DSC27

Extension (wydłużanie łańcucha)

■    Wydkjianie startera następują zawsze od końca 3'-OH.

» Sukcesywne dosyntetyzowanie dNTP zachodzi najczęściej w temperaturze 72*C, aczkolwiek może być wyższa.

■    Czas trwania polimeryzacji to 20 sekund- dla fragmentów do 500 pz i 40 sekund dla fragmentów do 1.2 kpz.

■    Proces ten katalizowany jest przez polimerazą DNA.    1

• Szybkość reakcji w optymalnych warunkach dla polimerazy Tag wynosi około 2000 nukleotydów/min.

■    Dla całkowitej syntezy badanego fragmentu czas trwania tego etapu

wyznaczamy zaktodając połową optymalnej prędkości.    ^v--^:™

Mirę**

l