Inżynieria 6id 462

isum\ t

4

•    ¹¹¹ '*'^h    ł*Miykcyjiie, których aktywnoiZ In »///•> /«lcy ...I

Jt) M I*. V .ul< l*>/> lllllM-f llllllliy I Mu*' tt^iylko ATI’l M*' c) tylko Mji^1,

łl) łyllio ATI* l S-mlcim/s I.>iiu ti.uim>

|*.N .

V),a'^U    v*^,u"-"wi i‘*i *>««

A

- Enzymy restrykcyjne II klaty

dl /awv/c generują iiw nadmietnoici lyjm 5'

(t)) rozpoznające sekwencje czwórkowe zazwyczaj inmu, DNA na nuucjw.o ftagmenty ni* enzymy wątkowe V

c)    ich miejsce trnwicnin mo/c Icteć naprzeciwko siebie w obu niciach i wAwcnu powitają końce tępe -

d)    zawsze generują nadrnirrnoici długości 3 miklcolydów

/I

•> powumo pt/ek,*/,*.}!),^,,, b» powuu*. byt wy,,/* _ŁV».«_mY W (K>win(M> wynosiC od 0 VI S Vł

“> po*urno dobierać** /*le/.n,e od <

3. Enzymy restrykcyjne II klasy.

a)    mają aktywność restrykuuy i mctylazy w tym samym białku —

b)    jesh rozpoznają sekwencje bogate w pary AT lub GC mogą być na ogól uważane za rzadkolnącc — łP rozpoznawany palindrom może być przerwany przez serię kilku dowolnych nuklcotydów

d) substratem może być dsDNA i ssDNA

2

12 Startery dn reakcji PCK \V>) w Młeuwici od octu ich długość 0*C W matrycowym DNA

vch końce \ nic mo^ byt kom

c)    ich końce V pow inny zawierać

d)    tch długość powinna byt w»ęk

0

4. Neoschizomcrami enzymów restrykcyjnych nazywamy:

a) enzymy pochodzące z różnych szczepów, ale rozpoznające le same sekwencje DNA. przecinające DNA w tych samych miejscach —

(0)enzymy pochodzące z tego samego szczepu i rozpoznające tc same sekwencje DNA ^niekoniecznie przecinające DNA w tych samych miejscach

c)    enzymy pochodzące z różnych szczepów, ale rozpoznające le same sekwencje DNA. pizccmające DNA w rożnych miejscach —

d)    enzymy pochodzące z tego samego szczepu i rozpoznające tc same sekwencje DNA przecinające DNA w tych samych miejscach

13. Mułtrpłcksowy PCft

w trakcie lej reakcji wydajna 1 stosuje się w niej kilka par s polega na ampUfikacji kdkv i.wykorzystuje się go do sek

2

IkTcTmo stabilne poYunctuy polimema Tth posiada w b) polimcroza Pfu ma bardz cl polimema Deep Yem m nj) polimema l'fu podobnu

Które spośród poniższych sekwencji są najprawdopodobniej miejscami tozpo/nania enzymów restry kcyjny ch klasy ll

GAATTC

ATCCTA

GCTTOC

CTGCAO

\5 Enzym dc fosfory luj*^. (łftonaza pohnukleótydow ^ bl topoizomcma

cl polimer aza £agaT7 ' ^Vktc wetkow a okoliczna

it<VM fCkl

6 Aktyw noić gw uzitzistai enzymu restrykcyjnego

f pojaw ia sic jako elekt zbyt długiej inkubacji mieszaniny reakcyjnej pojawia \tę przy nadmiarzeenzymu lestiykcyjnego pojaw u stę u Kudzo nielicznych enzymów -

dl zakzv od rodzaju uZMcgo DNA i pojawia się tylko podczas tiawiciua genomowego DNA '

D

Ib Któia z wytmcoionyc

a)    DNApohmcroza « bą

b)    DNA pohtnema l ^Jragmcot Kknowa (!^^*k< wykazu.**

Przyłączanie starterów przeprowadza saę w temp pokojowej —

0 jesi kluczowym etapem reakcji PCK wpływającym na jej specyficzność c) przeprowadza uę w zakresie temp 72-tSK ‘

dł tu ten etap i:xvna wpływać stosując dodatki takie jak DMSO lub formamid

z)

0

L7 Terminalna transfer ^katalizuje dodawań* M n* dzutb na dsDN A cl n* wymaga startera ^tx>zc być wykony*

8 Nowo wirtw.ni.tiif non ivivlnktt>w mer w szorzedow vch ic.lkcn ł\ K

0

1$ W wyniku trawTcoi icstrslcyjiych w ż.VoRl    12*

Ritnlll    10.