Katarzyna Cielek

206064

Sprawozdanie z zajęć laboratoryjnych z mikrobiologii

Temat 8: Analiza mikrobiologiczna wody.

1. Cel ćwiczenia

Celem ćwiczenia jest poznanie metody oznaczania bakterii grupy coli metodą filtrów membranowych. Kolejnym punktem jest poznanie metody oznaczania liczby bakterii psychrofilnych i mezofilnych oraz dowiedzieć się jakie mikroorganizmy uważane są bakterie wskaźnikowe stanu sanitarnego wody, a także jaki skład powinna mieć woda, którą pijemy. Należy także dowiedzieć się w jaki sposób oznacza się liczebność organizmów wskaźnikowych w wodzie.

1. Opis ćwiczenia

   • Oznaczanie bakterii grupy coli metodą filtrów membranowych (FM). –

Zadanie 1

1. Zmontować aparat filtracyjny. W tym celu lejek umieścić w kolbie ssawkowej, połączonej z pompą próżniową. Przy zamkniętym kranie aparatu nałożyć pincetą (wyjałowioną przez opalanie) filtr membranowy na porowatą płytkę, błyszczącą względnie kratkowaną stroną do góry,

2. Wlać odpowiednią ilość badanej wody do lejka, otworzyć kran i przefiltrować próbkę,

3. Po przefiltrowaniu, ściany lejka spłukać dokładnie jałową wodą buforowaną,

4. Zamknąć kran i wyjałowioną pincetą przenieść filtr membranowy na powierzchnię podłoża agarowego Endo FM. Filtr powinien być położony do góry zawiesiną bakteryjną tak, aby nie było pęcherzyków powietrza pomiędzy filtrem a podłożem,

5. Płytki Petriego z filtrami umieścić w cieplarce dnem ku górze i inkubować w temp. 37^oC w ciągu 20 godzin.

   • Oznaczanie liczby bakterii psychrofilnych i mezofilnych. –

Zadanie 4

1. Oznaczanie wykonać metodą płytkową Kocha, stosując posiew wgłębny na podłoże agarowe odżywcze. Posiewy wody wodociągowej wykonać z prób nierozcieńczonych (1 cm³) oraz z rozcieńczenia 10^-1 (1 cm³);

2. Inkubację bakterii psychrofilnych prowadzić w temp. 20^oC w ciągu 72 godzin, a mezofilnych – w temp. 37^oC przez 24 h;

1. Wyniki

3.1.Wyniki - Oznaczanie bakterii grupy coli metodą filtrów membranowych (FM).

	Ilość bakterii na podłożu Endo	Ilość bakterii na podłożu SL
Woda z kranu	6	0
Woda podziemna	1	10

Tabela1. Zestawienie danych oznaczania bakterii.

3.2.Wyniki - Oznaczanie liczby bakterii psychrofilnych i mezofilnych.

	Ilość bakterii w temp 20 ^oC	Ilość bakterii w temp 37 ^oC
Woda mineralna	150	0
Woda z kranu	0	0

Tabela2. Zestawienie wyników wody mineralnej oraz wody z kranu.

Woda ze studni	10^-1	10^-2	10^-3
Temp. 20 ^oC	96	62	70
Temp. 37 ^oC	155	32	79

Tabela3. Zestawienie wyników rozcieńczonej wody ze studni.

W temp. 20 ^oC (960+6200+70000)/3=25720= 2,6 x 10⁴ jtk/cm³

W temp. 37 ^oC (1550+3200+79000)/3= 27917= 2,7 x 10⁴ jtk/cm³

4.Wnioski

4.1. Oznaczania bakterii grupy coli metodą filtrów membranowych (FM). Na podłożu Endo zostały wykryte bakterie grupy coli zarówno w wodzie z kranu, jak i w wodzie podziemnej, natomiast w przypadku podłoża SL bakterie z grupy coli zostały wykryte jedynie w wodzie podziemnej. Do liczenia mikroorganizmów należało wybrać filtry, na których jest od 20 do 80 kolonii typowych, jednak w badanych próbach tych kolonii jest zdecydowanie mniej.

4.2. W oznaczaniu liczby bakterii psychrofilnych i mezofilnych jedynie w wodzie mineralnej wykryto bakterie psychrofilne, co oznacza, że znajdują się tam nie chorobotwórcze bakterie wodne. Bakterii mezofilnych nie wykryto, podobnie jak w przypadku wody z kranu. W wodzie pobranej ze studni wykryto zarówno znaczną ilość bakterii psychrofilnych, jak i mezofilnych przy czym liczba mezofilnych jest znacznie większa od psychrofilnych, co potwierdza przypuszczenia, że ta woda jest dużo bardziej zanieczyszczona od wód z kranu i mineralnej.