36058 skan14 (2)

1. Oznaczanie antygenów i alloprzeciwciał układu ABO

Aby określić grupę krwi układu ABO, należy oznaczyć antygeny na krwinkach czerwonych i alloprzeciwciała w surowicy. Obecność antygenów i alloprzeciwciał stwierdza się na podstawie obecności lub braku aglutynacji krwinek badanych z odczynnikami monoklonalnymi anty-A i anty-B (oznaczenie antygenów) oraz na podstawie obecności lub braku aglutynacji surowicy badanej z krwinkami wzorcowymi grup 0, Ai, B (oznaczenie regularnych alloprzeciwciał).

Do oznaczania antygenów układu ABO należy zastosować dwie różne serie odczynników monoklonalnych anty-A i anty-B, pochodzących z dwóch różnych klonów.

Wszystkie używane do badań probówki, płyty jednorazowego i wielokrotnego użytku należy opisać numerem próbki badanej.

1.1. Metoda szkiełkowa

SCHEMAT WYKONANIA BADANIA

Surowica badana

Odczynniki monoklonalne anty-A I    anty-B

t    ▼

Wgłębienia nr 1 i 2    - oznaczanie antygenów układu ABO na krwinkach przy użyciu

odczynników monoklonalnych anty-A i anty-B Wgłębienia nr 3,4,5    - wykrywanie naturalnych, regularnych alloprzeciwciał przy

użyciu krwinek wzorcowych grup 0,A_vB

•    na odpowiednio opisaną płytę nanieść po jednej kropli odczynników monoklonalnych i po jednej kropli surowicy badanej według schematu podanego powyżej

•    do odczynników monoklonalnych dodać po jednej kropli 10% zawiesiny krwinek badanych w roztworze PBS

•    do surowicy badanej dodać po jednej kropli 10% zawiesiny odpowienich krwinek wzorcowych

•    reagenty wymieszać, kołysząc płytą lub używając bagietki

•    płytę pozostawić na 2-5 min. w temperaturze pokojowej

•    po inkubacji odczytać reakcję, poruszając płytę ruchem okrężnym

•    wyniki zapisać w formie protokołu

1.2. Metoda probówkowa

SCHEMAT WYKONANIA BADANIA

Odczynniki monoklonalne

Surowica badana

-1

anty-A    anty-B

1 I

▼    T    ▼

Probówki nr 1 i 2    - oznaczanie antygenów układu ABO na krwinkach przy użyciu

odczynników monoklonalnych anty-A i anty-B Probówki nr 3,4,5    - wykrywanie naturalnych, regularnych alloprzeciwciał przy

użyciu krwinek wzorcowych grup 0, A_},B

serologia grup krwi w praktyce 9    41