Kierunek/ specjalność: BiB Nr grupy: 1	Imię i nazwisko:	Zaliczenie:
Data wykonania ćwiczenia: 26.03.2015	Tytuł ćwiczenia: Otrzymywanie protoplastów z liści sałaty.	Data oddania sprawozdania: 16.04.2015

WYKONANIE:

+ wycięto z liści sałaty fragmenty (ok. 30) o wymiarach mniej więcej 2 x 2 mm, które przeniesiono do probówki zawierającej 9.5 ml 13% r-ru sorbitolu + probówkę inkubowano w łaźni wodnej w temperaturze 37oC przez 5 minut, tak by fragmenty liścia sałaty wyrównały potencjał osmotyczny z r-rem sorbitolu + następnie do probówki dodano 0.5ml r-ru hydrolaz glikozydowych (preparat zawierający pektynazy, celulazy i inne enzymy trawiące ścianę komórkową komórki roślinnej) + probówkę ponownie umieszczono w łaźni wodnej na 20min, od czasu do czasu wstrząsano zawartość probówki + r-r z probówki przesączono przez gazę, którą przepłukano po tym 2ml 13% r-ru sorbitolu + przefiltrowaną zawiesinę przeniesiono do naczynek wirówkowych i odwirowano przy 5000 obrotach na minutę przez 5 minut + nasącz wylano, natomiast peletkę protoplastów, która zebrała się na dnie probówki zawieszono w ok. 0.1ml 21% r-ru sacharozy, który pozwolił uzyskać równowagę osmotyczną + przygotowano preparat mikroskopowy z tak otrzymanego r-ru protoplastów z liści sałaty, który obserwowano pod mikroskopem przy powiększeniu 40x

OBSERWACJE:

W polu widzenia zaobserwowano kilka protoplastów miały one kształt kulisty, oraz kolor zielony.

WNIOSKI:

Udało się wyizolować żywe protoplasty rożnej wielkości.