DSC00261

Przygotowanie prób do oznaczania aminokwasów na analizatorze AAA-400

Potrzebną naważkę, zarówno dla aminokwasów kwaśnych jak i siarkowych, oblicza się na podstawie procentowej zawartości białka w analizowanym materiale.

AMINOKWASY KWAŚNE

1.    Odważamy określoną masę materiału do plastikowych pojemników z czerwoną nakrętką Dodajemy ok. 5 ml 6M HC1 (mieszanina utleniająca) i wkładamy do termostatu na 24h w temperaturze 110°C.

2.    Przenosimy wy studzony materiał do SO ml kolbek miarowych za pomocą wody dejonizowanej. Uzupełniamy wodą do kreski. Dokładnie mieszamy.

3.    Przesączamy przez sączki do plastikowych pojemników.

4.    Pobieramy 3 ml przesączu do szklanych zlewek i odparowujemy do sucha na łaźni wodnej.

5.    Po odparowaniu dodajemy 3 ml buforu „Diluting” (bufor cytrynowy pH=2,2).

6.    Po rozpuszczeniu osadu przenosimy zawartość do zamykanych probówek. Przechowujemy w lodówce.

AMINOKWASY SIARKOWE

1.    Naważamy określoną masę materiału do szklanych zlewek i zalewamy mieszanina utleniająca (H2Q2 : kwas mrówkowy =1:9) - 5ml na każdą próbę, zakrywamy parafihnem i wkładamy do lodówki na lSh.

2.    Odparowujemy do sucha na łaźni wodnej.

3.    Zalewamy niewielką ilością 6M HC1 (Pozostawić, co pewien czas mieszać).

4.    Przenosimy, wypłukując dokładnie materiał 6M HC1 do plastikowych pojemników z czerwoną nakrętką Wstawiamy do termostatu na 24 h, 110°C.

5.    Cd dalszy jak przy oznaczaniu aminokwasów kwaśnych (od punktu 2).