CCF20121114012

8.    Wykrywanie 17-hydroksykortykosteroidów: reakcja Portera-Silbera

Jest to reakcja charakterystyczna dla 17-hydroksykortykosteroidów, czyli hormonów posiadających grupę -OH przy Cl7 (kortyzol, kortyzon). Z chlorowodorkiem fenylohydrazyny, w obecności kwasu siarkowego powstaje żółty hydrazyn.

Wykonanie oznaczenia:

Odczynniki: kortyzol lub kortyzon

odczynnik Portera-Silbera (chlorowodorek fenylohydrazyny+kwas siarkowy)

Do probówki wlać około 10 pl kortyzolu (lub kortyzonu) a następnie dodać 1 ml odczynnika Portera-Silbera. Probówkę wstawić do wrzącej łaźni wodnej na około 5 minut. Powstaje żółte zabarwienie.

9.    Wykrywanie kortykosterydów z grupą a-ketalową w łańcuchu bocznym przy 07: Reakcja z błękitem tetrazoliowym

Reakcję tę dają wszystkie korty ko sterydy posiadające ugrupowanie a-ketalowe w łańcuchu bocznym przy Cl7 (kortyzol, kortyzon, aldosteron). Redukują one błękit tetrazoliowy do różowego, a przy dużych ilościach steroidu do niebieskiego formazonu.

Wykonanie oznaczenia

Odczynniki: kortyzol lub kortyzon

roztwór błękitu tetrazoliowego (1 mg błękitu w 1 ml NaOH (2 mol/1)).

Do probówki wlać 10 pl kortyzolu, po czym dodać 1 ml roztworu błękitu tetrazoliowego. Powstaje różowe zabarwienie.

Oznaczanie stężenia cholesterolu w surowicy krwi zwierząt

Wykonanie: Oznaczenie stężenia cholesterolu w surowicy krwi zwierząt wg instrukcji załączonej do zestawu firmy Pointę Scientific.

45