DSCF6700

ĆWICZENIA LABORATORYJNE

SPEKTROFOTOMETRIA ABSORPCYJNA UVA/IS

Spektrofotometria absorpcyjna UV/VIS jest to metoda analizy instrumentalnej polegająca na wykorzystaniu zjawiska selektywnej absorpcji promieniowania nadfioletowego (UV) i widzialnego (VIS) przez badaną substancję do jej wykrywania i ilościowego oznaczania.

Podstawową zależnością wykorzystywaną w spektrofotometrii jest prawo Lamberta-Beera

A = log ° = e • b • c

gdzie:

A    - absorbancja.

I₀    - natężenie promieniowania padającego na próbkę,

I - natężenie promieniowania po przejściu przez próbkę, e    - molowy współczynnik absorpcji,

b    - grubość warstwy pochłaniającej,

c    - stężenie molowe roztworu.

Oznaczenia ilościowe opierają się na wykorzystaniu liniowej zależności absorbancji od stężenia. Pomiary absorbancji dokonywane są za pomocą spektrofotometrów. Spektrofotometry UV VIS można podzielić na spektrofotometry klasyczne i spektrofotometry z detekcją nowoczesną. W spektrofotometrach klasycznych monochromator znajduje się przed próbką. W celu otrzymania widma absorpcji przez badaną próbkę przepuszcza się kolejne wiązki światła monochromatycznego, które sukcesywnie dochodzą do detektora. Zarejestrowanie całego widma absorpcji w zakresie całego widma absorpcji w zakresie UV-VIS trwa kilka minut.

W ostatnich latach wprowadzono do użytku spektrofotometry z detekcją równoczesną nazywane też spektrofotometrami z matrycą diodową (ang. diodę arrays). W takich spektrofotometrach przez próbkę przepuszczane jest promieniowanie polichromatyczne, które następnie jest rozszczepiane i całe widmo pada równocześnie na matrycę