Zestaw 1.

1) co to jest fagocytoza? i jakie komórki biorą w niej udział?

-proces wieloetapowy mający na celu uśmiercenie bakterii i innych czynników zakaźnych

-jest głównym mechanizmem usuwającym drobnoustroje z organizmu

- szczególna rola w obronie przeciwko bakteriom zewnątrzkomórkowym

-rodzaj endocytozy spotykany u komórek i organizmów jednokomórkowych. Polega na pobraniu ze środowiska pokarmów stałych, odizolowaniu od cytozolu poprzez utworzenie wodniczki pokarmowej (lub innego tworu o podobnym przeznaczeniu, np. heterofagocyty) i trawieniu z udziałem lizosomów. W tym procesie nie następuje utrata błony komórkowej.

Komórki: neutrofil, eozyno fil, bazofil, monocyty, makrofag, kom. Dendrytyczna.

2) na czym polega dojrzewanie komórek T w grasicy?

W późniejszym okresie płodowym oraz po urodzeniu prekursory limf T docierają do grasicy ze szpiku. W trakcie dojrzewania dochodzi do kilku procesów selekcji, w ich następstwie dochodzi do eliminacji ponad 95% dojrzewających kom.

Większość limfocytów T rozwija się w grasicy, stąd też pochodzi ich nazwa grasicozależne. Grasica jest narządem, w którym dojrzewające limfocyty T (tymocyty) przechodzą selekcję grasiczą, mającą wyeliminować autoreaktywne limfocyty, mogące uszkodzić własne tkanki. Prawdą jest to dla większości limfocytów, ale występujące w organizmie niewielkie ilości limfocytów T γδ przechodzą słabo zbadane procesy selekcji pozagrasiczej, umiejscowione w skórze oraz błonach śluzowych jelit i jamy otrzewnej.

Najpierw selekcja następuje w korze grasicy. Tam też z zaniedbania następuje śmierć. Limf T które przeszły selekcję pozytywną wędrują do rdzenia.

3) budowa cząsteczek IgM. <= przeciwciało, immunoglobulina

- forma pentametru

-wolna, nie związana z antygenem przypomina płatek śniegu, związana z antygenem - kształt kraba

- z łańcuchów lekkich i ciężkich, a ponieważ jest polimerem to ma dodatkowy łańcuch łączący J (białko z 8 reszt cysteinowych), występują dodatkowo odcinki ogonowe

-jest też niewielka część IgM w surowicy, które są monomerami

4) gdzie się znajdują MHC i jaką pełnią rolę w odpowiedzi immunologiczej.
- MHC1 występują na powierzchni wszystkich kom. jądrzastych, w niewielkich ilościach również na erytrocytach

-MHC2 występują głównie na limf B, makrofagach, kom dendrytycznych, kom nabłonkowych grasicy, u człowieka również na kom śródbłonka naczyń

Funkcje:

- wiązanie i prezentacja antygenów limf T

- różnice w zakresie MHC matki i dziecka sprzyjają rozwojowi dziecka i utrzymaniu ciąży

- uczestniczą w tolerancji transplantacyjnej po jej przeszczepieniu, np. rozpuszczalne MHC dawcy mogą blokować rozpoznające je przeciwciała i limf T, a nawet indukować ich apoptozę

5) jakie są zasady immunoelektroforezy i do czego służy ta metoda?

Immunoelektroforeza- metoda rozdziału i identyfikacji rozpuszczalnych antygenów - białek w żelu, połączenie elektroforezy i immunodyfuzji; po elektroforezie białek podaje się do żelu przeciwciała, które dyfundują bocznie w kierunku antygenu (białka); w miejscu połączenia białka ze swoistym dla niego przeciwciałem następuje precypitacja (wytrącenie) kompleksu antygen-przeciwciało w postaci łuku precypitacyjnego, co pozwala na ocenę charakteru antygenu.

- wykorzystuje się pole elektryczne do rozdziału białek

-IE przeciwbieżna -pH buforu jest tak dobrane aby Ab miały (+), a Ag (-), po przepuszczeniu prądu wędrują w polu elektrycznym w kierunku odpowiadającym ładunkowi, w momencie spotkania następuje precypitacja

-IE dwukierunkowa - najpierw rozdzielane są elektroforetycznie białka, potem precypitacja w żelu zawierającym surowicę odpornościową Ab

-IE rakietowa - ilość Ag określana jest na podstawie reakcji z Ab zawartym w żelu, wysokość rakiety odpowiada ilości antygenów w próbce

-IE jednokierunkowa - surowice odpornościowe są wprowadzone do wyciętego w agarze rowka, następuje immunodyfuzja bierna i tworzenie kompleksów immunologicznych

6) budowa antygenowa i coś z salmonella (???!!!)

Antygen- może być każda substancja, która wykazuje dwie cechy: immunogenność, czyli zdolność wzbudzenia przeciwko sobie odpowiedzi odpornościowej swoistej, oraz antygenowość, czyli zdolność do reagowania z przeciwciałami oraz TCR.

Antygeny można także podzielić ze względu na liczbę epitopów na pojedynczej cząsteczce antygenu rozpoznawanych przez dane przeciwciało. Są to:

• antygeny monowalentne, zawierające tylko jeden epitop i wiążące się z pojedynczym paratopem. Zawsze monowalentne są hapteny.

• antygeny poliwalentne, wiążące się z kilkoma paratopami jednocześnie. Ten typ antygenów może tworzyć duże, wytrącające się w tkankach kompleksy immunologiczne i być odpowiedzialny za pewne stany patologiczne.

Antygeny mogą być:

-ciągłe - aminokwasy antygenu białkowego kontaktujące się z przeciwciałem są zawarte w jednym odcinku łańcucha białkowego

- nieciągłe - aminokwasy antygenu białkowego kontaktujące się z przeciwciałem są oddalone od siebie w łańcuchu białkowym

Antygeny Salmonelli można wykryć metodą aglutynacji szkiełkowej.

Surowice do aglutynacji pałeczek Salmonella w kropli są wykonane

z surowic królików szczepionych inaktywowanymi szczepami

bakterii i wymagają licznych absorpcji w celu uzyskania wybranych

przeciwciał. Są one kontrolowane z duzymi zestawami szczepów i

preparowane w takich rozcieńczeniach, które pozwalają na

uzyskanie czytelnego odczynu w krótkim czasie.

Identyfikacja szczepu polega na ustaleniu struktury antygenowej

badanego szczepu. Opiera się na wykrywaniu antygenów

somatycznych „O” i antygenów rzęskowych „H”.

Zestaw 2.

1.Co to jest zapalenie? i opisać jego etapy.

Zapalenie - natychmiastowa, miejscowa reakcja obronna, której celem jest wyeliminowanie czynniki uszkadzającego oraz martwych kom (tkanek), a następnie naprawa w miejscu gdzie doszło do uszkodzenia. W ostrym zapaleniu występują zmiany naczyniowe, a leukocyty przechodzą z łożyska naczyniowego do miejsca uszkodzenia

-przedostanie się bakterii do wnętrza organizmu indukuje ostrą reakcję zapalną poprzez aktywację receptorów PRR -TLR, NLR, zmiataczy, dla składników dopełniacza

-pobudzenie receptorów indukuje uwalnianie mediatorów prozapalnych - chemokin, defensyn, cytokin

-przedostanie się drobnoustrojów poza błonę podstawną indukuje aktywację układu dopełniacza

- dochodzi do bezpośredniego niszczenia drobnoustrojów, jak i przyciągnięcia granulocytów, makrofagów i kom. dendrytycznych do miejsca objętego zapaleniem

- fragmenty dopełniacza spłaszczając drobnoustroje ułatwiają fagocytozę, aktywowane makrofagi wytwarzają opsoniny, makrofagi i neutrofile wytwarzają hemokiny i cytokiny

-przerwanie zapalenia - wygaszenie przez inhibitory

2. jak i gdzie powstają komórki B?

Limfocyty B powstają wraz z limf T ze wspólnej kom progenitorowej limfopoezy. Limf B wytwarzane są głównie w szpiku.

-limf pre-pro-B- pierwsze kom z których dojrzewają limf B => limf pro-B => limf pre BI => limf pre BII => niedojrzałe limf B => dojrzałe limf B

-niedojrzałe limf B opuszczają szpik i wędrują do krwioobiegu skąd trafiają do obwodowych narządów limfatycznych

- dojrzałe limf B podlegają selekcji pozytywnej i negatywnej ( usunięcie limf autoreaktywnych)

3. opisz ilościowe badanie serologiczne- jego zasada??????????????

4. co to są receptory TLR  i gdzie występują?

TLR - receptory odpowiedzialne za przesyłanie sygnałów.

- należą do PRRs

-unikalne jako receptory rozpoznające PAMPs

-ich zadaniem jest natychmiastowe rozpoznanie czynnika patogennego

-odgrywają główną rolę w inicjowaniu odp nieswoistej i przyczyniają się do zainicjowania odp swoistej

-wiele po związaniu PAMP stymuluje transkrypcję i translację prozapalnych cytokin i chemokin

Występują na:

-w skórze, błonie śluzowej

- powierzchni komórki -1,2,4,5,6

- błonach pęcherzyków endocytarnych - 3,7,8,9

5. Jaki jest mechanizm zabijania bakterii przez tlen?
Fagocytoza drobnoustrojów wywołuje w kom żernych w ciągu kliku sekund pobudzenie procesów oddechowych i powstanie reaktywnych utleniaczy o właściwościach toksycznych, do których należą toksyczne związki tlenowe jak i utlenowane halogenki. Większość reaktywnych związków tlenowych działa w fagolizosomie , natomiast reaktywne związki tlenowe, które mogą się częściowo wydostać z fagolizosomu są potencjalnie toksyczne dla samej kom żernej.

-tlenek azotu NO

-anion ponadtlenkowy

-Nadtlenek wodoru

-kw podchlorawy

6) immunodyfuzja bierna cel i sposób. Która to bierna?

-Immunodyfuzja to typ odczynu precypitacyjnego dla antygenów oraz przeciwciał (immunoglobulin) zachodzący w środowisku stałym

- pojedyncza immunodyfuzja probówkowa: odczyn jakościowy stosowany w celu wykrywania określonych antygenów lub swoistych przeciwciał. Jeden z reagentów - przeciwciało - unieruchomiony jest w żelu, w głąb którego dyfunduje antygen. W strefach ekwiwalencji, jeśli odczyn reakcji będzie dodatni, pojawią się pierścienie precypitacyjne.

- podwójna immunodyfuzja probówkowa: odczyn jakościowy stosowany w celach podobnych jak powyższa metoda. Przeciwciała zatopione są w żelu. Od roztworu antygenu warstwa ta oddzielona jest dodatkową, obojętną warstwą żelu. Oba reagenty - przeciwciała jak i antygeny - dyfundują w głąb warstwy obojętnej. W strefach ekwiwalencji, jeśli odczyn reakcji jest dodatni, powstaną pierścienie precypitacyjne.

- pojedyncza immunodyfuzja płytkowa: odczyn ilościowy, stosowany w celu określenia stężeń interesujących nas białek zawartych w surowicy. Przeciwciała związane są w żelu, a ich stężenie w każdym punkcie płytki jest stałe. W otworach wydrążonych w podłożu umieszcza się roztwory badanego białka (antygenu), które podczas inkubacji swobodnie dyfundują w głąb żelu. W strefie przyzbiornikowej stężenie antygenu jest duże, a wraz z trwającą dyfuzją będzie malało, wskutek wiązania cząsteczek antygenu przez przeciwciała znajdujące się w podłożu. W strefie ekwiwalencji powstaną pierścienie precypitacyjne, których średnica jest wprost proporcjonalna do stężenia danego antygenu.

- podwójna immunodyfuzja płytkowa: metoda stosowana w celu określenia stopnia podobieństwa antygenowego badanych białek. Próba przeprowadzana jest w żelu, w którym umiejscawia się roztwór antygenu i surowicy (po przeciwległych stronach). W zależności od potrzeb badania można badać różne surowice i jeden antygen, lub różne antygeny z jedną surowicą. Oba reagenty mogą swobodnie dyfundować w głąb żelu. W strefach ekwiwalencji reagentów pojawią się charakterystyczne łuki precypitacyjne, których kształt pozwala na interpretacje podobieństwa antygenowego badanych białek. Jeżeli linie precypitacyjne łączą się łukowato to białka są identyczne antygenowo, jeżeli krzyżują się to są one całkowicie różne.

Cel: badanie czystości immunologicznej preparatów, badanie czystości żywności.

---