Enzymologia  kolokwium 16.04.2011
1.
a) Oblicz stężenie molowe roztworu 15% (w/v) KOH, M KOH = &
b) Do 17,5 ml roztworu 10% NaCl (w/v) dodano 4,1g sacharozy oraz 1 ml 1M EGTA, następnie uzupełniono wodą
do 250ml. Podaj końcowe stężenia molowe składników. M sacharozy= & , M NaCl = &
2.
Oznaczano aktywność aminotransferazy, której frakcja miała objętość 1 ml. Do kuwety o objętości 2 ml dodano
mieszaninę reakcyjną zawierającą odpowiednie składniki oraz 10 ul enzymu. Zmiana absorbancji wyniosła 0,0622
na minutę (dla długości fali równej 340 nm). Zawartość białka wynosiła 4 ug w 10 ul preparatu. Oblicz aktywność
całkowitą oraz aktywność właściwą. Wyniki podaj w katalach.
3.
Wyjaśnij pojęcia:
bilans oczyszczania białka
odchylenie od stanu równowagi
szybkość początkowa reakcji enzymatycznej
4.
a) Nieoczyszczony preparat enzymu ma 20 ml. Aktywność w 10 ul wynosi 100 umol/min/mg białka. Oblicz
aktywność całkowitą.
b) Oczyszczono preparat enzymatyczny uzyskując wydajność 85%. Uzyskana oczyszczona frakcja ma 1 ml
objętości. Oblicz stopień oczyszczenia, jeśli w oczyszczonym preparacie stężenie białka wynosi 68 g/l.
5.
a) Narysuj wykres zmian stężenia substratu i produktu w czasie dla reakcji odwracalnej S <-> P o stałej
równowagi K=0,5. Opisz osie, dobierz skalę.
b) Analizujemy reakcję enzymatyczną według kinetyki Michaelisa-Menten. Narysuj wykres zależności przyrostu
produktu od czasu, zaznaczając krzywe dla różnych początkowych stężeń substratu (maksymalnie 5 krzywych,
w tym jedna dla stężenia wysycającego substratu).
Drugi wykres: stężenie produktu w czasie w obecności inhibitora niewspółzawodniczącego, dla różnych
początkowych stężeń substratu. Zachowaj skalę, opisz osie.
Wypisz wszystkie reakcje, które mogą zachodzić w obecności inhibitora niewspółzawodniczącego.