lastscan 5

78 Hydroliza tlus/c/u

28. HYDROLIZA TŁUSZCZU

Temat wykonywany na dwóch ćwiczeniach, na pierwszym część A. na drugim część B

28.1.    Wprowadzenie

Jednym z elementów przemian związków organicznych w glebie jest rozkład tłuszczów, Zachodzi on pod wpływem egzoenzymów - lipaz, wydzielanych przez mikroorganizmy, wyniku czego powstaje glicerol i kwasy tłuszczowe Takimi właściwościami charakteryzuj się zarówno bakterie (np. Bacillus subtilis) jak i grzyby (np.: Penicillium sp , Aspergillus sp.

Badanie obecności organizmów lipolitycznych polega na szczepieniu badaną prób gleby lub też czystą kulturą, podłoży zawierających zemulgowany tłuszcz, a następnie okresie inkubacji, obserwowaniu wystąpienia wokół kolonii przezroczystych stref. W obręb' tych stref tłuszcz został zhydrolizowany, w związku z czym pierwotnie mętna pożywka staj się przezroczysta. Szerokość stref hydrolizy jest miarą aktywności lipolitycznej badany ' mikroorganizmów.

Celem ćwiczenia jest określenie aktywności lipolitycznej dostarczonych student^J szczepów mikroorganizmów.

28.2.    Materiały

Trzy czyste szczepy bakterii lub grzybów glebowych (w tym jeden wyizolowany samodzielni wg opisu w temacie dotyczącym uzyskiwania czystych szczepów), 3 szalki Petriego z poży do hodowli mikroorganizmów lipolitycznych, eza, igła preparacyjna, palnik gazowy, cieplarka.

Część A

28.3. Wykonanie ćwiczenia

Zaszczepić testowane mikroorganizmy na pożywce do badania hydrolizy tłuszczUi

Oznaczyć szalki z pożywką wpisując odpowiednio numery badanego szczepu oraz zespf łu i grupy studenckiej.

Przestrzegając zasad aseptyki zaszczepić pożywkę przy pomocy igły preparacyjnej b danymi szczepami. Grzyby szczepić punktowo igłą preparacyjną na środku szalki, ba[ terie - ezą w formie rysy na powierzchni pożywki.

Szalki z zaszczepioną pożywką umieścić w cieplarce (odwrócone dnem do góry) temperaturze 20°C i inkubować przez tydzień.

Część B

28.4. Wyniki

Odczytać wyniki testu badanych szczepów na aktywność llpolltyczną.

- Po wyjęciu z cieplarki sprawdzić hodowle (obecność kolonii, (,/yalość)

mikrobiologii

Zmierzyć linijką (patrząc od dolnej strony szalki) szerokość strefy hydrolizy tłuszczu, czyli odległość od brzegu kolonii do początku mętnego obszaru pożywki.

- Na podstawie szerokości stref hydrolizy ocenić aktywność lipolityczną badanych szczepów według poniższej skali:

Aktywność    (-) -brak,    (+) -słaba,    (++) -silna.

Wyniki wpisać do tabeli.

Numer (symbol) szczepu	Szerokość strefy hydrolizy [mm]	Aktywność lipolityczną

)ata..................................... Zaliczono