SKŁAD KW.NUKL.
KWASY NUKL.-są wielkoczasteczk.zw,zbudow.z mniejszych jednostek zwanych nukleotydami,które dają się hydrolit.rozłożyc na kw.ortofosforowy(V)i nukleozydy,a te ost.na cukier(pentoze)oraz zasady purynowe i pirymidynowe.Zależnie od reszty cukrowej rozrożniamy:kw.rybonukl.(RNA),zawier,reszte rybozy i kw.deoksyrybonukl.(DNA)zaw.reszte2-deoksyrybozy. Kw.RNA-wyst.zarówno w jądrze jak i w cytopl.(gł,w mikrosom)-uczestn.w syntezie białek,Kw.DNA-gł.w jądrze,ponadto w mitoch i plastydach.-stanowia mat.genet.Są odporne na czynniki hydrolit.
ROZKŁAD KW.NUKL:całkowity rozkł.k.nukl.może zach.na drodze chem,pod dział,kw i ługów,bądź tez na dr.enzymatycznej pod wpł.odpow.enzymów:nukleodepolimeraz,nukleotydaz i nukleozydaz.PROCES HYDROLITYCZN.ROZKŁ.KW.NUK.przeb.RNA i DNA2x~nukleotydy3x~H3PO4 i H3PO4 i nukleozydy3x~ryboza i 2-deoksyryb.i zasady purynowe:(adenina,guanina)zasady pirymidynowe:cytozyna>uracyl,>5-metylocytozyna,tymina.
ZASADY PURYNOWE:w produktach hydrolizy k.nukl. wyst.2pochod.purynowych adeniny i guaniny-ich prod.przemian w procesach deaminacji(odszczepienia grup aminowych z rownoczesnym wprowadzeniem w ich miejsce grup OH).Są nimi hipoksantyna i ksantyna.Sa one przejściowymi zw.z tworzeniu się kw.moczowego,który można uważać za prod.utleniania tych zw.Końcowym produktem utleniania kw,nukl.i zasad purynowych z org,czł,jest kw.moczowy.
ZASADY PIRYMIDYNOWE:których reszty wchodzą w skład kw.nuk,są hydroksylowymi lub aminowymi pochodn.pirymidyny.nalez.do nich cytozyna,uracylskładnikRNA,oraz 5-metylocytozyna i tymina.
NUKLEOZYDY:Są N-glikozydami zasad azotowych(pirymid,i purynowych)z pentozą.nazwy nukl.tworzy się w zależn.od rodzaju wyst.w nich reszt zasad azotowych:jeśli w sklad nukl.wch reszty zasad purynowych wowczas koncowka -ina zmienia się na -ozyna(np.adenozyna)a jeśli w sklad wchodz.reszty zasad pirymidynowych mają koncow.-ydyna np.(nukl,zawier,resztę cytozyny naz się,cytydyną).w nazwach nukl.zawier.reszte deoksyrybozy daje się przedrostek deoksy- np.(deoksytydyna)
NUKLEOTYDY:Są estrami kw,ortofosforow.i nukleozydów.Reszta kw.orto.zwiaz.jest estrowo z jedna z grOHreszty pentozy.Nazwy tych zw urabia się od nazw nukleozydów,np.adenozyno5`-fosforan(kwas adenylowy).W języku potocz.zw.te nazywa się kwasami.Wiazania miedzy resztami fosforanowymi w nukleozydodi- i nukleozydotrifosforanach nazyw są WYSOKOENERGETYCZNYMI,gdyz w wyniku ich htdrolizy wydziela sie2-3x wiecej en.niż w przyp.rozpadu innego typu wiazania.
POLINUKLEOTYDY;Kw.nukl.sa wielkoczast.polinukleotydami,w których poszczególne mononukleotydy powiaz są ze soba w długie niciowate łancuchy za pomoca wiązań typu diestrowego.W łańc.polinukleotydowych zwykle wyst tzry zasady pirymidynowe:uracyl,tymina i cytozyna.
KWASOWA HYDROLIZA KW.NUKL.
WYKRYWANIE PENTOZ(obecność cukrowca)reakcja BIALA;pentozu podczas ogrzew ze stęż.HCl ulegaja odwodnieniu i cyklizacji do aldechydu 2-furylowego,który z orcyną i jonami Fe3+tworzy kompleks o trwałej ziel.barwie.W celu odroznienia obu pentoz od siebie(rybozy od 20deoksyrybozy)przeprowadza się reakcję DISCHEGO.Reak.ta polega na tworz.w środ,kwaś.przez 2-deoksyrybozę z difenyloaminą produktu kondensacji o barwie fiołkowej.
WYKRYWANIE ZASAD PURYNOWYCH I PIRYMIDYNOWYCH:
WYTRACANIE ZASAD PURYNOWYCH:w środow.wodosiarczanu(VI)sodu kationy miedzi Cu2+ uleg.reduk.do kationówCu+,które wytrącają żółto-biały osad nierozpuszcalnych soli miedzi(I)zasad purynowych.
WYTRĄCANIE ZASAD PURYNOWYCH I PIRYMIDYNOWYCH:Zarówno zasady purynowe jak i pirymidynowe tworzą sole z jonami metali.Sole srebrowe zasad puryn.w środ.kwaś.wypadają w postaci krystalicznej.Natomiast sole srebrowe zasad pirymid.w tych warunk.nie wytracaja się i można je odzyskaż w stanie krystalicz.dopiero po zalkalizowaniu.
WYKRYWANIE KWASU ORTOFOSFOROWEGO(V):-Jony ortofosforowe w środ kwaś.reag. z molibdenianem(VI)amonu.W wyniku reakcji tw.się sól-fosforomolibdenian amonu o zabarwieniu żółtym.Jeśli sól potraktuje się reduktorem to nast.,redukcja molibdenu do niższych tlenków molib.z wytworz.błękitu molibdenowego.-reak,ta stanowi podstawę ilościowego oznaczania fosforu w materiale biologicz.
ANALIZA ILOŚCIOWA KW.NUKLEINOWYCH:
Chemiczne metody oznaczania kw.nukleinowych polegają na okresleniu ilości;a)fosforu,b)łacznej zawart.obu pentoz lub kazdej z nich oddziel.c)zasad azotowych-purynow,i pirymidynowych.*Kontrola czystości handlowego wzorca RNA(wyznaczenie stos,azotu do fosforu(N/P)kt.winien wynosic1,6do1,7.Wzorzec RNA nie powinien zawier,białka i DNA).*Oznaczanie rybozy w RNAmetoda orcynowa(Metoda ta jest oparta na reakcji barwnej pentoz.Jest to reak,BIALA,najczulsza próba i dlatego stosow.jest do ilościowego oznaczania RNA.Reakcję z orcyną uczula się przez dodanie małych ilości FeCl3)*Oznaczenie zawart.DNA metoda Dischego(podstawa tej metody jest reakcja kondensacji2-deoksyrybozy z difenyloaminą,w wyniku ktorej tworzy się produkt o barwie niebieskiej)*Oznaczenie fosforuw hydrolizacie RNA(Podstawą ilosciowego oznacz.jest reakcja jonów fosforanowych z molibdenianem amonowym)*Oznaczanie zawart,białka metodą Lowry`ego(metoda ta opiera się na dwóch reakcjach,kt,efektem koncow.jest końcowa barwa roztworu białka:A)reak.biuretowej białkaz jonami miedzi w środ.alkalicznym oraz,B)redukcji odczynnika fosforomolibdeno-fosforowolframowego pzrezz obecne w białku aminokwasy aromatyczne.