CCF20121201006

Ćwiczenie 11

Temat: Witaminy - reakcje barwne. Ilościowe oznaczanie kwasu askorbinowego w materiale biologicznym.

1 .Ilościowe oznaczanie witaminy C w liściach kapusty

Zasada: Metoda oznaczania oparta jest na wykorzystaniu własności redukujących kwasu askorbinowego. Ilość kwasu askorbinowego w analizowanym materiale biologicznym oznacza się przez miareczkowanie mianowanym roztworem soli sodowej 2,6-dichlorofenoloindofenolem. Jest to, barwnik będący równocześnie wskaźnikiem końcowego punktu miareczkowania. W środowiskii-kwaśnym przybiera on barwę różową , a w zasadowym - niebieską.

Barwnik utlenia kwas askorbinowy do 2,3-dehydroaskorbinowego, a sam redukuje się do bezbarwnego związku. Analizowana próbka pozostaje bezbarwna, dopóki zawiera kwas askorbinowy. Nadmiar barwnika, nie ulegający redukcji, powoduje wystąpienie różowego zabarwienia roztworu.

Wykonanie oznaczenia:

Odczynniki: liście kapusty

2%kwas szczawiowy

2,6 -dichlorofenoloindofenol

Odważyć 12,5 g pokrojonych liści kapusty. Rozetrzeć bardzo dokładnie odważoną kapustę w moździerzu porcelanowym z 20 ml 2 % roztworu kwasu szczawiowego. Rozdrobniony materiał przenieść ilościowo do 50 ml cylindra miarowego i uzupełnić do objętości 50 ml 2% roztworem kwasu szczawiowego. Wymieszać bardzo dokładnie i przesączyć przez sączek do suchej zlewki.

Z przesączu odpipetować do dwóch 50 ml kolbek po 5 ml przesączu i szybko !!!!! miareczkować roztworem barwnika do momentu wystąpienia różowego trwałego zabarwienia.

Wiedząc, że 1 ml barwnika utlenia 88ug kwasu askorbinowego , obliczyć stężenie kwasu askorbinowego w analizowanym materiale. Wyniki podać w mg/lOOmg

2.IIościowe oznaczenie witaminy C w mleku Wykonanie oznaczenia:

Odczynniki: mleko

CH3COOH lodowaty

2,6 -dichlorofenoloindofenol

Do 200 ml kolbki odpipetować 10 ml mleka , dodać 1 ml kwasu octowego lodowatego i 40 ml wody destylowanej. Wymieszać i natychmiast miareczkować roztworem 2,6-dichlorofenoloindofenolem aż do" uzyskania różowego zabarwienia analizowanej próbki. Wyniki podać w mg/lOOml mleka.

Sprawozdanie z ćwiczeń:

Napisać sprawozdanie z ćwiczeń w którym przedstawić obliczenia stężenie witaminy C w kapuście i w mleku.