109818

Zadanie 2. Wpływ temperatury na aktywność inwertazy drożdży.

Wykonanie:

Przygotować 6 probówek, a następnie do wszystkich dodać po 0,5 ml sacharozy w buforze octanowym o pH 4,7 oraz do pięciu z nich 0,5 ml inwertazy drożdżowej o optymalnym stężeniu. Do szóstej probówki zamiast inwertazy dodać 0,5 ml wody. Próby umieścić na 30 minut w temperaturze: 4, 20, 37, 60,100 °C, a próbę kontrolną w temperaturze 20°C. Po zakończeniu inkubacji zalkalizować próby paroma kroplami IM roztworu NaOH (sprawdzić pH I), a następnie we wszystkich mieszaninach wykonać próbę Benedicta. W tym celu do sześciu czystych probówek dodać po 1 ml odczynnika Benedicta i do każdej z nich dodać 0,2 ml mieszaniny reakcyjnej. Probówki umieścić na ok. 1-2 minuty we wrzącej łaźni wodnej.

Obserwacje:

W próbie kontrolnej oraz w probówce o temperaturze lOOfc roztwór nie odbarwił się(był niebieskij.W reszcie probówkach nastąpiła lekka zmiana zabarwienia, a w probówce o temperaturze 20 C zmiana zabarwienia była najsilniejsza. Przy ok. 37*C pojawia się zabarwienie czerwone.

Wnioski:

Możliwe jest, iż czas inkubacji był za krótki, jeżeli mamy za gęstą zawiesinę to czas ten musi być dłuższy. Inwertaza drożdżowa wykazuje aktywność w przedziale temperatur od 20 °C do 60°C, przy czym w górnej granicy jest ona niższa. Swoja najwyższą wartość przyjmuje w temp. 37 °C natomiast w temp. 4 *C i 100 C inwertaza nie wykazuje żadnej aktywności.

Zadanie 3. Wpływ promieniowania UV na aktywność inwertazy drożdży.

Wykonanie:

Na szkiełko zegarkowe wlać 6 ml inwertazy z drożdży i poddać ją naświetlaniu promieniami ultrafioletowymi. Po czasie naświetlania: 0 sek., 10 sek., 20 sek., 30 sek., 1 min., 2 min., 3 min., 4 min. pobierać do kolejnych probówek po 0,5 ml roztworu inwertazy i do wszystkich ośmiu prób dodać 0,5 ml roztworu sacharozy w buforze octanowym o pH 4,7. Próby wymieszać i umieścić na 30 minut w temperaturze pokojowej. Po tym czasie zalkalizować próby paroma kroplami IM roztworu NaOH. Następnie we wszystkich mieszaninach wykonać próbę Benedicta. W tym celu do ośmiu czystych probówek dodać po 1 ml odczynnika Benedicta i do każdej z nich dodać 0,2 ml mieszaniny reakcyjnej. Probówki umieśdć na ok. 1-2 minuty we wrzącej łaźni wodnej.

Obserwacje:

Czas	Stopień zabarwienia
Os	+
10 s	++
20 s	+++
30 s	++
1 min	-
2 min	-