UNIWERSYTET PRZYRODNICZY
Wydział Medycyny Weterynaryjnej
KATEDRA BIOCHEMII I FIZJOLOGII ZWIERZ
T
Zakład Biochemii
20-033 Lublin, ul. Akademicka 12
tel. [phone]
HYDROLAZY
(amylaza trzustkowa, lipaza trzustkowa)
Zadanie 1
Celem zadania jest oznaczanie aktywności alfa amylazy trzustkowej w
wyciągu z trzustki.
Wykonanie oznaczenia
Do probówki odmierzyć 5 cm3 0,5% roztworu skrobi i 1 cm3 wyciągu
trzustki. Probówkę wstawi do łaz
ni wodnej o temp. 37oC.
Po czasach podanych w tabelce wykonać oznaczenia, wyniki zanotować:
a. próbę redukcyjną z odczynnikiem Fehlinga na obecność cukrowca.
W tym celu odmierzyć 0,5 cm3 roztworu Fehling I i Fehling II oraz
0,5 cm3 inkubatu. Próbę ogrzać parę minut nad palnikiem.
b. próbę z 0,001 M J2 w KJ na obecność skrobi.
W tym celu odmierzyć 0,5 cm3 inkubatu dodać 10 kropli roztworu J2
w KJ.
Nr Czas inkubacji
Próba redukcyjna Próba z jodem
próby [min.]
1 0
2 5
3 10
4 20
5 30
Zadanie 2
Celem zadania jest oznaczanie aktywności lipazy trzustkowej w wy-
ciągu z trzustki.
Wykonanie oznaczenia
Do 15 cm3 oliwy dodać 1 cm3 0,1 M Na2CO3 i mocno wstrząsnąć. Otrzy-
muje się emulsję oliwy w wodzie. Do 3 probówek odmierzyć podane w tabe-
li ilości wyciągu trzustki, wody, emulsji oliwy i \
ółci.
Wyciąg Emulsja 0,05M
Nr Woda śółć
trzustki oliwy NaOH
próby w c 3 w cm3
w cm3 w cm3 w cm3
1 2 1 3 0
2 2 0,75 3 0,25
3 - 2,75 3 0,25
Próba nr 1  próba zerowa, próba nr 3  kontrolna do próby nr 2.
09-10-16 www.biochfiz.up.lublin.pl Wersja 1.16.10.09
- 1 z 2 -
UNIWERSYTET PRZYRODNICZY
Wydział Medycyny Weterynaryjnej
KATEDRA BIOCHEMII I FIZJOLOGII ZWIERZ
T
Zakład Biochemii
20-033 Lublin, ul. Akademicka 12
tel. [phone]
Zawartość w probówkach inkubować w 37oC przez 60 min., wstrząsając
probówki co 5 min. Po zakończeniu inkubacji roztwory przelać do małych
kolbek sto\
kowych i miareczkować 0,05 M NaOH do trwałego ró\
owego za-
barwienia.
Wyniki wpisać do tabeli. Wyjaśnić.
Notatki
09-10-16 www.biochfiz.up.lublin.pl Wersja 1.16.10.09
- 2 z 2 -