W metodzie tej wykorzystano jednocześnie działanie czterech I
enzymów, sąto i
Polimeraza DNA uwalnia pirofosforan (PPi) podczas wstawiania 1
kolejnych nukłeotydów do syntetyzowanej nici.
Suifurylaza przekształca uwolniony pirofosforan w ATP z wykorzystaniem adenozyno-5'-fosfosiarczanu (APS)
♦lucyferaza katalizuje reakcje przemiany lucyferyny (przy udziale tlenu i ATP) dając oxylucyferynę,C02, AMP, PPi i światło, którego natężenie jest rejestrowane.
♦ Apiraza (Apyraza) rozkłada dNTP do dNDP, dNMP i fosforanu. W reakcji tej nie ma substratu żadnego innego oprócz dNTP.