LastScan3(2)

WŁAŚCIWOŚCI KINETYCZNE ENZYMÓW MODEL MICHAELISA - MENTEN

WYZNACZANIE WARTOŚCI K_M ORAZ Vmax

E + S

ES

E + P

Reakcje enzymatyczne stanowią układ, na który składa się kilka reakcji pośrednich o różnych stałych k (stałych równowagi), a więc te reakcje cząstkowe przebiegają z różnymi prędkościami:

Szybkość tworzenia kompleksu ES:

ES * k, [Ej[S] ,

Szybkość rozpadu kompleksu ES:

ES =(*₂ ♦ kJ[ES]

Szybkość reakcji zależy od stężenia kompleksu ES i szybkości jego rozkładu, a stała równowagi tych przemian nazywana jest stałą Michaelisa-Menten, symbol K_M

^to takie stężenie substratu w mol/dcm³, przy którym reakcja osiąga połowę Vmax

K» =

Wykres zalełności 1IV od I/[S1. oazywaay wykresem Lbirwemem-Biutn, jesl linią pnwą o nacbytculu uwnym KJV^,. lawa pnrona oś l/V w punkcie l/V„ irys. 8-I6Ł Warteci *'_u i 1'^, morns ter uryskac poci wpowaiwiiie danych cbśróirnhncłi dn równania 128l ulywając fjręrjiro

K„ jest miarą aktywności katalitycznej enzymu, jeśli zawiera się w granicach 10⁸ -10⁹/s/M mówimy o perfekcji katalitycznej enzymu.

K,^ oznacza takie stężenie substratu, przy którym połowa centrów aktywnych jest obsadzona. K„ informuje o powinowactwie enzymu do substratu. Wysoka wartość !<„ oznacza słabe wiązanie substratu, a niska wartość - silne wiązanie substratu.

[S]< K_m - v jest wprost proporcjonalna do [S];

[S]> K_M - v jest równa V_m,_x [S] = K_m - v =1/2V_m„

V_max równa się liczbie obrotów enzymu, czyli liczbie cząsteczek substratu przekształconych w produkt przez cząsteczkę enzymu w jednostce czasu, przy pełnym wysyceniu enzymu.

Liczba obrotów = k,^ = kg (szybkości powstawania produktu)

ENZYMY ALLOSTERYCZNE

Forma nieaktywni (T) Fomw aktywna (R)

1.    Enzym wykazuje kooperatywne wiązanie

substratu

2.    Krzywa kinetyczna dla enzymu allosterycznego

ma kształt sigmoidalny: przy stężeniu substratu, przy którym mniej niż połowa miejsc aktywnych jest wysycona substratem (Sc) enzym wykazuje niską aktywność. Przy stężeniu substratu wyższym od ( Sc) enzym jest bardzo aktywny.

3.    W przypadku enzymów allosterycznych już

niewielkie zmiany stężenia substratu skutkują dużymi zmianami szybkości katalizowanej reakcji.

INHIBICJA I INHIBITORY

•    ZMIANY AKTYWNOŚCI ENZYMÓW SĄ WYWOŁYWANE PRZEZ IN AKTYWATORY ŁUB INHIBITORY

•    Inaktywatory działają w sposób niespecyficzny i nieodwracalny, powodują denaturację białka enzymatycznego.

•    Inhibitory hamują działanie enzymów w sposób specyficzny, wybiórczy.

INHIBICJA

ODWRACALNA    NIEODWRACALNA

•    KOMPETYCYJNA

(WSPÓŁZAWODNICZĄ)

•    NIEKOMPETYCYJNA

(NIEWSPÓŁZAWODNICZA)

•    Inhibitorami mogą być:

1.    metabolity komórkowe;

2.    leki, trucizny lub inne substancje obce dla organizmu (ksenobiotyki).