518321744

2.3.3.    Wykorzystanie spektroskopii w podczerwieni (IR) do badania struktur tautomerycznych

produktów rekacji 2-amino-l-metylobenzimidazolu (MABI) i izotiocyjanianów (ITC)_ 71

2.3.4.    Zastosowanie rentgenowskiej analizy strukturalnej do badania struktury krystalograficznej produktów reakcji 2-amino-l-metylobenzimidazolu (MABI)

i izotiocyjanianów (ITC)_ 71

2.4.    Analiza próbek roztworów tiomoczników ITC-MeIQx z wykorzystaniem techniki HPLC-

DAD pod kątem ich identyfikacji i sprawdzenia czystości_ 72

2.5.    Ocena mutagenności tiomoczników ITC-MeIQx i MeIQx z wykorzystaniem testu Amesa

w wersji mikropłytkowej MPF_ 72

2.5.1.    Przygotowanie szczepu Salmonella typhimurium TA98 do oznaczeń mutagenności _ 73

2.5.2.    Inkubacja szczepu Salmonella typhimurium TA98 z tiomocznikami ITC-MeIQx

i heterocykliczną aminą aromatyczną MeIQx_ 73

2.5.3.    Oznaczenie liczby rewertantów_ 75

2.5.4.    Analiza statystyczna _ 76

2.6.    Badania nad opracowaniem metodyki oznaczania izotiocyjanianów (ITC) w próbkach

soków z kapusty z wykorzystaniem derywatyzacji za pomocą N-acetylo-L-cysteiny (NAC)_ 76

2.6.1.    Przygotowanie próbek soków z kapusty do badań _ 76

2.6.2.    Synteza substancji wzorcowych ditiokarbaminianów na drodze kondensacji

izotiocyjanianów allilu (AITC), benzylu (BITC) orazfenyloetylu (PEITC) z N-acetylo-L-cysteinq (NAC)_77

2.6.3.    Synteza ditiokarbaminianu PITC-NAC używanego jako wzorzec wewnętrzny na drodze

kondensacji izotiocyjanianu fenylu (PITC) i N-acetylo-L-cysteiny (NAC)_ 78

2.6.4.    Określenie długości fali absorpcji odpowiadającej maksimum absorpcji

ditiokarbaminianów ITC-NAC_ 78

2.6.5.    Wykorzystanie spektroskopii magnetycznego rezonansu jądrowego (NMR)

i spektrometrii mas (MS) do identyfikacji związków powstających podczas reakcji chemicznych izotiocyjanianów (ITC) z N-acetylo-L-cysteiną (NAC)_79

2.6.6.    Synteza związków z grupy NAC-ITC po derywatyzacji izotiocyjanianów (ITC)

za pomocą N-acetylo-L-cysteiny (NAC) w próbkach materiału roślinnego_ 81

2.6.7.    Oznaczanie izotiocyjanianów (ITC) w próbkach soków z kapusty z wykorzystaniem

substancji wzorcowych otrzymanych na drodze syntezy_ 82

2.7.    Procedury wykorzystywane na etapie wyznaczania całkowitej zawartości

izotiocyjanianów (ITC) w próbkach soków z kapusty przy utyciu metodyki Zhanga_ 83

2.7.1.    Synteza substancji wzorcowej 1,3-benzenodiolo-2-tionu na drodze kondensacji

izotiocyjanianów (ITC) zi 1,2-benzenoditiolem_ 83

2.7.2.    Wykorzystanie spektroskopii magnetycznego rezonansu jądrowego (NMR) do identyfikacji związków powstających podczas reakcji izotiocyjanianów (ITC)

z 1,2-benzenoditiolem_ 83

2.7.3.    Oznaczanie izotiocyjanianów (ITC) w próbkach soków z kapusty z wykorzystaniem

techniki HPLC-DAD___ 83

. WYNIKI I WNIOSKI_ 85

3.1.    2-aminobenzimidazol (ABI) jako strukturalny analog heterocyklicznych amin

aromatycznych (HAA) i jego koniugaty z izotiocyjanianami (ITC)_ 85

3.2.    2-amino- I-metylobenzimidazol (MABI) jako strukturalny analog heterocyklicznych

amin aromatycznych (HAA) i jego koniugaty z izotiocyjanianami (ITC) _ 87

3.3.    Otrzymanie tiomoczników AITC-MABI, BITC-MABI oraz PEITC-MABI_ 87

3.3.1.    Reakcja 2-amino-l-metylobenzimidazolu (MABI) z izotiocyjanianem allilu (AITC),

izotiocyjanianem benzylu (BITC) i izotiocyjanianem fenyloetylu (PEITC)_ 87

3.3.2.    Zastosowanie techniki spektroskopii magnetycznego rezonansu jądrowego (NMR)

na etapie identyfikacji tiomoczników AITC-MABI, BITC-MABI oraz PEITC-MABI_ 92

3.3.3.    Zastosowanie techniki spektroskopii w podczerwieni (IR) na etapie badania struktury

tautomerów tiomoczników AITC-MABI, BITC-MABI oraz PEITC-MABI _ 96

3.3.4.    Zastosowanie rentgenowskiej analizy strukturalnej na etapie badania struktury

krystalograficznej tiomoczników AITC-MABI, BITC-MABI oraz PEITC-MABI_ 98

3.4.    Reakcje 2-amino-3,8-dimetyloimidazo[4,5-f]chinoksaliny (MeIQx) z izotiocyjanianem

allilu (AITC), izotiocyjanianem fenyloetylu (PEITC) i sulforafanem (SFN) _ 104

3.4.1.    Synteza tiomoczników AITC-MelQx, PEITC-MeIQx oraz SFN-MeIQx_ 104

3.4.2.    Zastosowanie spektroskopii magnetycznego rezonansu jądrowego (NMR) na etapie

identyfikacji tiomoczników AITC-MeIQx, PEITC-MeIQx oraz SFN-MeIQx_ 108