I. Część teoretyczna
II. Część doświadczalna
a) Oznaczanie zawartości laktozy w mleku metodą Bertranda
Przebieg ćwiczenia
Odważono w zlewce 25,349 g mleka i przelano je do kolby miarowej o objętości
500 cm3.
Zlewkę kilkakrotnie przepłukano, a popłuczki dolano do mleka w kolbie.
Mleko rozcieńczono do objętości ok 400 cm3.
Dodano 5 cm3 roztworu Carreza I, wymieszano. Następnie dodano 5 cm3 roztworu Carreza II i powtórnie wymieszano.
Roztwór w kolbie uzupełniono do objętości 500 cm3 woda destylowaną, wymieszano
i odstawiono na 30 minut w celu wyklarowania się.
Z otrzymanego nadsączu pobrano 20 cm3 roztworu i przeniesiono do kolby stożkowej o pojemności 250 cm3.
Za pomocą cylindra miarowego dodano 20 cm3 roztworu Bertranda I i 20 cm3 roztworu Bertranda II, całość wymieszano.
Doprowadzono do wrzenia i ogrzewano przez 3 minuty.
Dodano 30 cm3 wody destylowanej, a następnie roztwór schłodzono w strumieniu zimnej wody.
Wydzielony osad tlenku miedzi (I) odsączono na lejku ze spiekiem szklanym pod próżnią. Osad przemywano 50 cm3 wody destylowanej.
Osad tlenku miedzi (I) rozpuszczono roztworem Bertranda III (ok. 25 cm3).
Otrzymany roztwór miareczkowano 0,02- molowym roztworem nadmanganianu potasu, aż do momentu uzyskania trwałego słabo różowego zabarwienia.
Punkty 6-12 powtórzono, w celu wykonania drugiej próby.
Obliczenia
Na podstawie średniej objętości zużytego KMnO4 otrzymanej z miareczkowej nie różniących się więcej niż 0,2 cm3 obliczamy ilość zredukowanej miedzi korzystając ze wzoru:
MCu= 6,354 · a
MCu - ilość zredukowanej miedzi w mg
6,354 - ilość mg miedzi odpowiadająca 1 cm3 0,02 M roztworu KMnO4
a - średnia objętość zużytego do miareczkowania 0,02 M roztworu KMnO4
Ilość KMnO4 zużyte na pierwsze miareczkowanie [cm3] | 56 |
---|---|
Ilość KMnO4 zużyte na drugie miareczkowanie [cm3] | 55,25 |
Średnia ilość KMnO4 zużyta do miareczkowania [cm3] |
55,625 |
MCu= 6,354 · 55,625
MCu= 353,44 mg
Obliczenie zawartości laktozy w mleku:
mmleka= 25,349 g = 25349 mg
mlaktozy= 353,44 mg
$$\mathbf{\%}_{\mathbf{\text{\ laktozy}}}\mathbf{= \ }\frac{\mathbf{m}_{\mathbf{\text{laktozy}}}}{\mathbf{m}_{\mathbf{\text{mleka}}}}\mathbf{\ }\mathbf{}\mathbf{\ 100\%}$$
$\mathbf{\%}_{\mathbf{\text{\ laktozy}}}\mathbf{= \ }\frac{\mathbf{353,44}}{\mathbf{25349}}\mathbf{\ }\mathbf{}\mathbf{\ 100\%}$= 1,39 %
b) Metoda Schoorla- Luffa
Przebieg ćwiczenia
Z nadsączu otrzymanego w pierwszej części ćwiczenia pobrano 10 cm3 roztworu
i przeniesiono do kolby stożkowej ze szlifem o pojemności 250 mc3.
Do roztworu dodano 25 cm3 roztworu Luffa i dopełniono woda destylowaną
do 50 cm3.
Całość ogrzewano na chłodnicy zwrotnej przez 10 minut w temperaturze łagodnego wrzenia.
Następnie zawartość kolby schłodzono i dodano 3 g jodku potasu.
Do tak przygotowanego roztworu dodawano 25% kwasu siarkowego, aż do momentu ustania pienienia.
Miareczkowano 0,1 molowym roztworem tiosiarczanu sodu.
Pod koniec miareczkowania (gdy roztwór miał barwę piaskową), dodano skrobi.
Koniec miareczkowania nastąpił w momencie zmiany barwy roztworu z granatowej na kremową.
W sposób analogiczny wykonano ślepą próbę (zamiast cukru dodano wodę destylowaną).
Obliczenia
Objętość tiosiarczanu sodu dla przeprowadzonych prób [cm3] | Próba 1: 22,6 | Średnia dla dwóch prób: 23,0 |
---|---|---|
Próba 2: 23,4 | ||
Objętość tiosiarczanu sodu dla ślepej próby [cm3] | 28,8 |
Na podstawie uzyskanych wyników z próby ślepej oraz właściwej obliczamy objętość potrzebną do odczytu ilości laktozy:
Vdo odczytu z tabeli=Vproba slepa−Vproba badana
Vdo odczytu z tabeli=28, 8 23, 0 = 5, 8 [cm3] 6 [cm3]
Obliczamy procentową zawartość laktozy w mleku:
mlaktozy= 22,1 mg
mmleka= 25,349 g= 25349 mg
$$\frac{\mathbf{22,1}}{\mathbf{25349}}\mathbf{}\mathbf{100}\mathbf{\% =}\mathbf{0,09}\mathbf{\%\ }$$