Rodzaje i charakterystyka
materiałów biologicznych do
badań laboratoryjnych
Dr Jolanta Czyżewska
Zakład Laboratoryjnej Diagnostyki Klinicznej
KREW
Płynna tkanka łączna złożona z komórek,
które zawieszone są w części płynnej
krwi zwanej osoczem. Układ krążenia
dorosłego człowieka zawiera około 70–
80 ml krwi na kilogram masy ciała, czyli
u człowieka dorosłego krąży około 5 do
6 litrów krwi (z racji różnicy w rozmiarach
i masie ciała, mężczyźni mają przeciętnie
około litra więcej krwi od kobiet). U dzieci
krew to ok. 1/10 do 1/9 wagi ciała.
KREW
KREW
Krew tętnicza- pobiera lekarz z tętnicy
ramiennej, udowej lub promieniowej
Krew żylna- pobierana najczęściej z żyły
odłokciowej
Krew
włośniczkowa-
pobierana
poprzez
nakłucie opuszki palca, płatka ucha, dużego
palca u nogi lub piętki.
KREW
Krew pełna- próbka krwi żylnej, tętniczej lub kapilarnej, w
której stężenia oraz właściwości składników komórkowych
i
zewnątrzkomórkowych
pozostają
względnie
niezmienione w porównaniu do stanu in vivo.
Osocze-otrzymany
po
odwirowaniu
bezkomórkowy
supernatant krwi zawierający antykoagulant
Surowica- nierozcieńczona, zewnątrzkomórkowa płynna
część krwi pełnej, która powstaje po całkowitym
wykrzepieniu
OSOCZE
Osocze
Względna
siła
ośrodkowa
(g)
Czas
wirowania
(min)
bogatopłytkowe
150-200
5
ubogopłytkowe
1000-2000
10
bezpłytkowe
2000-3000
15-30
ANYTKOAGULANT
MECHANIZM DZIAŁANIA
EDTA (wersenian)
wiąże jony Ca
2+
heparyna
hamuje przejście
protrombiny w trombinę i
aktywację czynników IX, X,
XI, XII
cytrynian sodu
wiąże jony Ca
2+
fluorek sodu
hamuje proces glikolizy
jodooctan litu
hamuje proces glikolizy
mannoza
hamuje proces glikolizy
CTDA (cytrynian, teofilina,
adenozyna, dipirydamol)
Wiąże jony Ca
2+
, dodatkowo
hamuje uwalnianie
heparynazy przez PLT
ANYTKOAGULANT
BADANIE
EDTA (K2,K3, Na2,Na2)- sól
kwasu
etylenodiaminotetraoctoweg
o
próbka stabilna do 6 godz. w
temp. pokojowej, do 24 godz.
w
temp.
2-8
o
C-
morfologia,BNP,HbA1C,
grupa
krwi,
badania
genetyczne,
pierwiastki
śladowe
heparyna (litowa, sodowa,
amonowa)
RKZ, gazometria, troponina,
katecholaminy, wapń
zjonizowany, mleczany
CTDA (cytrynian, teofilina,
adenozyna, dipirydamol)
specjalistyczne badania
układu krzepnięcia
ANYTKOAGULANT
BADANIE
cytrynian sodu
3,2% cytrynian sodu w
stosunku
1:9- hemostaza, PLT na
cytrynian
3,8% cytrynian sodu w
stosunku 1:4 - OB
fluorek sodu
hamuje
enolazę;
próbka
stabilna
około
3
doby-
glukoza
jodooctan litu
hamuje dehydrogenazę 3-
fosforanu
gliceroaldehydu;
próbka stabilna około 3 doby-
glukoza
mannoza
hamuje heksokinazę, próbka
stabilna do 4 godz.- glukoza
KREW-czynniki interferujące
Hemoliza- uwolnienie wewnątrzkomórkowych komponentów
krwinek czerwonych oraz innych elementów morfologicznych
krwi do zewnątrzkomórkowej przestrzeni krwi. Hemoliza może
wystąpić in vivo (np. reakcja poprzetoczeniowa, przepływ krwi
przez urządzenia medyczne) oraz in vitro: pobieranie próbek,
długie przechowywanie i transport krwi, wirowanie,
zamrażanie, działanie czynników chemicznych (detergenty),
rozcieńczenie krwi r-rem hipotonicznym, ↓ lub ↑ ciśnienie.
Wpływ hemolizy na oznaczane parametry:
↑: LDH, AST, ALT, CK, CK-MB, NSE, ACP, K, Fe, Mg, HGB, HDL, TG,
Chol,,mocznik
↓: RBC, Hct, GGTP, ALP, amylaza, akt. czynników krzepnięcia
KREW- czynniki interferujące
Lipemia- zmętnienie surowicy lub osocza widoczne gołym okiem,
spowodowane przez podwyższone stężenie lipoprotein (najczęściej
TG). Może to być spowodowane spożyciem posiłku, zmienionym
metabolizmem lipidów bądź infuzją lipidów. Lipemia widoczna jest
przy stężeniu TG większym niż 300 mg/dl. Wykrzepianie surowicy,
od pacjentów którym podano heparynę, może również spowodować
zmętnienie próbki. Metodą z wyboru usunięcia zmętnienia jest 10
min wirowanie w mikrowirówce przy 10 000g.
Wpływ lipemii na oznaczane parametry:
↑: lipidów, HGB, kwas moczowy, białko, glukoza, składniki
rozpuszczalne w lipidach (np. witaminy, narkotyki)
↓: Na, K, CK, kreatynina
KREW- czynniki interferujące
Próbka żółtaczkowa- pojawienie się różnych rodzajów
bilirubiny. Hiperbilirubinemia występuje najczęściej u
pacjentów
z
oddziałów
OIT,
gastrologicznych,
chirurgicznych, pediatrycznych i neonatologicznych.
Dostarczane z pożywieniem karoteny i karotenoidy
powodują, że bezpośredni pomiar stężenia bilirubiny jest
podwyższony.
Wpływ na oznaczane parametry:
↓:glukozy, mocznika kreatyniny, cholesterolu, TG
KREW- czynniki interferujące
(przeciwciała)
Zimne aglutyniny- p/ciała klasy IgM wiążące aglutynogen
w temp.
4-22
o
C
Wpływ na oznaczane parametry:
↑:MCV, MCH, MCHC,WBC, PLT
↓:RBC, Hct
Krioglobuliny- po obniżeniu temperatury próbki krwi
krioglobuliny (najczęściej immunoglobuliny
monoklonalne) ulegają precypitacji lub żelifikacji
Wpływ na oznaczane parametry:
↑:WBC
↓: PLT, RBC
KREW- czynniki interferujące
(przeciwciała)
Przeciwciała EDTA- zależne- zimne aglutyniny lub
przeciwciała aktywowane wobec EDTA
Wpływ na oznaczane parametry:
↓:PLT
Autoprzeciwciała- p/ciała skierowane przeciwko tkankom
własnego organizmu
Wpływ na oznaczane parametry:
autop/ciała skierowane do T3 i T4- ↑ hormonów tarczycy
autop/ciała antyfosfolipidowe- przedłużenie APTT
autop/ciała do cTnI- wyniku fałszywie ujemne lub
zaniżone
MOCZ
Przesącz osocza wytwarzany w nerkach i
wydalany z organizmu, zawierający produkty
przemiany materii bezużyteczne lub szkodliwe
dla ustroju. Dobowa ilość moczu wydalanego
przez zdrowego człowieka waha się od 600 do
2500 ml. Zależy ona od wielu czynników, m.in.
ilości
spożytych
płynów
otoczenia.
MOCZ
Diureza- zależy od stanu czynnościowego nerek,
nawodnienia organizmu, diety, temperatury
otoczenia, stanu fizycznego.
Prawidłowa diureza 600-2000ml/24h
Skąpomocz (oliguria) 100-400/500 ml/24h
Bezmocz (anuria) <100 ml/24h
Wielomocz (poliuria) >2500/3000 ml/24h
MOCZ
Pierwsza poranna próbka moczu- oddana bezpośrednio po
spoczynku nocnym w pozycji leżącej, trwającym nie mniej niż
8 godz., w tym przynajmniej 4-ro godz. gromadzeniu moczu w
pęcherzu.
Zbiórka moczu- dobowa (DZM), dwunastogodzinna itp. w
zależności od określonego badania. Technikę tę wykorzystuje
się głównie do badań ilościowych.
Przypadkowa (losowa) próbka moczu- oddana o dowolnej
porze dnia, w dowolnej objętości, ze środkowego strumienia,
bez przygotowania pacjenta.
MOCZ
Pobranie przez nakłucie nadłonowe- uzyskanie moczu
bezpośrednio z pęcherza moczowego poprzez nakłucie ściany
brzucha i wypełnionego pęcherza za pomocą jałowej igły i
strzykawki. W ten sposób uzyskuje się jałowa próbkę do
posiewu na obecność drobnoustrojów.
Pobranie moczu z cewnika- próbka pobrana z użyciem
jałowego cewnika wprowadzonego przez cewkę moczową do
pęcherza. Mocz spływa siłą ciężkości bezpośrednio z pęcherza i
jest zbierany do plastikowego woreczka.
KAŁ
Odpadowe produkty procesu trawienia. W skład
kału wchodzą resztki pokarmowe, śluz, bakterie
jelitowe, złuszczony nabłonek jelit, wydzieliny p.
pokarm., barwniki żółciowe, elektrolity, woda.
Dzienne wydalanie u dorosłego wynosi 80-200
g/24h. Wzrost ilości wydalanego kału mogą
spowodować biegunki oraz dieta bogato- roślinna,
spadek- zaparcia, głodzenie. Stolce luźne należy
badać natychmiast po oddaniu, uformowane
można przechowywać do 24 godz. w lodówce
KAŁ
Barwa kału:
odcień brązowy (sterkobilina)
żółtozielona (noworodki, ciężkie biegunki, po antybiotykoterapii)
zielona (dieta bogatochlorofilowa, ciężkie biegunki, , zatrucia
solami rtęci)
piaskowa (niedrożność dróg żółciowych, niewydolność trzustki
ciemna
(krwawienia
z
górnych
odcinków
przewodu
pokarmowego, podawanie żelaza, węgiel aktywowany, sole
bizmutu)
czerwona (krwawienia z dolnego odc. p. pokarm.)
wygląd „kitowaty”- duża zawartość tłuszczów (tzw. stolce
tłuszczowe)
KAŁ
Domieszka krwi, śluzu:
dur brzuszny
czerwonka
zakażenia Shigella, Salmonella
rak jelita grubego
colitis ulcerosa
choroba Leśniewsiego- Crona
ŻÓŁĆ
Wydzielina wątroby (hepatocytów i kanalików żółciowych)
niezbędna do trawienia tłuszczów i wchłaniania witamin
rozpuszczalnych w tłuszczach. Wątroba wydziela dziennie
500-1500 ml żółci, przy czym wydzielanie dzienne jest
nieco większe niż nocne. Wydzielanie żółci odbywa się
pod ciśnieniem 1.5-2.5 kPa. Przy wzroście ciśnienia w
drogach żółciowych wewnątrzwątrobowych ponad 2.0 kPa
powstaje tzw. biała żółć. Wydzielanie żółci ustaje, gdy
ciśnienie w przewodzie żółciowym wspólnym wynosi 3.5
kPa.
ŻÓŁĆ
↑ wydzielana żółci:
sole kwasów żółciowych
sekretyna
dieta wysokobiałkowa, wysokotłuszczowa
↓ wydzielana żółci:
odwodnienie
dieta węglowodanowa
noc
ŻÓŁĆ- frakcje
Żółć A- w przewodzie żółciowym wspólnym i większych
przewodach żółciowych, jasnożółta, przejrzysta, około 15-20
ml, zawartość bilirubiny 3-10 ng/100 ml
Żółć B- w pęcherzyku żółciowym, ciemnobrunatnozielona,
około 40 ml, zawartość bilirubiny ok. 50 ng/100 ml
Żółć C- z drobnych przewodów śródwątrobowych,
jasnożółta, około 15-20 ml, zawartość bilirubiny 5-15
ng/100ml
KAMIENIE ŻÓŁCIOWE
cholesterolowe
barwnikowe
Czynniki predysponujące do wystąpienia kamicy:
czynniki hormonalne
zaburzenia wydzielania kwasów żółciowych
leki (anytykoncepcja doustna)
choroby wątroby
zespół złego wchłaniana
cukrzyca
podeszły wiek
otyłość
płeć
PŁYN MÓZGOWO- RDZENIOWY
przejrzysta, bezbarwna ciecz, która wypełnia
przestrzeń podpajęczynówkową, układ komorowy i
kanał rdzenia kręgowego. Jest nieustannie
wytwarzany w splotach naczyniówkowych i
wyściółce układu komorowego mózgu w ilości ok.
550 ml na dobę. Całkowita objętość PMR wynosi u
dorosłych 85-150 ml, u noworodków 10-60 ml
(podlega czterokrotnej wymianie w ciągu 24
godzin).
PMR- wartości referencyjne
Parametr
Wartość
barwa
wodojasny
przejrzystość
klarowny
tendencja do wykrzepiania
brak
pleocytoza
dorośli 0-5 kom/μl
noworodki 0-30 kom/μl
erytrocyty
brak
białko
dorośli (18-60lat) 15-45 mg/dl
dorośli (>60 lat) 15-60 mg/dl
noworodki 15-100 mg/dl
glukoza
50-80 mg/dl
chlorki
115-130 mEq/l
115-130 mEq/l
PŁYNY Z JAM CIAŁA
Jamy opłucnej, osierdzia i otrzewnej zwane
jamami surowiczymi są wyścielone pojedynczą
warstwą komórek międzybłonka. W warunkach
prawidłowych zawierają one tylko niewielką
ilość płynu niezbędnego do nawilżania ściennej
i trzewnej blaszki jamy surowiczej. Większa ilość
płynu zbiera się w stanach patologicznych.
PŁYNY Z JAM CIAŁA
Jama ciała
Fizjologiczna ilość płynu
Jama otrzewnej
Jama opłucnej
Worek osierdziowy
Staw kolanowy
Przestrzeń pm-r dorośli
noworodki
Worek owodniowy
do 100 ml
20 ml
20-25 ml
ok. 3,5 ml
100-150 ml
10-60 ml
do 800 ml
PŁYNY Z JAM CIAŁA
Płyn w klatce piersiowej
Płyn w klatce piersiowej
Hydrothorax-
Hydrothorax-
płyn surowiczy w jamie opłucnej
płyn surowiczy w jamie opłucnej
Haemothorax
Haemothorax
- krew w jamie opłucnowej
- krew w jamie opłucnowej
Pyothorax
Pyothorax
- ropa w jamie opłucnowej
- ropa w jamie opłucnowej
Płyn zapalny mieszany
Płyn zapalny mieszany
Płyn w worku osierdziowym
Płyn w worku osierdziowym
Hydropericardium-
Hydropericardium-
płyn surowiczy w jamie osierdziowej
płyn surowiczy w jamie osierdziowej
Haemopericardium
Haemopericardium
- krew w worku osierdziowym
- krew w worku osierdziowym
Płyn w jamie brzusznej
Płyn w jamie brzusznej
Ascites
Ascites
- płyn surowiczy w jamie otrzewnej
- płyn surowiczy w jamie otrzewnej
Haemascos
Haemascos
lub
lub
Haemoperitoneum
Haemoperitoneum
- krew w jamie otrzewnowej
- krew w jamie otrzewnowej
Chyloscos
Chyloscos
- limfa w jamie otrzewnowej
- limfa w jamie otrzewnowej
Płyn zapalny mieszany
Płyn zapalny mieszany
PŁYNY Z JAM CIAŁA
Płyny z jam ciała
przesięki
wysięki
mieszane
Płyny niezapalne
Płyny zapalne
Płyny nowotworowe
•bakteryjne
•wirusowe
•gruźlicze
•pasożytnicze
Przyczyny gromadzenia płynów
przesiękowych
↑
↑
ciśnienia hydrostatycznego
ciśnienia hydrostatycznego
↓
↓
ciśnienia onkotycznego
ciśnienia onkotycznego
hipoproteinemia
hipoproteinemia
hipoalbuminemia
hipoalbuminemia
niewydolność krążenia
niewydolność krążenia
niektóre wady serca
niektóre wady serca
marskość wątroby
marskość wątroby
zespół nerczycowy
zespół nerczycowy
Przyczyny gromadzenia płynów
wysiękowych
↑
↑
przepuszczalność naczyń włosowatych
przepuszczalność naczyń włosowatych
↓
↓
wchłanianie przez układ chłonny
wchłanianie przez układ chłonny
uszkodzenie naczyń krwionośnych
uszkodzenie naczyń krwionośnych
miażdżyca
miażdżyca
uraz mechaniczny
uraz mechaniczny
choroby autoimmunologiczne (np. RZS, SLE)
choroby autoimmunologiczne (np. RZS, SLE)
infekcje bakteryjne, gruźlicze, wirusowe
infekcje bakteryjne, gruźlicze, wirusowe
alergie
alergie
odczyn nieswoistego podrażnienia
odczyn nieswoistego podrażnienia
proces nowotworowy
proces nowotworowy
Płyny o etiologii
nowotworowej
bezpośredni skutek rozrostu komórek nowotworowych w obrębie
bezpośredni skutek rozrostu komórek nowotworowych w obrębie
błon surowiczych
błon surowiczych
pośrednie następstwo zmian nowotworowych w ustroju
pośrednie następstwo zmian nowotworowych w ustroju
bez bezpośredniego związku z chorobą nowotworową
bez bezpośredniego związku z chorobą nowotworową
płyn może mieć charakter przesięku, wysięku lub płynu
płyn może mieć charakter przesięku, wysięku lub płynu
mieszanego
mieszanego
płyn może być ubogo- lub bogatokomórkowy z obecnością lub bez
płyn może być ubogo- lub bogatokomórkowy z obecnością lub bez
komórek nowotworowych
komórek nowotworowych
Różnicowanie wysięków i
przesięków
Test
Test
Przesięk
Przesięk
Wysięk
Wysięk
Przejrzystość
Przejrzystość
klarowny
klarowny
mętny
mętny
ciężar właściwy
ciężar właściwy
<1,016
<1,016
>1,018
>1,018
próba Rivalty
próba Rivalty
(-)
(-)
(+)
(+)
tendencja do
tendencja do
wykrzepiania
wykrzepiania
(-)
(-)
(+)
(+)
Leukocytoza
Leukocytoza
<500 komórek/
<500 komórek/
μ
μ
l
l
>1000 kom/
>1000 kom/
μ
μ
l
l
LDH w płynie
LDH w płynie
<2/3 górnej granicy
<2/3 górnej granicy
normy w surowicy
normy w surowicy
>2/3 górnej granicy
>2/3 górnej granicy
normy w surowicy
normy w surowicy
LDH pł/LDH sur
LDH pł/LDH sur
<0,6
<0,6
>0,6
>0,6
białko w płynie
białko w płynie
<3 g/dl
<3 g/dl
>3,5 g/dl
>3,5 g/dl
białko pł/białko sur
białko pł/białko sur
<0,5
<0,5
>0,5
>0,5
Różnicowanie wysięków i
przesięków
Test
Test
Przesięk
Przesięk
Wysięk
Wysięk
Glukoza
Glukoza
jak w surowicy krwi
jak w surowicy krwi
< stęż. w surowicy
< stęż. w surowicy
krwi
krwi
amylaza
amylaza
akt. jak w surowicy
akt. jak w surowicy
wysoka akt. w
wysoka akt. w
chorobach trzustki
chorobach trzustki
Chylomikrony
Chylomikrony
nie stwierdza się
nie stwierdza się
chłonka w jamie
chłonka w jamie
otrzewnowej
otrzewnowej
Albuminy
Albuminy
> 1,2 mg/dl
> 1,2 mg/dl
< 1,2 md/dl
< 1,2 md/dl
Q albuminowy
Q albuminowy
>0,8
>0,8
<0,3
<0,3
Cholesterol
Cholesterol
< 60 mg/dl
< 60 mg/dl
> 60 mg/dl
> 60 mg/dl
Bilirubina
Bilirubina
< 0,6 mg/dl
< 0,6 mg/dl
> 0,6 mg/dl
> 0,6 mg/dl
markery
markery
nowotworowe
nowotworowe
(-)
(-)
(+)
(+)
cytokiny zapalne
cytokiny zapalne
(-)
(-)
(+)
(+)
Różnicowanie chłonki i
pseudochłonki
PŁYN STAWOWY
Płyn stawowy- „płynna tkanka łączna”. Jest to
mieszanina składników osocza przenikających
do jamy stawowej przez ściany naczyń
krwionośnych błony maziowej oraz substancji
wytwarzanych w stawie. Powstaje w wyniku
ultrafiltracji osocza przez błonę maziową oraz z
wydzieliny synowiocytów.
PŁYN STAWOWY- rola
pokrywanie ściany jamy stawowej
wymiana składników odżywczych
przepływ elektrolitów
warunkuje prawidłową czynność błony
maziowej i chrząstki
amortyzacja
nadawanie śliskości powierzchni chrząstek
stawowych
PŁYN STAWOWY
objętość
0,1- 3,5 ml
barwa
bladożółty
przejrzystość
przejrzysty
lepkość
wysoka, tworzy „nici”
leukocyty
< 200kom/μl
glukoza
jak w osoczu
kwas moczowy
jak w osoczu
białko
1-3 g/dl
tendencja do wykrzepiania
brak
kryształy
brak
INNE MATERIAŁY BIOLOGICZNE
sok żołądkowy
sok trzustkowy
szpik kostny
bioptaty tkanek
BAL (popłuczyny oskrzelikowo- pęcherzykowe)
plwocina
ślina
łzy
płyn zaotrzewnowy
płyn z torbieli (np. trzustki, wątroby)
płyn owodniowy
wydzielina z pochwy
nasienie
wymiociny