Bogaty materiał doświadczalny w postaci widni IR, zebrany dla praktycznie w»i\ kich grup związków organicznych, stanowi podstawę takiej identyfikacji. Metoda ią troskopii IR pozwala nie tylko na ustalenie grup funkcyjnych w związku, ale liii na wyciągnięcie wniosków dotyczących struktury badanego związku. Jest też dogi', metodą badania oddziaływań międzycząsteczkowych.
Specjalną dziedzinę zastosowań spektroskopii IR stanowią badania biochemii -Metoda ta okazała się bardzo wygodną techniką w badaniach:
1) Białek, polipeptydów i aminokwasów. Jest to domena badań spektroskopii dalekiej podczerwieni w zakresie 500 cm-'-10 cm-1. W dużych cząsteczkach hlnl zachodzą bowiem drgania o niskich częstościach czułych zrębów molekularnych I fragmentów aminokwasowych. Daleka podczerwień jest dogodnym zakresem tych bud także z tego względu, że nie przeszkadza w tym obszarze obecność wody. Spektrosk"| IR pozwala m.in. na rozwiązanie takich problemów, jak:
• ustalenie konformacji łańcucha polipeptydowego polimerów i kopolimerów im nokwasowych,
• ustalenie sposobu orientacji cząsteczek w strukturach wyższego rzędu, np. wh nach białkowych,
• badanie oddziaływania białek ze związkami niskocząsteczkowymi, takimi jak n koenzymy,
• badanie procesów hydratacji łańcuchów polipeptydowych.
2) Kwasów nukleinowych.
3) Cukrów.
4) Błon biologicznych i ich składników.
Ważnym działem zastosowań są także zastosowania biomedyczne, w tym badan tkanek (można badać np. mięśnie, włókna nerwowe) i krwi.
Spektroskopię IR wykorzystywano także do identyfikacji zawartości gazów w ustm|i np. N20 w tkance mózgowej lub CO w hemoglobinie krwi.
Ważne analityczne zastosowania spektroskopii IR dotyczą oznaczania śladowych iii ści wody w różnych układach, a także grup —OH obecnych na powierzchniach soi bentów i katalizatorów. Inną dziedziną zastosowań jest badanie kompleksów kationm metali z ligandami organicznymi.
Widma oscylacyjne cząsteczek oprócz absorpcyjnej spektroskopii w podczerwieil wykorzystuje także spektroskopia ramanowska. Historycznie wcześniejsza od spektm skopii IR, znana jest bowiem od 1928 r. (Ch. V. Raman). Szybki rozwój tej metod :■M 1 i|iil jednak w ostatnich latach po udoskonaleniu aparatury i wprowadzeniu laserowi'" ziodla wzbudzenia w miejsce klasycznego, jakim była lampa rtęciowa.
Oddziaływanie promieniowania elektromagnetycznego z oscylującą cząsteczką daje ■ i rlrkly:
• absorpcję — stanowiącą podstawę absorpcyjnej spektroskopii IR,
• emisję — stanowiącą podstawę fluorymetrii,
• rozproszenie — stanowiące podstawę spektroskopii ramanowskiej.
Iło/proszenie promieniowania następuje wówczas, gdy energia fotonu oddziałującego i iieezką nie odpowiada różnicy stacjonarnych poziomów energetycznych cząsteczki, pioszenie promieniowania może nastąpić bez zmiany energii fotonu lub ze zmianą.
wiwszy typ nosi nazwę rozproszenia Rayleigha, a drugi rozproszenia Ramana. Mecha-iii rozproszenia ilustruje wykres przedstawiony na rys. 6.49.
v'
3-
2-
1 -
v0-v v0 V0+ V V
pasmo pasmo pasmo SRA
(>.49. Przejścia między poziomami energetycznymi cząsteczki i odpowiadające im widmo Ramana; i I /ij — poziomy elektronowe (podstawowy i wzbudzony), v — poziomy oscylacyjne należące do iilimiów elektronowych Eg i £). S — stokesowskie, R — rayleighowskie, A — antystokesowskie
W rozproszeniu rayleighowskim foton padający o energii hv0 ulega rozproszeniu i i/<•/ cząsteczkę bez zmiany energii. W rozproszeniu ramanowskim natomiast wystę-|in|l| dwie składowe: foton o zmniejszonej energii hvQ—hv (pasmo stokesowskie) i foton /większonej energii hv0 + hv (pasmo antystokesowskie). W widmie rozproszonym tyslępują wyraźne różnice między intensywnościami trzech składowych widma. Naj-‘ iększą intensywność ma pasmo rayleighowskie, które jest 103 — 104 razy silniejsze od