84531

S Po dokładnym wymieszaniu mieszanin z probówki „E” pobrano 2ml mieszaniny i dodano do probówki wirówkowej nr 1. natomiast 2ml mieszaniny pobranej z probówki chemicznej „E+I” przeniesiono do probówki wirówkowej nr8.

S Zawartość probówek wirówkowych dokładnie wymieszano.

S Jednocześnie kontynuowano inkubację probówek chemicznych „E" i „E+r w 37°C

S Z probówek „E” oraz „E+I”, pobierano dokładnie po 2ml mieszaniny z probówki „E” do kolejnych probówek wirówkowycli nr: 2. 3. 4. 5. 6. 7 oraz dokładnie po 2ml mieszaniny z probówki „E+I" do kolejnych probówek wirówkowych m: 9. 10. 11. 12, 13. 14. Roztwory pobierano odpowiednio po 2.4, 6, 12, 18. 24 minutach od rozpoczęcia inkubacji.

S Przygotowano odpowiednią liczbę probówek wirówkowych, które podczas wirowania były przeciwwagami. Probówki zrównoważono wobec siebie na wadze analitycznej.

S Mieszaniny zawarte w probówkach wirówkowych wirowano przez 10 min przy 3500 obr./min.

S W tym czasie przygotowano odczynnik miedziowy poprzez zmieszanie lOOml odczynnika miedziowego A z 2ml odczynnika B.

S Do 14 ponumerowanych probówek chemicznych odmierzono po 1 ml klarownego supematantu odpowiednio z każdej odwirowanej mieszaniny.

S Do każdego pizesączu w probówkach dodano po 5ml odczyiuiika miedziowego. Po dodaniu odczyiuiika miedziowego do probówki chemicznej nr 1 i wymieszaniu, zaczęto odmierzać czas 7 min dla tej próbki. Tak samo postępowano z następnymi próbkami.

S Odczyiuiik miedziowy dodawano do próbek w odstępie 30’ ’

S Po upływie 7 min od momentu rozpoczęcia reakcji dla pizesączu nr 1 z odczynnikiem miedziowym, dodawano po 0.5ml odczynnika Folina-Ciocalteu, mieszając dokładnie próby.

S W momencie dodania odczynnika Folina-Ciocalteu do próby nr 1 zaczęto odmierzać czas 20 min dla tej próbki. Tak samo postępowano z następnymi próbkami.

S W tym czasie kilkukrotnie mieszano wszystkie próby.

S Po upływie 20 min inkubacji dla każdej próby odczytano absorbancję przy długości fali 750nm dla prób 2-7, dla których odnośnikiem była próba 1 oraz dla prób 9-14 z próbą iu 8 jako odnośnikiem.

5. Tabele pomiarowe

Nr próbki		czas reakcji (mini	A?J0
E	E+I		E	E+I
1	8	0	odnośnik	odnośnik
2	9	2	0.154	0,019
3	10	4	0,294	0,073
4	II	6	0,348	0,147
5	12	12	0,415	0,184
6	13	18	0.395	0.245
7	14	24	0,376	0,344

6. Analiza wyników i wnioski