Patrycja Sidor, Ewelina Seliga, Magdalena Matusiak, Magdalena Maruniak, Katarzyna Mamul, Marcin Malinowski, Kamila Kielak, Sebastian Jakubowski, Jakub Bieńkowski
gr. 3, podgrupa 2
Sprawozdanie
Temat: Ekstrakcja, oznaczenie jakościowe (identyfikacja) oraz ilościowe barwników antocyjanowych w wybranych owocach z produkcji ekologicznej i konwencjonalnej. Zasady chromatograficznego rozdziału antocyjanów.
Cel: Zapoznanie się z metodą oznaczania antocyjanów ogółem w wybranych produktach oraz wykazanie wpływu metody produkcji na zawartość antocyjanów w produktach ekologicznych i konwencjonalnych. Porównanie dwóch metod analizy barwników antocyjanowych: HPLC oraz kolorymetrycznej. Porównanie dwóch próbek - malin z produkcji ekologicznej i malin z produkcji konwencjonalnej.
Wyniki:
Metoda kolorymetryczna
Numer próbki |
Rodzaj próbki |
Absorbancja 532nm |
1 |
Laszka ekologiczna |
0,058 |
2 |
Glen ample ekologiczna |
0,059 |
4 |
Laszka konwencjonalna |
0,069 |
7 |
Glen ample konwencjonalna |
0,086 |
Próbka |
Zawartość antocyjanów w próbce |
Zawartość antocyjanów w badanym materiale na 1g liofilizatu |
Zawartość antocyjanów w świeżej masie próbki (mg/ 100g) |
Laszka ekologiczna (1) |
0,0078596 |
6,29 mg |
101,546 |
Glen ample ekologiczna (2) |
0,0079658 |
7,22 mg |
108,2614 |
Laszka konwencjonalna (4) |
0,0090278 |
6,37 mg |
91,89347 |
Glen ample konwencjonalna (7) |
0,0108332 |
8,67 mg |
105,5587 |
Metoda HPLC
Suma antocyjanów (mg/100g ś.m.) |
|||||
|
cyjanidyna |
malwinidyna |
peonidyna |
pelargonidyna |
SUMA |
Laszka ekologiczna (1) |
4,005321 |
10,164127 |
0,9289448 |
7,4475564 |
22,55 |
Laszka konwencjonalna (4) |
4,112829 |
10,932803 |
1,0829196 |
7,4381130 |
23,57 |
|
|
|
|
|
|
Glen ample ekologiczna (2) |
5,552428 |
9,815450 |
0,8449543 |
8,8254293 |
25,04 |
Glen ample konwencjonalna (7) |
4,713027 |
8,937946 |
0,9167862 |
8,3899494 |
22,96 |
Średnia zawartość antocyjanów (mg/ 100g ś.m.) |
||||
|
cyjanidyna |
malwinidyna |
peonidyna |
pelargonidyna |
Maliny ekologiczne |
4,41 |
9,94 |
1,00 |
7,91 |
Maliny konwencjonalne |
11,12 |
9,99 |
0,89 |
8,14 |
|
|
|
|
|
Laszka |
4,06 |
10,55 |
0,88 |
7,44 |
Glen ample |
5,13 |
9,38 |
0,88 |
8,61 |
Porównanie metod do oznaczania antocyjanów
HPLC |
Metoda kolorymetryczna |
ZALETY |
|
- wysoka czułość i dokładność pomiarów - krótki czas konieczny do przygotowania próbki - powtarzalność czasów retencji - ograniczenie wpływu czynnika ludzkiego na wyniki - łatwa kontrola przepływu - możliwość połączenie ze spektrometrem mas lub NMR (co daje bardzo dobre rezultaty w oznaczaniu śladowych związków)
|
- niski kosz przeprowadzenia pomiaru - duża szybkość wykonywania oznaczeń -możliwość oznaczenia antocyjanów jedynie ilościowo, nie jest wstanie dokonać rozdziału na poszczególne związki oraz ich zidentyfikować
|
WADY |
|
- wysoki koszt urządzenia i jego eksploatacji - konieczność termostatowania kolumny -po analizach dość długi czas mycia kolumny i sprzętu -drogi sprzęt, części zamienne i rozpuszczalniki(tylko specjalne o czystości HPLC) -dobór odpowiednich eluentów (faz ruchomych)jest zależny od rodzajów analizowanych związków (bardzo dobra znajomość struktury chemicznej i budowy analizowanych związków) -drogie kolumny chromatograficzne, które mają określony czas życia - analiza wymaga szczególnego przygotowania próbki (specjalnie dobrane filtry) |
- wymagana jest duża dokładność i precyzyjność przeprowadzającego badanie - możliwość pojawienia się błędów w pomiarach ze względu na jakość i kalibrację sprzętu - nie możliwa do wykonania analiza jakościowa |