1(3)

23. HYDROLIZA MOCZNIKA

Temat wykonywany na dwóch ćwiczeniach, na pierwszym część A, na drugim częSć B

23.1.    Wprowadzenie

Mocznik wprowadzany jest do gleby jako nawóz lub powstaje w niej w wyniku przemian obornika i gnojówki. Jego rozkład zachodzi przy udziale ureazy, należącej do grupy enzymów hydrolitycznych i prowadzi do wydzielania amoniaku, dwutlenku węgla i wody. W glebie rozkład mocznika przeprowadzają tzw. bakterie mocznikowe (np. Sarcina ureae).

Rozkład mocznika bada się na płynnej pożywce wskaźnikowej z czerwienią fenolową. Żółte zabarwienie pożywki świadczy o środowisku kwaśnym (pH = 6,8), natomiast zabarwienie czerwone (odcień ciemnoróżowy) - o odczynie alkalicznym (pH = 8,4), takim jakie towarzyszy wydzielaniu amoniaku do podłoża w wyniku zachodzącej hydrolizy mocznika

Celem ćwiczenia jest określenie zdolności dostarczonych studentom szczepów bakterii do rozkładu mocznika.

23.2.    Materiały

Trzy czyste szczepy bakterii lub grzybów glebowych (w tym jeden wyizolowany samodzielnie wg opisu w temacie dotyczącym izolacji czystych szczepów), 4 probówki z płynną pożywką do hodowli bakterii rozkładających mocznik, eza, palnik gazowy, cieplarka

Część A

23.3. Wykonanie ćwiczenia

Zaszczepić badane mikroorganizmy na pożywce do określania zdolności do rozkładu mocznika.

-    Oznaczyć probówki z pożywką wpisując odpowiednio numery badanego szczepu oraz zespołu i grupy studenckiej.

-    Przestrzegając zasad aseptyki zaszczepić przy pomocy ezy probówki z pożywką do określania zdolności rozkładu mocznika badanymi szczepami. Jedną probówkę oraz szalkę z pożywką pozostawić nie zaszczepioną, jako kontrolę.

-    Probówki z zaszczepioną pożywką bakterii umieścić w cieplarce w temperaturze 20°C i inkubować przez tydzień.

Część B

23.4. Wyniki

Odczytać wyniki testu badanych szczepów na zdolność przeprowadzania rozkładu mocznika.

- Określić kolor pożywki porównując badane kultury z kontrolą i na tej podstawie stwierdzić które szczepy przeprowadzają hydrolizę mocznika.

Wpinnf. wyniki do lalmlki, /it/iun/am> /aobaotwowunu iMkc)f w

M ikMtłiSAk

ruDryKocn

Numor (»ymbol)»/c/apu		Kcilm pofywkl	Hydroliza mocznika
			+/-
			+/-
L_			+/-

Dii a Zaliczono