75576

Czynniki denaturujące białko.

Denaturacja białek polega na nieodwracalnym zniszczeniu w rożnym stopniu struktury II III i IV rzędowej, czyli jego natywnej konformacji co powoduje utratę specyficznych biologicznych aktywności białek. Często denaturacji białka towarzyszy jego wytracenie z roztworu. Nie zawsze jednak wytracenie mówi o denaturacji bo naprzyklad może być tylko wysolone.

Zachodzi pod wpływem czynników fizycznych jak i chemicznych.

Czynniki fizyczne:

-    wysoka temperatura

-    promieniowanie -ultradźwięki

-silne wstzasy mechaniczne Czynniki chemiczne:

-mocne kwasy nieorganiczne- spadek pH poniżej pl powoduje cofniecie dysocjacji grupy COOH dlatego eliminowane sa wiazania jonowe w kotnych brała udział grupa karboksylowa.

-    zasady nieorganiczne

-    niekotre kwasy organiczne -rozpuszczalniki organiczne( alkohol, aceton)

-kationy metali ciezkich-

-detergenty

W zależności od intensywności działania tych czynników (czasu działania) wartość zmian denaturacyjnych może być rożna; zniszczenia mogą obejmować czesc lub calosc odzialywan stabilizujących konformacje białka.

Czynnikami denaturacyjnymi używanymi w doświadczeniach SA.

+ 8M roztwór mocznika lub 6M rozt chlorowodorku guanidyny—zrywaja one wiazania niekowalencyjne

+siarczan dodecylu sodu SDS niszczący wszelkie wizania niekowalencyjne.