Zdjęcie0501

ŁW SUrowj^ ych s

lasyconyeh i 1000 kcal.

kwasów

g5 M HO (kwas •ality), j M bufor potasowe- boranowy.

Sprzęt:

Waga analityczna, kolby stożkowe o pojemności 25 cm’ z korkiem na szlif, o pojemności 100 cm³, probówki, pipety, spektrofotometr.

Wykonanie oznaczenia:

Próbkę tłuszczu należy odważyć z dokładnością do 0,0001 g. Zawartość NNKT wfwfijfik ce powinna wynosić około 5 rag. Orientacyjne naważki dla różnych tłuszcz^^ przeŚltflS8i|^CT no w tabeli 11.

Tabela U

Naważki tłuszczów do oznaczeń

Tłuszcz	Na ważka (mg)
olej sojowy lub słonecznikowy	10
olej rzepakowy, arachidowy lub oliwa z oliwek	30
margaryna	40
masło roślinne	30
masło, smalec, łój	100

i potraw

hę kwa-pVKT) I

lUSZCZU j

eźych,

io cis-ici fali

Naważkę tłuszczu umieścić w kolbce stożkowej o pojemności 25 cm³ z korkiem na szlif, następnie dodać 10 cm³ alkoholowego roztworu KOH o stężeniu 0,5 mola. Pozostawić na.2#, ^ godziny w temperaturze pokojowej bez dostępu światła do całkowitego zmydlenia próby. -Po zmydleniu pobrać 1 cm³ roztworu do kolbki miarowej o pojemności 100 cm³, dodać 20 cm³ buforu potasowo-boranowego o stężeniu 1 mol oraz 1 cm³ roztworu HCl o stężeniu 0.5 mola i uzupełnić wodą do kreski. Do dwóch probówek pobrać z kolbki miarowej po 3 cm³ roztworu. Do pierwszej probówki dodać 0,1 cm³ roztworu zinaktywowanego enzymu, do drugiej 0,1 cm³ roztworu roboczego lipooksydazy. Po zmieszaniu zostawić próby na 30 minut w temperaturze pokojowej. Po tym czasie oznaczyć absorbancję próby badanej wobec próby ślepej, którą stanowi próbka tłuszczu z enzymem inaktywowanym,

Obliczanie wyników:

Zawartość NNKT w próbce badanego tłuszczu, wyrażoną w procentach, oblicza się według wzoru:

%NNKT = A x 3964 / W

gdzie:

A - różnica w absorbancji między próbą badaną a ślepą,

W - liczba mikrogramów tłuszczu w 3 cm³ roztworu,

3964 - współczynnik absorbancji cis-cis wodorotlenków przy 234 nm po uwzględitfeBit^ rozcieóezeń:

3,1 1000 3^) i 78,2

x1000x 3