrotne odpłukanie
krwinek fizjologicznym roztworem NaCl
3 etap – aglutynacja krwinek uczulonych (opłaszczonych)
przeciwciałami przez surowice antyglobulinową
POŚREDNI TEST ANTYGLOBULINOWY (PTA)
• wykrywanie reakcji antygen- przeciwciało in vitro;
• niskie miana p/ciał nieregularnych w surowicy pacjenta;
• monitorowanie konfliktu serologicznego i zagrożenia
chhn;
• identyfikacja p/ciał;
• fenotypowanie krwinek czerwonych.
• ZASTOSOWANIE KLINICZNE:
• Badanie przesiewowe w kierunku wykrycia p/ciał
nieregularnych;
• Próba krzyżowa;
• Monitorowanie zagrożenia chhn.
Bezpośredni test antyglobulinowy (BTA)
wykrywa przeciwciała, które związały się z krwinką
„in vivo”, jako efekt obecności autoprzeciwciał
(sprawdza, czy krwinki czerwone są uczulone
przeciwciałami)
np.:
- w niedokrwistości autoimmunohemolitycznej
- przeciwciał matczynych przeciwko antygenom dziecka w chorobie
hemolityznej noworodków
- przeciwciał powodujących odczyny poprzetoczeniowe
Wykonanie tego testu omija 1 etap postępowania dla PTA
Metody laboratoryjne
• Krwinki czerwone pacjenta płukane w 0,9% NaCl +
surowica antyglobulinowa (odczynnik Coombs’a)
BTA+ BTA-
Organizacja leczenia krwią w zakładzie opieki
zdrowotnej powinna zapewniać:
- niezwłoczne, całodobowe zaopatrzenie jego
jednostek organizacyjnych w krew i jej składniki;
- badania z zakresu serologii transfuzjologicznej
warunkujące bezpieczne przetaczanie krwi;
- identyfikację, rejestrowanie i sporządzanie
raportów
o wszelkich nieprzewidzianych zdarzeniach,
a w szczególności o błędach i wypadkach,
związanych
z przetoczeniem.
Organizacja leczenia krwią
Odpowiedzialność lekarza
Lekarz jest odpowiedzialny za:
- ustalenie wskazań do przetoczenia;
- identyfikację biorcy i kontrolę dokumentacji przed
przetoczeniem;
- zabieg przetoczenia;
- prawidłowe udokumentowanie zabiegu
przetoczenia;
- sporządzanie raportów o zdarzeniach jw.
Wskazania:
O przetoczeniu decyduje lekarz prowadzący
leczenie pacjenta po uprzednim poinformowaniu
tego pacjenta
o konieczności przetoczenia oraz po uzyskaniu
jego ustnej zgody na przetoczenie.
Brak zgody wymaga pisemnego oświadczenia
pacjenta.
Wskazania:
Zapisy
- Informacje o zabiegu przetoczenia i powikłaniach
odnotowuje się w formularzu historii choroby, książce
transfuzyjnej, karcie informacyjnej pacjenta oraz
w księdze raportów pielęgniarskich.
- Dokumentację dotyczącą leczenia krwią i jej składnikami
umożliwiającą prześledzenie losów przetoczenia i
związanych z tym badań przechowuje się co najmniej
przez 30 lat od dnia jej sporządzenia.
- Poprawki w dokumentacji należy dokonywać
w sposób czytelny, tak aby możliwe było jednoznaczne
odróżnienie danych zmienionych od wpisanych po raz
pierwszy, oraz opatrywać je podpisem osoby wraz z datą
dokonania poprawki.
Przed przetoczeniem
Przed przetoczeniem należy sprawdzić, czy w
dokumentacji medycznej pacjenta znajduje się wynik
badania grupy krwi.
Za niewiarygodną uznaje się informację o grupie krwi
zawartą
w karcie informacyjnej z pobytu w innym szpitalu.
Za wiarygodny można uznać wyłącznie wynik wpisany w
dowodzie osobistym, karcie identyfikacyjnej grupy krwi,
legitymacji honorowego dawcy krwi lub wynik z pracowni
serologii transfuzjologicznej.
Wynik badania grupy krwi umieszcza się w formularzu
historii choroby w obecności dwóch osób, które składają
własnoręczne podpisy po sprawdzeniu zgodności wyniku z
wpisem.
1.
Przed przetoczeniem
Przed przetoczeniem
Przed wykonaniem przetoczenia należy pobrać
próbkę krwi od pacjenta i jednocześnie wypełnić
skierowanie na badanie grupy krwi, jeżeli badanie
grupy krwi nie zostało przeprowadzone lub jeżeli
istnieją wątpliwości co do wiarygodności wyniku.
Przed przetoczeniem
Przed przetoczeniem
Układ AB0
S
u
ro
w
ic
a
Erytrocyty pacjenta
PT 1
PT 2
PT 3
PT 4
Anty A
+
-
+
-
Antty B
---
+
+
+
+
+
+
---
Anty AB
+
+
+
-
A
B
AB
O
U pacjentów i u kobiet w ciąży, u których określa
się grupy krwi, wykonuje się przeglądowe badanie
w kierunku przeciwciał odpornościowych w
pośrednim teście antyglobulinowym i w teście
enzymatycznym.
Po uzyskaniu dodatniego wyniku w badaniu
przeglądowym dokonuje się identyfikacji
przeciwciał.
Jeżeli biorcy przetaczano krew w okresie 3
miesięcy przed wykonaniem badania przeciwciał
odpornościowych, to ujemny wynik tego badania
jest ważny przez 48 godzin od pobrania próbki
krwi.
Przeciwciała odpornościowe
Przeciwciała odpornościowe
W przypadku planowanego przetaczania
koncentratu krwinek czerwonych (KKCz) lub krwi
pełnej konserwowanej (KPK) do banku krwi
przekazuje się skierowanie na wykonanie próby
zgodności wraz z
odrębnie
w tym celu pobraną
próbką krwi od pacjenta.
Pracownik banku krwi przekazuje fragmenty
drenów wraz z tym skierowaniem i próbką krwi
do pracowni serologii transfuzjologicznej.
Przed przetoczeniem
Pobiera się co najmniej 8 ml krwi żylnej
(niemowlęta
i małe dzieci od 2 do 5 ml), do suchej probówki
jednorazowego użytku. Bezpośrednio po pobraniu
krwi,
w obecności pacjenta wpisuje się, na podstawie
danych uzyskanych od pacjenta, a jeżeli jest to
niemożliwe, danych z karty gorączkowej,
formularza historii choroby lub identyfikatora,
jeżeli jest stosowany, na etykiecie probówek:
nazwisko (drukowanymi literami) i imię; datę
urodzenia pacjenta lub numer PESEL, jeżeli
posiada; datę i godzinę pobrania krwi.
Przed przetoczeniem
W przypadku braku możliwości uzyskania danych
pacjenta na etykiecie i na skierowaniu do badania należy
wpisać symbol NN oraz numer księgi głównej i numer
księgi oddziałowej.
Po pobraniu krwi osoba pobierająca sprawdza, czy dane
pacjenta są zgodne z danymi na etykiecie probówki i
składa na skierowaniu czytelny podpis.
Pobrana próbka krwi jest niezwłocznie dostarczana do
pracowni serologii transfuzjologicznej wraz ze
skierowaniem na badanie.
Dopuszcza się pobieranie krwi na wersenian (EDTA) od:
noworodków; niemowląt; małych dzieci; pacjentów
z niedokrwistością autoimmunohemolityczną.
Przed przetoczeniem
Przed przetoczeniem
U biorców systematycznie leczonych krwią oraz u
osób, którym przetaczano krew w okresie
ostatnich 3 miesięcy, bezwzględnie przestrzega
się czasu ważności próby zgodności, który -
liczony od momentu pobrania próbki krwi od
pacjenta - wynosi 48 godzin.
Jeżeli krew nie została w tym czasie przetoczona,
należy powtórzyć próbę zgodności ze świeżo
pobraną próbką krwi pacjenta.
Przed przetoczeniem
Przed przetoczeniem
Do przetoczenia wybiera się krew zgodną w
układzie ABO i antygenie D układu Rh z biorcą.
Pacjentom z niedokrwistością
autoimmunohemolityczną typu ciepłego dobiera
się krew zgodną fenotypowo w układzie Rh i
antygenie K z układu Kell.
Dziewczętom i kobietom do okresu menopauzy
wskazane jest dobieranie krwi K ujemnej (K-) w
ramach profilaktyki konfliktu serologicznego. Jeżeli
wykonano badania antygenu K i stwierdzono jego
obecność na krwinkach, można przetaczać krew K
dodatnią (K+).
Przed przetoczeniem
Biorcom, u których wykryto przeciwciała
odpornościowe w aktualnym badaniu lub w
przeszłości, dobiera się krew niezawierającą
odpowiadającego im antygenu
oraz zgodną fenotypowo w układzie Rh i
antygenie K
z układu Kell.
Przed przetoczeniem
Dopuszcza się przetaczanie KKCz grupy 0
pacjentom innej grupy krwi w następujących
okolicznościach:
1) stany zagrażające życiu, gdy brak krwi
jednoimiennej;
2) brak zgodnej krwi jednoimiennej dla biorcy z
obecnymi alloprzeciwciałami odpornościowymi;
3) bardzo słaba ekspresja antygenu A lub B albo
trudności w oznaczeniu grupy ABO;
4) brak krwi Rh ujemnej i jednocześnie
jednoimiennej w układzie ABO.
Dopuszcza się przetaczanie KKCz grupy A lub B
biorcom grupy AB, gdy brak jest krwi
jednoimiennej.
Przed przetoczeniem
W przypadkach bezpośredniego zagrożenia życia
lekarz może podjąć decyzję o przetoczeniu
zgodnych grupowo KKCz lub KPK przed
wykonaniem próby zgodności, po sprawdzeniu
AB0 Rh.
Na skierowaniu na krew do pilnej transfuzji do
pracowni serologii transfuzjologicznej należy
umieścić adnotację: "Wydać przed wykonaniem
próby zgodności" wraz
z pieczątką i podpisem lekarza.
Przed przetoczeniem
Przed przetoczeniem
Po wydaniu krwi przystępuje się niezwłocznie do
wykonania próby zgodności. Jeżeli wynik wskazuje
na niezgodność, konieczne jest natychmiastowe
powiadomienie o tym lekarza prowadzącego
leczenie,
w celu przerwania przetoczenia.
Przed przetoczeniem
W wyjątkowo nagłych przypadkach, gdy lekarz
prowadzący leczenie zdecyduje o przetoczeniu
przed wykonaniem badania grup krwi u biorcy i
próby zgodności, należy wydać KKCz grupy O, a
dziewczynkom i kobietom w okresie rozrodczym
KKCz grupy O Rh ujemnej.
W takich przypadkach należy natychmiast
przystąpić do określenia u biorcy grupy krwi AB0 i
Rh, wykonania przeglądowego badania
przeciwciał odpornościowych
i próby zgodności. Do dalszych przetoczeń należy
kwalifikować krew jednoimienną z biorcą w
układzie AB0 i antygenie D z układu Rh.
Przed przetoczeniem
Kontrola zgodności biorcy z każdą jednostką krwi
lub jej składnika przeznaczoną do przetoczenia
przeprowadzana jest w obecności pacjenta i
polega na:
identyfikacji pacjenta
polegającej na
porównaniu jego imienia i nazwiska, daty
urodzenia lub numeru PESEL
i grupy krwi z danymi określonymi na formularzu
zawierającym wynik próby zgodności;
porównaniu wyników grupy krwi
na
formularzu z grupą krwi na etykiecie pojemnika;
porównaniu numeru
krwi lub jej składnika z
numerem na formularzu;
sprawdzeniu daty ważności
składnika.
Przechowywanie preparatów
krwi
• Krew pełna/RBC – 2-6 ºC do 35 dni
użyć w ciągu 5 h od wyjęcia z
lodówki
• Płytki -20-24 ºC na agitatorze 5 dni
• FFP 6 miesięcy – użyć w ciągu 4 h
od rozmrożenia
• Krioprecypitat – 30 ºC użyć w ciągu
4 h od rozmrożenia
Przed przetoczeniem
Lekarz lub uprawniona do tego pielęgniarka
(położna), którzy dokonali oceny zgodności krwi
lub jej składnika
z biorcą, składają swój podpis na formularzu.
W razie rozbieżności wykrytych podczas kontroli
zgodności krwi lub jej składnika z danymi biorcy
nie przetacza się tej jednostki krwi lub składnika.
Należy ją zwrócić bankowi krwi wraz z informacją o
przyczynie zwrotu oraz z protokółem i
formularzem.
Krew ta nie może być ponownie dopuszczona do
użytku.
Transfuzja
Godzinę rozpoczęcia przetoczenia zawartości
każdego pojemnika należy wpisać w książce
transfuzyjnej,
na formularzu, w protokole znieczulenia
ogólnego,
a na oddziale intensywnej opieki medycznej w
karcie obserwacji.
Transfuzja
Przetoczenie krwi lub jej składnika, z wyjątkiem
KKP
i osocza, pobranych z banku krwi lub centrum
należy rozpocząć nie później niż w ciągu 30 minut
od ich dostarczenia.
Z banku krwi należy sukcesywnie pobierać
pojedyncze jednostki krwi.
W wyjątkowych przypadkach, jeżeli przewiduje się dłuższy
czas do rozpoczęcia transfuzji, krew należy przechowywać w
zwalidowanej przeznaczonej wyłącznie do tego celu
lodówce,
w
temperaturze
od 2 °C do 6 °C. Temperaturę w lodówce należy sprawdzać
i zapisywać co 8 godzin.
Transfuzja
Przetoczenie KKP i rozmrożonego osocza należy
rozpocząć niezwłocznie po ich otrzymaniu.
Planowane przetoczenia powinny odbywać się w
okresie pełnej obsady lekarzy i pielęgniarek
(położnych) oddziału szpitala.
Transfuzja
Składniki krwi przetacza się za pomocą
jednorazowych sterylnych zestawów.
Nie można przetaczać KKP i płynów infuzyjnych
przez zestaw uprzednio użyty do przetaczania
krwi pełnej lub KKCz.
Do przetoczeń niemowlętom służą specjalne
zestawy.
Jeżeli składnik krwi jest podawany strzykawką,
należy zastosować specjalny filtr. Używane
pompy muszą mieć atest i wskazówki
producenta, jak należy je stosować.
Transfuzja
Ogrzewanie krwi można przeprowadzać wyłącznie
w specjalistycznym urządzeniu zaopatrzonym w
termometr i system alarmowy.
Zaleca się ogrzewanie krwi w przypadku
dorosłych - jeżeli szybkość przetoczenia
przekracza 50 ml/min;
dzieci - jeżeli szybkość przetoczenia przekracza
15 ml/min; noworodków - w przypadku
przetoczenia wymiennego; biorcy z klinicznie
znaczącymi przeciwciałami typu zimnego.
Nie można dodawać produktów leczniczych do
przetaczanej krwi.
Transfuzja
Nie można przetaczać jednej jednostki krwi pełnej
lub KKCz dłużej niż 4 godziny, a jednej jednostki
KKP lub osocza - dłużej niż 30 minut.
Nie można po odłączeniu ponownie podłączać
pacjentowi tego samego zestawu lub składnika
krwi.
Przez jeden zestaw można przetaczać podczas
jednego zabiegu do 4 jednostek krwi pełnej lub
KKCz. Jeżeli przetaczanie jednej jednostki krwi
pełnej lub KKCz trwało 4 godziny, to zestaw do
przetaczania nie może być powtórnie użyty.
Należy go zmienić również
w przypadku, gdy po zakończonym przetoczeniu
podaje się płyny infuzyjne.
Niezużytego w całości składnika krwi nie można
przetoczyć innemu pacjentowi.
Transfuzja
Po przetoczeniu pojemniki z pozostałością po
przetoczeniu wraz z zestawami do przetoczenia
należy przechowywać w temperaturze od 2 °C do
6 °C przez 5 dni w specjalnie do tego celu
przeznaczonej lodówce.
Każde przetoczenie należy odnotować w historii
choroby, a ponadto zarejestrować w książce
transfuzyjnej.
Transfuzja
Lekarz odpowiedzialny za przetoczenie powinien
być obecny podczas rozpoczęcia przetoczenia
zawartości każdego pojemnika z krwią lub jej
składnikiem.
Lekarz lub wyznaczona przez niego pielęgniarka
(położna) są obowiązani do obserwacji pacjenta
podczas przetoczenia i przez 12 godzin po jego
zakończeniu.
Pacjent, któremu przetoczono krew w warunkach
ambulatoryjnych, może być zwolniony do domu
po okresie krótszym niż 12 godzin na podstawie
wpisu lekarza w książce transfuzyjnej.
Transfuzja
Przed przetoczeniem i po jego zakończeniu należy
dokonać pomiaru i rejestracji ciepłoty ciała, tętna
i ciśnienia tętniczego krwi.
Po 15 minutach od rozpoczęcia przetaczania
kolejnej jednostki krwi lub jej składnika należy
dokonać pomiaru
i rejestracji ciepłoty ciała i tętna.
Pacjenta należy pouczyć o konieczności
niezwłocznego zgłoszenia każdego niepokojącego
objawu,
a w szczególności dreszczy, wysypki,
zaczerwienienia skóry, duszności, bólu kończyn
lub okolicy lędźwiowej.
Powikłania
W przypadku pacjentów, którzy są nieprzytomni,
pogorszenie stanu ogólnego pacjenta, w
szczególności w ciągu 15-20 minut od
rozpoczęcia przetaczania każdej jednostki
składnika krwi, może być objawem odczynu
poprzetoczeniowego.
U tych pacjentów spadek ciśnienia tętniczego,
nieuzasadnione krwawienie, będące
następstwem rozsianego wykrzepiania
wewnątrznaczyniowego, hemoglobinuria lub
oliguria mogą być pierwszym objawem ostrej
hemolitycznej reakcji poprzetoczeniowej.
Powikłania poprzetoczeniowe –
wczesne (1-6 h)
• Proste reakcje gorączkowe (0,5%)
• Reakcje alergiczne (1-3%) lub anafilaktyczne (1 :
20000)
• Niezgodność w układzie AB0
prowadząca do ostrej hemolizy – 1 : 30000-60000
• Wstrząs septyczny spowodowany bakteriami – 1 :
7000
• Transfusion Associated Circulatory Overload – 1 :
200
• ostre poprzetoczeniowe uszkodzenie płuc
(
Transfusion Related Acute Lung Injury) – 1 : 5000
TRALI
• zagrażające życiu powikłanie podobne do ARDS, po każdym
prep.
• trzecia z kolei przyczyna zgonów związanych z transf.
• wynika z interakcji sw. przeciwciał z leukocytami
• p/ciała anty-HLA, anty-HNA
• wieloródki częściej niż inni pacjenci mają p/ciała anty-HLA
• p/ciała pochodzą zwykle od dawcy, ale opisano też
przypadki, gdy przetaczane leukocyty reagowały z p/ciałami
biorcy lub p/ciałami
z wcześniejszej transfuzji; bywa, że konflikt dotyczy dawców
pulowanych płytek
• nie każdy konflikt spowoduje klinicznie jawną TRALI –
niektórzy postulują, że potrzebny jest „drugi cios” – hipoksja,
zabieg chirurg., leczenie cytokinami, aktywna infekcja,
zapalenie, masywna transfuzja, aktywne lipidy obecne w
przechowywanych preparatach
TRALI
• klinicznie nie różni się od ARDS – szybko postępującej ciężkiej
niewydolności oddechowej – dochodzi do rozsianego
uszkodzenia pęcherzyków płucnych – niszczony jest
śródbłonek naczyń i nabłonek oddechowy; przestrzeń
powietrzna wypełnia się płynem i złogami białkowymi;
rozwija się naciek zapalny;
• cechy kliniczne: duszność, sinica, spadek ciśnienia, gorączka,
obrzęk płuc;
• leukopenia leukocytoza
Powikłania poprzetoczeniowe –
opóźnione
• Reakcje hemolityczne
• Poprzetoczeniowa skaza małopłytkowa
• poprzetoczeniowa choroba przeszczep przeciw
biorcy (ang. Transfusion Associated Graft versus
Host Disease - TA-GvHD);
• przeniesienie zakażeń wirusowych.
Powikłania
W przypadku wystąpienia u pacjenta objawów
nasuwających przypuszczenie wczesnego
odczynu związanego z przetoczeniem składnika
krwi należy niezwłocznie przeprowadzić pomiar
ciepłoty ciała, tętna
i ciśnienia tętniczego krwi.
W przypadku duszności poprzetoczeniowej lub
TRALI konieczne jest badanie radiologiczne płuc.
Powikłania
Dalsze postępowanie zależy od nasilenia i rodzaju
objawów. Jeżeli podczas transfuzji wyniki tych
pomiarów oraz towarzyszące im objawy wskazują na
ostry odczyn poprzetoczeniowy, należy
niezwłocznie:
- przerwać przetoczenie;
- powiadomić lekarza odpowiedzialnego za
przetoczenie;
- odłączyć pojemnik ze składnikiem krwi wraz z
zestawem do przetaczania, utrzymując wkłucie do
żyły i przetaczać powoli przez nowy, sterylny zestaw
0,9 % roztwór chlorku sodowego (NaCl) do czasu
wdrożenia odpowiedniego leczenia;
Powikłania
(…) CD:
sprawdzić dane na wszystkich pojemnikach
przetaczanych składników, wyniki próby zgodności
i grupy krwi pacjenta oraz dane identyfikujące
biorcę;
powiadomić pracownię serologii transfuzjologicznej,
która wykonywała badania przed przetoczeniem;
pracownia dokonuje kontroli dokumentacji i
ponownie wykonuje badania grupy krwi biorcy i
krwi dobieranej do
przetoczenia, a wyniki badań przekazuje do lekarza
odpowiedzialnego za przetoczenie;
powiadomić centrum, z którego otrzymano
składniki krwi;
Powikłania
(…) CD:
pobrać próbki krwi od pacjenta z innego miejsca
wkłucia niż miejsce, w którym dokonywano
przetoczenia w celu wykonania badań:
serologicznych (5 ml na antykoagulant, co
najmniej 5 ml na skrzep),
bakteriologicznych (na posiew); objętość próbki
krwi
i rodzaj pojemnika z podłożem bakteriologicznym
określa pracownia bakteriologiczna wskazana
przez centrum;
Powikłania
(…) CD:
przesłać do działu immunologii transfuzjologicznej
centrum: wszystkie próbki krwi pacjenta oraz krwi
dobieranej do przetoczenia, znajdujące się w
pracowni serologii transfuzjologicznej, próbki krwi
pacjenta pobrane do badań serologicznych po
przetoczeniu;
przesłać do pracowni bakteriologicznej wskazanej
przez centrum: pobrane po przetoczeniu próbki
krwi pacjenta,
wszystkie pojemniki z resztkami przetaczanej krwi;
pracownia bakteriologiczna po pobraniu z
pojemników próbek krwi do badań przesyła je do
działu immunologii transfuzjologicznej centrum;
przesłać do centrum wypełniony przez lekarza
odpowiedzialnego za przetoczenie formularz
zgłoszenia powikłania poprzetoczeniowego.
Powikłania
Jeżeli u biorcy rozpoznano TRALI lub
poprzetoczeniową duszność, centrum rozpoczyna
procedurę "śledzenia wstecz" w celu stwierdzenia,
czy krew i jej składniki od tego samego dawcy
spowodowały wymienione powikłania u innych
biorców.
Konflikt serologiczny
Jest to niezgodność serologiczna między matką a
płodem w zakresie jakiegoś antygenu
Czyli:
Gdy w surowicy matki powstaną przeciwciała
odpornościowe klasy IgG przeciwko antygenowi
obecnemu na powierzchni RBC płodu
Antygen ten jest dziedziczony po ojcu, dostaje się do
krążenia matki w czasie ciąży wraz z niewielką ilością
krwinek płodu, pobudza organizm matki do produkcji
alloprzeciwciał.
Konflikt serologiczny na tle
czynnika Rh
95% w zakresie antygenu D
• Niezgodność w zakresie czynnika Rh (kobieta z grupą
krwi Rh - a partner posiadający grupę Rh +) zagraża
konfliktem serologicznym, który może wywołać chorobę
hemolityczną płodu.
• Jeżeli płód rozwijający się u matki Rh - odziedziczy od
ojca antygen Rh (czyli grupę krwi Rh +), to w przypadku
przecieku krwi płodu w czasie ciąży lub porodu do
krwioobiegu matki w ilości przekraczającej 0,2 ml,
dochodzi do uczulenia ciężarnej krwinkami płodowymi.
• Układ immunologiczny ciężarnej produkuje przeciwciała
anty Rh skierowane przeciw krwinkom płodowym.
Konflikt serologiczny na tle czynnika Rh
• Proces ten rozwija się dwuetapowo.
• Pierwszym etapem jest uczulenie kobiety antygenem
czerwonokrwinkowym Rh i wytworzenie pamięci
immunologicznej.
• Drugi etap polega na przechodzeniu przeciwciał anty Rh
przez barierę łożyskową do płodu, łączenie się ich z
antygenem Rh, co powoduje niszczenie (hemolizę) Rh
dodatnich krwinek płodu.
• Efektem tej reakcji jest niedokrwistość płodu.
• Sporadycznie tylko obserwuje się, że oba etapy zachodzą
podczas pierwszej ciąży, ale nawet jeżeli się zdarzy, to
nasilenie choroby hemolitycznej płodu w trakcie tej samej
ciąży jest nieznaczne.
Konflikt serologiczny na tle czynnika Rh
Do przecieku krwi płodowej do ciężarnej w większej ilości
(przekraczającej 0,2 ml) dochodzi najczęściej podczas:
* porodu,
* poronienia,
* odklejenia się łożyska,
* zabiegów wewnątrzmacicznych, wykonywanych w celach
diagnostycznych lub leczniczych,
* a także pod koniec ciąży, krótko przed porodem.
Istnieją również inne przyczyny prowadzące do
wytworzenia pamięci immunologicznej, np: przetoczenie
krwi niezgodnej grupowo,
Konflikt serologiczny na tle czynnika Rh
Dlaczego w pierwszej ciąży praktycznie nie
spotykamy się
z choroba hemolityczną?
* Pierwotna odpowiedź immunologiczna prowadzi do
wytworzenia przeciwciał klasy Ig M, które nie przechodzą
przez łożysko. Dopiero 1,5 do 6 miesięcy później
produkowane są przeciwciała klasy Ig G niekompletne,
które mogą przechodzić przez barierę łożyskową.
* W wyniku wytworzenia pamięci immunologicznej w
następnej ciąży od początku wytwarzane są przeciwciała
klasy Ig G pod wpływem nawet małych przecieków
płodowo-matczynych.
* Przenikanie przeciwciał anty Rh nasila się po 16 - 18
tygodniach ciąży, a największe jest w III trymestrze,
dlatego każdą ciąże konfliktową powinno zakończyć się w
37 - 38 tygodniu jej trwania. .
Inne antygeny układu Rh np. „c” oraz z układów poza Rh
takich jak: Kell, Duffy, Kidd – mogą powodować niezgodność
serologiczną pomiędzy matką a płodem
np.:
• M Rh+ fenotyp CCDee
• D Rh+ fenotyp CcDee
-
w surowicy matki stwierdzono
obecność przeciwciał IgG o wsoistości anty Rh c
M Rh+ fenotyp CcDee
D Rh+ fenotyp CcDEe
-
w surowicy matki stwierdzono
obecność przeciwciał klasy IgG o swoistości anty Rh Ejako
odpowiedź na obecność antygenu E na krwinkach płodu
Istota choroby hemolitycznej
• W procesie rozpadu erytrocytów u płodu, pod wpływem przeciwciał
anty Rh powstaje bilirubina, oraz uwalniany jest CO
2
, który łączy
się z Hb innych erytrocytów, co obniża ich zdolność do transportu
tlenu
• Najcięższa postać choroby hemolitycznej - obrzęk uogólniony
płodu spowodowany jest masywną hemolizą (rozpadem
erytrocytów), prowadzącą w konsekwencji do ciężkiej
niedokrwistości.
• Powstają liczne ogniska tworzenia krwinek poza szpikiem - w
wątrobie
i innych narządach.
Powoduje to powiększenie wątroby i upośledzenie jej funkcji, przede
wszystkim produkcji albumin (białek) i czynników krzepnięcia.
Wymienione zaburzenia prowadzą do niewydolności krążenia,
hipoalbuminemii i zwiększonej przepuszczalności naczyń
krwionośnych (przesięki w otrzewnej, opłucnej, osierdziu i
tkankach miękkich płodu).
W efekcie dochodzi do ciężkiego niedotlenienia ośrodkowego układu
nerwowego i w rezultacie do wewnątrzmacicznej śmierci płodu.
Diagnostyka konfliktu
serologicznego
• Pierwszym badaniem, które należy wykonać u każdej
ciężarnej, niezależnie od grupy krwi i czynnika Rh, jest ocena
obecności przeciwciał przeciwerytrocytarnych w surowicy
krwi.
• Badanie to umożliwia wykrycie wszystkich immunizacji, nie
tylko
u pacjentek z grupą krwi Rh (-).
Jeżeli wynik badania jest ujemny u ciężarnych z grupą krwi Rh
(-), celowe jest jego powtórzenie na przełomie II i III
trymestru ciąży (28hbd) oraz w okresie okołoporodowym.
Dodatni wynik badania w I trymestrze przemawia za obecnością
przeciwciał, które powstały w poprzedniej ciąży.
Pojawienie się przeciwciał w kolejnych badaniach lub wzrost ich
miana świadczy o tym, że płód ma grupę Rh (+). Wymaga to
powtarzania badań co 4 do 6 tygodni.
• Stwierdzenie obecności przeciwciał w surowicy krwi
ciężarnej jest wskazaniem do wykonania badania USG celem
dalszej diagnostyki w kierunku choroby hemolitycznej.
Diagnostyka konfliktu
serologicznego
• W przypadku narastania miana przeciwciał anty Rh lub
przebytej choroby hemolitycznej w poprzednich ciążach
konieczne jest przeprowadzenie dokładniejszych badań,
amniopunkcji oraz kordocentezy.
• Amniopunkcja polega na pobraniu płynu owodniowego w
celu oceny jego gęstości optycznej, która zależy od
zawartości pochodnych bilirubiny powstających w czasie
hemolizy erytrocytów.
• Bardziej precyzyjne jest kordocenteza, czyli pobranie
próbki krwi płodu z pępowiny. Badaniem tym możemy
określić morfologię płodu, a więc ewentualny stopień
anemii spowodowany konfliktem.
• W przypadku stwierdzenia ciężkiej niedokrwistości lub
obrzęku uogólnionego płodu przystępujemy do terapii
wewnątrzmacicznej. Polega ona na powtarzanym co 10 do
14 dni przetaczaniu (transfuzji) wewnątrzmacicznym krwi.
Takie zabiegi wykonuje się kilka razy, do czasu osiągnięcia
przez płód dojrzałości, co następuje około 35 tygodnia
ciąży i wówczas należy ciążę rozwiązać
Profilaktyka konfliktu serologicznego
Polega ona na podaniu kobietom Rh ujemnym przeciwciał anty-
RhD
w celu zahamowania pierwotnej odpowiedzi immunologicznej na
antygen D Rh dodatniego płodu.
Postępowanie to dotyczy również kobiet z odmianą antygenu D
kategorii DVI.
Przeciwciała anty-D stosowane są w postaci czystej frakcji
immunoglobuliny G, wyizolowanej z osocza osób
uodpornionych,
głównie dawców krwi poddanych zamierzonej immunizacji.
Polski preparat immunoglobuliny anty-RhD nosi nazwę Gamma
anty-D i produkowany jest w dawkach 150 i 50 mikrogramów.
Podaje się go domięśniowo w czasie nie przekraczającym 72
godzin:
Profilaktyka konfliktu serologicznego
• W Polsce obowiązuje następujący schemat
podawania immunoglobulikny anty D:
1. Podanie
50 μg immunoglobuliny anty D
wszystkim
kobietom Rh (-), bez przeciwciał anty Rh:
• po poronieniu samoistnym do 12 hbd
(> 12 hbd 150 μg
)
• po poronieniu sztucznym
• po wyłyżeczkowaniu ciąży obumarłej
• po operacji ciąży ektopowej
• po wykonaniu amniopunkcji, kordocentezy, biopsji
kosmówki,
• po stwierdzeniu krwawienia z dróg rodnych
(poronienie zagrażające)
Profilaktyka konfliktu serologicznego
2. Podanie
150 μg immunoglobuliny anty D
wszystkim
pacjentkom z grupą Rh (-), bez przeciwciał, które urodziły
dziecko Rh (+)
* po porodzie fizjologicznym,
* po porodzie ciąży obumarłej,
* przy krwawiącym łożysku przodującym.
3. Podanie
300 μg immunoglobuliny anty D
tej samej
grupie pacjentek:
* po porodach w ciąży mnogiej,
* po cięciu cesarskim,
* po porodach zabiegowych,
* po ręcznym oddzieleniu łożyska,
* po wyłyżeczkowaniu jamy macicy.
Konflikt serologiczny w układzie ABO
• Istnieje wówczas, gdy w surowicy matki znajdują się
przeciwciała anty-A lub anty-B, natomiast krwinki płodu
zawierają odpowiedni antygen. Najczęściej występuje u
dzieci grupy A lub B (AB) urodzonych przez matki grupy 0.
• Synteza antygenów układu ABO zaczyna się przed 6 tyg.
życia płodowego, wzrost nasilenia antygenów wyst. w
okresie okołoporodowym i w ciągu kilku dni po urodzeniu,
pełna dojrzałość później – ok. 3 r.ż.
• Przeciwciała anty-A i anty-B są regularne, w klasie IgM
nie przechodzą przez łożysko, jednakże osobnicy gr. 0
wytwarzają często oprócz IgM także IgG, i to w dużym
stężeniu, można je stwierdzić u noworodka, ponieważ
przechodzą przez łożysko.
• Gdy krwinki noworodka zawierają odpowiednio dojrzały
antygen, p/ciała wiążą się z determinantami
antygenowymi krwinek doprowadzając do ich
immunologicznego niszczenia.
Konflikt serologiczny w układzie ABO
• Przeciwciała anty-A i anty-B są najczęściej
spotykanymi przeciwciałami klasy IgG w
surowicach kobiet ciężarnych.
• Niezgodności serologiczne między matką a
płodem w tym układzie występują w około 20%
ciąż
• Objawowy konflikt, np. żółtaczka spowodowana
przez przeciwciała anty-A i anty-B, wyst. ok.
1/100 porodów
• Konflikt w układzie ABO zagraża po urodzeniu
dziecka, nie w czasie ciąży
• Często powolne niszczenie krwinek nie powoduje
szybkiego narastania poziomu bilirubiny i może
pozostawać nierozpoznane
ZASADY DOBIERANIA KRWI DO PRZETOCZENIA
WYMIENNEGO I WEWNĄTRZMACICZNEGO
1. W konflikcie Rh, dotyczącym antygenu D podaje się
wyłącznie krew Rh (-).
Grupa krwi ABO powinna być zgodna z krwią dziecka.
Wyjątek stanowią noworodki grupy A lub B matek
grupy 0, dla których bezpieczniej jest przygotować
krew „uniwersalną” dla układu ABO (krwinki 0 Rh- w
osoczu zgodnym z grupą krwi dziecka lub w osoczu
grupy AB).
Krew jednoimienną w tym układzie grupowym można
podawać tylko wtedy, jeżeli w surowicy matki (lub w
surowicy krwi pępowinowej) nie stwierdza się
obecności przeciwciał IgG anty-A lub / i anty-B w
badaniu w PTA.
2
.
Do transfuzji wewnątrzmacicznych w
konflikcie Rh (przeciwciała anty-D)
należy przygotować
ubogoleukocytarny
KKCz grupy 0 Rh- K-,.
Konieczne jest
napromienianie krwi w celu
zapobiegania powikłań GvHD. Można
przetaczać krwinki jednoimienne w
układzie ABO, jeżeli znana jest grupa
krwi płodu i próba zgodności została
wykonana z surowicą matki.
3.
Do transfuzji wymiennej w konflikcie ABO podaje się
krew „uniwersalną” (KU ABO) dlatego układu
grupowego.
Jest to KKCz o Rh zgodnym z krwią dziecka,
przygotowany z krwi dawcy grupy 0, z niskim mianem
przeciwciał anty-A lub anty-B w zależności od grupy krwi
dziecka. Miano aglutynin nie może przekraczać 32.
Zamiast oznaczenia miana można wykonać PTA, badając
osocze rozcieńczone 1:50 wobec
krwinek A1 lub B. Dodatni wynik testu eliminuje KU ABO.
• Do przetoczenia, koncentrat krwinek grupy 0 uzupełnia
się osoczem grupy AB lub zgodnym grupowo z krwią
dziecka.
4.
W konflikcie serologicznym w zakresie
innych antygenów, krew do
przetoczenia, oprócz zgodności w
układzie ABO i Rh, nie może zawierać
antygenu odpowiedzialnego za
uodpornienie matki. Wybiera się ją za
pomocą odpowiednich odczynników
diagnostycznych.
5. Dla zapewnienia wysokiej aktywności
biologicznej krwinek i maksymalnego czasu ich
przeżycia, okres od pobrania krwi do transfuzji
wymiennej i dopłodowej nie powinien
przekraczać 5 dni.
6. W okresie pierwszych 4 miesięcy życia, do
następnych przetoczeń stosuje się krew tej
samej grupy krwi ABO i Rh jak do pierwszej
transfuzji. Krew w małych objętościach
(transfuzjeuzupełniające) stosuje się w okresie
jej przydatności (35 dni).