INŻ. GENETYCZNA 2009 TERMIN 2
HisTaq w białku rekombinantowym.
występuje z nim w formie koniugatu
nie można wykrywać western blotem
Można oczyszczać metodą powinowadztwa chromatografii
Wykorzystywany do detekcji
Yac
można stosować do pozycyjnego klonowania
ma postać liniową
zawiera marker selekcyjny oporności na antybiotyki
zawiera marker komplementujący mutacje auksotroficzne
Polimerazy RNA
do syntezy sond RNA
do amplifikacji RNA
wymagają do działania promotorów
wymagają do działania oligonukleotydów
Amplifikacja RNA
transkrypcja In vitro
polimeraza RNA T3
cDNA
Nie mając ligazy nie możemy przeprowadzić eksperymentu
Inverse PCR
DD PCR
RACE
Tail PCR
Cięcia restrykcyjnego wymagają metody:
Tail PCR
Inverce PCR
Vectorette
cDNA AFLP
Wewnątrzcząsteczkowa ligacja:
Inverse PCR
DD PCR
..
.. tu wymieniał różne
Synteza cDNA w metodach: -> też różne wymienione w tym było primer extension
Geny wirulencji
mają białka potrzebne do procesu transformacji
odpowiadają za transfer koniugacyjny
są przenoszone do jądra
..
Oligonukleotydy Dna
mogą być wykorzystywane jako adaptery i linkery
mogą być zdegenerowane
na końcu 3' znakowane nukleotydami selekcyjnymi ( albo to mogło być w innym pytaniu)
niepełne dopasowanie oligonukleotydu do matrycy uniemożliwia dalszą syntezę
Metoda Maxama- Gilberta
chemiczna degradacja końców DNA
nie trzeba stosować rozdziału w żelu
syntetyzowane są fragmenty DNA
..
Directional forcet cloning
transgen można wstawić w wybrane miejsce w genomie
Mikromacierze
syntetyzowane In situ metodą fotolitografii
kwas nukleinowy na podłozu stałym
jednorazowo można badać kilkaset próbek
tożsamość wprowadzona do macierzy nieznanana
14.CDNA AFLP
a) mniejsza czułość niż hybrydyzacja + /- i różnicowa
b) DNA ma postać dwuniciową
c) dwustopniowa amplifikacja
(d) tu coś innego niż na 1szym terminie)
15. RACE
a) technika szybkiej amplifikacji końców chromosomów
b) matryca to cDNA
c) 2' i 5 `
(d) tez cos innego niż wczesniej)
16. System dwuhybrydowy u drożdzy:
a) bazuje na aktywności genu reporterowego którego ekspresję można wzbudzić przez połączenie się białek przynęty i zdobyczy
b) umożliwia klonowanie białek oddziałujących ze znanymi białkami
c) bazuje na białku fuzyjnym powstałym z DBD stanowiącym miejsce wiązania DNA a przynętą
d) Bazuje na białku fuzyjnym powstałym z AD i zdobyczy
17. Diferential Display
18. Fragment Klenowa
a) nie ma funkcji korekcyjnej
b) wykorzystywany do Nick translation
c) znakowanie schowanych końców 3'
19.Real time PCR
a) mówi o wyjściowej liczbie kopii wziętej do reakcji
b) nr cyklu w którym wartość fluorescencji osiaga progową
c) coś o stężeniu matrycy
d) mówi o całkowitym wysyceniu Dna sondą taqman
20. Synteza CDNA pełnej długości:
a) odwrotna transkryptaza, DNAzaI, fragm. Klenowa, ligaza
b) odwrotna transkryptaza, RNAzaH, fragm. Klenowa, ligaza
c) odwrotna transkryptaza, nukleaza S1, fragm. Klenowa, ligaza
d) odwrotna transkryptaza, hydroliza alkaliczna, fragm. Klenowa
21. Biblioteki linking
a) enzym gęstotnący, ligacja, enzym rzadkotnący
b) miejsca otaczające sekwencje enzymu radzkotnącego
c) ominięcie sekwencji nieklonowalnych i powtzralnych
22. do Inverce PRC uzywamy starterów:
a) o sekwencji znanej i nieznanej
b) o sekwencji znanej i adaptora
c) o sekwencji znanej i zdegradowanej
d) sekwencji znanej i jakiejś
Chyba było pyt o Homopolimer tailing i może o kinaze polinukleotydową