CCF20081202053

Tabela 7. Liczba próbek pierwotnych wędlin do badań mikrobiologicznych (wg PN-71/A-82105)

Wielkość partii w kg	Liczba próbek pierwotnych
do 1000	3
od 1001 do 4000	5
powyżej 4000	9

* Ćwiczenie 7.1. Analiza normy dotyczącej pobierania próbek do badań mikrobiologicznych

Z odpowiedniej normy wybrać i przepisać do zeszytu przedmiotowego następu|i|' dane:

-    określenie partii produktu,

-    liczbę próbek pierwotnych do badań mikrobiologicznych,

-    wielkość próbki pierwotnej,

-    sposób pobrania próbki, jej zabezpieczenia i przechowywania.

* 7.3. Barwienie preparatów mikroskopowych metodą Grama

O metodzie Grama wspomniano w rozdziale 2. W metodzie tc| wykorzystuje się zjawisko powstawania w komórkach niektórych bakterii pod wpływem roztworu fioletu krystalicznego (przep. laboi 2.1) i płynu Lugola (przep. labor. 2.2) trwałych związków o barwie fioletowej, nierozpuszczalnych w alkoholu. Bakterie wykazujące lę właściwość określa się jako Gram-dodatnie (G + ). W komórkach innych gatunków bakterii powstałe związki są nietrwałe i wymywają się alkoholem. Bakterie te odbarwiają się pod wpływem alkoholu, a następnie barwią się na czerwono po dobarwieniu preparatu fuk syną (przep. labor. 2.3) i są określane jako Gram-ujemne (G-).

* Ćwiczenie 7.2. Przygotowanie preparatu barwionego metodą Grama

Materiały, sprzęt i odczynniki: chude mięso, odtłuszczone szkiełko przedmiotowe, pinceta, szczypce Cometa, wanienka do barwienia, zestaw barwników i odczynników stosowanych w metodzie Grama, olejek imersyjny.

Wykonanie. Najpierw odtłuścić szkiełko przedmiotowe (ćw. 2.4). Następnie z próbki mięsa jałowymi nożyczkami wyciąć kawałek ze środka, pincetą przenieść go nu szkiełko i odcisnąć na nim wyraźny ślad. Preparat wysuszyć w temperaturze pokojo-

*t)j i utrwalić przeprowadzając szkiełko 2-3 razy przez płomień palnika. Szkiełko i preparatem umieścić na prętach wanienki do barwienia, a powierzchnię odcisku pokryć roztworem fioletu krystalicznego (przep. labor. 2.1) na 2-3 min. Następnie boć roztwór barwnika, a na preparat nalać płyn Lugola (przep. labor. 2.2) na 1 min. Po zlaniu tego płynu szkiełko z preparatem trzymać pochyło i spłukiwać je 95% ilkoholem etylowym tak długo, aż ściekające krople alkoholu będą bezbarwne. Wów-rras preparat spłukać wodą destylowaną i dobarwić rozcieńczoną (w stosunku 1:10) toksyną (przep. labor. 2.3) działając barwnikiem przez 15-30 s. W końcu preparat iplukać wodą, osuszyć ostrożnie bibułą i oglądać pod obiektywem imersyjnym. Poli-iv.yć w polach widzenia ziarniaki, pałeczki Gram-dodatnie i pałeczki Gram-ujemne. Interpretacja wyników. Preparaty wykonane z mięsa świeżego zawierają najwyżej pojedyncze komórki ziarniaków. Obecność pałeczek Gram-ujemnych w preparacie nasuwa podejrzenie o zakażeniu mięsa bakteriami chorobotwórczymi (jak np. pałeczki i. grupy okrężnicy) lub gnilnymi.

7.4. Zasady przygotowywania rozcieńczeń z produktów spożywczych

Produkty spożywcze są w różnym stopniu zakażone. W celu oznaczenia w nich ogólnej liczby drobnoustrojów lub wykrycia określonej grupy, próbkę pobraną do badań mikrobiologicznych należy najpierw odpowiednio rozcieńczyć, tak aby wysiewany na pożywkę badany materiał umożliwiał ilościowe określenie wzrostu.

Produkty spożywcze rozcieńcza się płynem Ringera (przep. labor. 1.2). Zasadę przygotowania rozcieńczeń do posiewu pokazano na rys. 64. Z produktu przeznaczonego do rozcieńczeń należy od-

1cm³    icm³    1cm³    1cm³

Rys. 64. Schemat przygotowania rozcieńczeń do posiewu

123