83
tylko przekrój komórki. W celu odtworzenia trójwymiarowego wyglądu struktury, trzeba analizować obrazy wielu seryjnych skrawków obiektu.
□ Skaningowy mikroskop elektronowy Ten typ mikroskopu elektronowego rejestruje obraz wiązki elektronów odbitej od oglądanej powierzchni. Zarejestrowany rozkład natężenia emisji wtórnych elektronów tworzy trójwymiarowy obraz obiektu. Dzięki temu otrzymuje się informacje o kształcie i zewnętrznej powierzchni badanej próbki. Podstawowym ograniczeniem mikroskopu skaningowego jest niezbyt wysoka, w porównaniu z mikroskopem transmisyjnym, zdolność rozdzielcza (odpowiednio 10-20 nm i 0,2-0,1 nm).
Aby nie tylko widzieć struktury komórkowe, ale także określić, jakie mają właściwości i jakie pełnią funkcje, stosuje się metodykę cytochemiczną.
Materiał przeznaczony do badań tego typu jest homogenizowany (komórki zostają rozbite, ale nie zostają uszkodzone struktury komórkowe), a następnie poddany wirowaniu.
A B
v —
V
V
f) o u
JUUI
matę |
duże |
matej | |
gęstości | |
e |
dużej gęstości |
Rys. 57. Wirowanie: A — różnicowe oraz B - w gradiencie gęstości. Stan przed wirowaniem i po nim
Autoradiografia polega na wprowadzaniu do komórek in vitro związków zawierających promieniotwórcze izotopy pierwiastków normalnie znajdujących się w komórkach. Organizmy żywe nie odróżniają związku, w którym niepromieniotwórczy pierwiastek wymieniono na jego promieniotwórczy izotop, dlatego związki znakowane promieniotwórczym izotopem zostają włączone w normalny ciąg procesów metabolicznych.