img041 (56)

Pozyskiwanie nowych szczepów mikroorganizmów o znaczeniu przemysłowym

1)    Pobranie próby ze środowiska

2)    Hodowla wzbogacająca

3)    Testy selekcyjne

4)    Testy fermentacyjne

5)    Identyfikacja gatunkowa wybranego mikroorganizmu

Pobranie próby ze środowiska - środowisko (naturalne lub przekształcone przez człowieka), to wybrane przez nas na drodze racjonalnego wyboru źródło mikroorganizmów, z którego spodziewamy się wyizolować, z zastosowaniem klasycznych technik mikrobiologicznych, mikroorganizmy o właściwościach, które stanowiąo ich atrakcyjności biotechnologicznej

Kryterium wyboru miejsca pobrania próby - założenia pro jektowe

Sposoby zwiększania liczebności poszukiwanych drobnoustrojów

Powodzenie skriningu zależy w dużym stopniu od maksymalnej koncentracji poszukiwanych drobnoustrojów, przy jednoczesnym zmniejszeniu udziału niepożądanych.

W celu osiągnięcia takiego efektu stosuje się:

1)    odpowiednie oddziaływanie na środowisko przed pobraniem próby

2)    wprowadzenie do środowiska wabików - pułapek

3)    wstępną obróbkę fizyczną lub mechaniczną próby

4)    hodowlę wzbogacającą

1. Pobranie próbki środowiskowej z gleby

i

2.    Inkubacja

i

3.    Pobranie próby środowiskowej

Posiew

Pobranie próby ze środowiska

1. Wprowadzenie środka selekcyjnego (antrazyna zwiększenie liczby promieniowców)

1

^    2. Inkubacja w pożywce

zawierającej czynnik selekcyjny

Sposoby zwiększania liczebności poszukiwanych drobnoustrojów

Niektóre z metod zmiany normalnego składu populacji:

-    wprowadzenie do środowiska odpowiednich związków chemicznych, powodujących wzrost liczby jednego rodzaju mikroorganizmów lub szkodzących wzrostowi innych

-    użycie tzw. wabików - pułapek wprowadzanych do środowiska na określony czas

Hodowla wzbogacająca (z zastosowaniem podłoży wzbogacających) -metoda opiera się na wprowadzeniu do próbki pobranej ze środowiska związków chemicznych pełniących rolę czynnika selekcyjnego, pozwalającego na zmiany liczebności mikroorganizmów tworzących populację drobnoustrojów zawartych w badanej próbce, podczas jej inkubacji w określonych warunkach fizykochemicznych.

- do wstępnej obróbki zasiedlanych przez mikroorganizmy materiałów podczas izolacji różnych grup fizjologicznych można wykorzystać działanie czynników fizycznych

Sposoby zwiększania liczebności poszukiwanych drobnoustrojów

Kluczową rolę w namnażaniu się określonych grup drobnoustrojów odgrywa skład chemiczny podłoża. Stosowane są podłoża kompleksowe lub syntetyczne wzbogacane.

Istotnym czynnikiem selekcyjnym w podłożach stosowanych do namnażania grup drobnoustrojów jest obecność różnych substanc ji o swoiste j toksyczności , głównie antybiotyków.

Czynnik hamujący wzrost :

grzybów - cykloheksimid, nystatyna bakterii - streptomycyna lub tetracykliny, bakterii gram „+" - penicylina lub D-cykloseryna bakterii gram - polimyksyny

Sposoby zwiększania liczebności poszukiwanych drobnoustrojów

... potencjał oksydacyjno-redukcyjny ... czas trwania hodowli ... hodowlę ciągłą.

... związki chemiczne powszechnie uważane jako obce dla metabolizmu drobnoustrojów

... obecność ksenobiotyku