DSC00785

Próbka kontrolna

1.    Umieścić 1 g gleby w kolbie stożkowej o pojemności 100 cm'

2.    Kolejno dodać:

•    4 cm' buforu o pH 6.5;

•    0.25 cm' toluenu;

3.    Wymieszać zawartość kolbki przez kilka sekund.

4.    Zamknąć kolbkę korkiem i wstawić do termostatu na 60 min. (temp. 37*C).

5.    Po 60 min. wyjąć kolbkę z termostatu.

6 Przygotować zestaw do sączenia (kołbka miarowa o pojemności 50 cm', lejek szklany, twardy sączek).

7. Bezpośrednio przed sączeniem do gleby dodać kolejno:

•    1 cm³ roztworu 0,5 M cJfclj-2HjO,

•    4 cm* roztworu 0,5 M NaOH.

•    1 cm* roztworu 4-n itrofcny lofosforanu disodowego (PNPNa).

I.    Przenieść ilościowo zawartość inkubowanej kolbki na sączek (zestaw do sączenia).

9.    Kilka razy kolbkę i sączek przemyć destylowaną wodą.

10.    Uzupełnić kolbkę miarową z przesączem (do objętości 50 cm*) wodą destylowaną i wymieszać.

II.    Mierzyć ekstynkcję na spektrofotometrze (410 nm).

12. Wyniki pomiaru podstawić do wzoru (i) i zestawić w tabeli nr I.

Obliczenie wyników

Pac =

(Eb - Es) •

6,4 100

Ej • %s.m.

0)

Pac - aktywność fosfatazy kwaśnej wyrażona w mil molach PNPkg 's.m.-h \ E*, - wartość ekstynkcji próbki badanej,

Et - wartość ekstynkcji próbki kontrolnej.

Et - suma ekstynkcji wszystkich punktów wzorca,

6,4 - suma stężenia PNP (/tmole) z wszystkich punktów wzorca,

100 •    ¹ s.m. - współczynnik przeliczeniowy na suchą masę gleby.