skan22

większej ilości odpowiednio dobranych krwinek wzorcowych lub badania eluatów po zastosowaniu absorpcji wybranymi krwinkami. Swoistość alloprzeciwciał należy potwierdzić wykazaniem nieobecności danego antygenu na krwinkach badanych. U osób, które już wytworzyły przeciwciała odpornościowe, aby zapobiec dalszej allo-immunizacji poprzetoczeniowej, określa się fenotyp układu Rh i Kell.

1. Wykrywanie alloprzeciwciał odpornościowych

Do wykrywania alloprzeciwciał odpornościowych służą testy enzymatyczne i antyglobulinowe. W rutynowych badaniach stosuje się test enzymatyczny LEN i pośredni test antyglobulinowy PTA-LISS. Pośredni test antyglobulinowy PTA-PEG znajduje zastosowanie jako test dodatkowy.

1.1. Test enzymatyczny LEN

SCHEMAT WYKONANIA BADANIA

Krwinki wzorcowe

Krwinki badane

Krwinki wzorcowe

0 Rh+ DCCee 0 Rh+ DccEE 0 Rh- dcceeK

LEN

0 Rh+ |    0 Rh-

Probówka nr 1,2,3 - wykrywanie alloprzeciwciał z zastosowaniem zestawu

krwinek wzorcowych o znanych i wzajemnie uzupełniających się fenotypach

Probówka nr 4    - autokontrola

Probówka nr5i6 - kontrola dodatnia i ujemna z zastosowaniem Standardu anty-D

56

j serologia grup krwi w praktyce

OPIS WYKONANIA BADANIA

. przygotować sześć odpowiednio opisanych probówek

•    dodać po dwie krople 4% zawiesiny w roztworze LISS:

-    krwinek badanych    - do probówki    nr 4

-    krwinek wzorcowych grupy 0 Rh+ DCCee (1)    - do probówki    nr 1 i 5

-    krwinek wzorcowych grupy 0 Rh+ DccEE (2)    - do probówki    nr 2

-    krwinek wzorcowych grupy 0 Rh- dcceeK(3)    - do probówki nr 3 i 6

•    do wszystkich probówek dodać po jednej kropli odczynnika LEN

•    inkubacja 10 min. w temperaturze 37°C

•    po inkubacji do probówek dodać po dwie krople:

- surowicy badanej    - do probówki nr 1,2, 3,4

- standardu anty-D    - do probówki nr 5 i 6

•    zawartość probówek dokładnie wymieszać przez wstrząsanie

•    ponowna inkubacja 3 min. w temperaturze 37°C

•    po inkubacji probówki wirować z prędkością 150-340 g (1000-1500 obr./min.) przez 30-60 sek.

•    reakcję odczytać makroskopowo poprzez delikatne wstrząsanie poszczególnymi probówkami

•    wyniki zapisać w formie protokołu

1.2. Pośrednie testy antyglobulinowe 1.2.1. PTA-LISS

SCHEMAT WYKONANIA BADANIA

Krwinki wzorcowe

Krwinki wzorcowe    Krwinki badane

0 Rh+ DCCee 0 Rh+ DccEE 0 Rh- dcceeK

Probówka nr 1,2,3

0 Rh+    0 Rh-

-    wykrywanie alloprzeciwciał z zastosowaniem zestawu krwinek wzorcowych o znanych i wzajemnie uzupełniających się fenotypach

Probówka nr 4 Probówka nr5 i6

-    autokontrola

-    kontrola dodatnia i ujemna z zastosowaniem Standardu anty-D

serologia grup krwi w praktyce |j 57