270220121312

Ćwiczenie 4. Erytrogram - ocena morfologiczna

na rozmazie

^erVtri

Si

Morfologia erytrocytów jest wskaźnikiem diagnostyczn w obrazie czerwonokrwinkowym mogą wskazywać na różne zJ!*' ^a ^ ganizmie, np. niedokrwistości o różnym podłożu, choroby metah ^eniatN dzone nieprawidłowości erytropoezy, zatrucia, choroby szpiku k °^,lc2rie. w rżenia autoimmunołogiczne.    ^Os^®9o,

%

Wykonując ocenę morfologiczną erytrocytów bierze $ie rwi ^ wielkość, barwiiwość, kształt oraz ewentualną obecność nieprawd ^u'^Va9e tur we wnętrzu komórek, a w przypadku kręgowców niższych położenie i strukturę jądra komórkowego.    ~ ^ta^e

U człowieka za normę przyjmuje się obecność do tO⁰/ o nieprawidłowym wyglądzie (część uszkodzeń może być wynikiem^erytr°%, nia preparatu) W starannie sporządzonych preparatach krwi ryb ni ^Sp°^^ zbudowanych czerwonych krwinek jest na ogół nie więcej niż 3.50/^^% wartości mogą wskazywać na różne zaburzenia, np. osmotyczne u błon komórkowych, chromatyny itd., najczęściej będące wynikiem korzystnych warunków fizykochemicznych (nieodpowiednia temperatu tlenienie, zbyt niskie lub zbyt wysokie pH), infekcji lub zatruć. ^ra’ ⁿⁱ% W obrazie krwi mogą też pojawiać się erytrocyty niedojrzałe U ka jest ich około 1%, natomiast u ryb nawet do 10% (brak wyraźnej bari⁰²^ dzy narządami krwiotwórczymi a krwią obwodową). Zwiększenie odset?¹^ dojrzałych czerwonych krwinek ponad normę może wskazywać na st³ ^ przyspieszoną erytropoezę (reakcja na bodźce stresowe, niedotlenienie n! ^ ną hemolizę lub znaczną utratę krwi).    ’ ^

W przypadku nasilonej hemolizy, we krwi mogą być obecne erytro w stadium rozpadu (silnie napęczniałe i blade) lub szczątki komórek już lizowanych (okrągłe różowe plamy).

Wykonanie oznaczenia:

1. Dokładnie odtłuść szkiełka podstawowe (wymyj detergentem, przetrzyj ₃|. koholem, spłucz wodą destylowaną, wysusz).

2    Nanieś małą kroplę krwi na koniec szkiełka.

3    Przesuń po powierzchni szkiełka drugim szkiełkiem o oszlifowanym brzegu tak. aby kropla krwi przylegała do niego od tyłu. Pociągnij szybkim ruchem krew za szkiełkiem, rozprowadzając ją równo po powierzchni (nie pchaj kropli przed szkiełkiem!).

4    Pozostaw do wyschnięcia.

5. Zalej na 3 min barwnikiem May-Grunwalda.

6 Ostrożnie, za pomocą pipety nalej na każde szkiełko wody destylowanej, tak aby zmieszała się z barwnikiem (ok. 1:1)1 pozostaw na 2 minuty.

7. Hej barwnik.

8 Zalej na 15-20 min 1:10 roztworem barwnika Giemsy.

9.    Wypłucz bieżącą wodą z kranu.

10.    Pozostaw do wysuszenia

11.    Zetrzyj alkoholem plamy barwników ze spodniej strony szkiełka.

12. Oglądaj pod powiększeniem 1000 (immersja). licząc komórki normalne dojrzałe. niedojrzałe oraz zmienione (opisz i narysuj zmiany) na 300 erytrocytów. Wyniki wpisz do tab. 6.

Tabela 6. Zmiany w erytrogramle ryby pod wpływem stresu

Typ komórek	Kontrola	Stres
Erytrocyty normalne dojrzałe
Erytrocyty niedojrzałe
Erytrocyty zmienione
Erytrocyty w stadium hemolizy

39