Tabela 5.
Akceptowalna różnica w odsetkach uzyskanych z poszczególnych dwóch zliczeń dla ich średniej.
Średnia (%) |
Akceptowalna różnica |
0 |
1 2 |
2 |
3 |
3-4 |
4 |
5-7 |
5 |
8-11 |
6 |
12-16 |
7 |
17-23 |
8 |
24-34 |
9 |
35-65 |
10 |
66-76 |
9 |
77-83 |
8 |
84-88 |
7 |
89-92 |
6 |
93-95 |
5 |
96-97 |
4 |
98 |
3 |
99 |
2 |
100 |
1 |
n= suma siatek, w których zliczano plemniki w obu komorach Wynik otrzymujemy w mln/ml.
Jeśli w preparacie bezpośrednim nie znaleziono plemników, należy próbkę odwirować (15 min. 3000xg). Osad rozprowadzamy na szkiełku podstawowym, przykrywamy szkiełkiem nakrywkowym i oglądamy cały preparat w poszukiwaniu plemników. Jeśli nie znaleziono żadnego plemnika, w wyniku wpisujemy azoospermia (brak plemników w ejakulacie). Jeśli w osadzie znaleziono pojedyncze plemniki, w wyniku wpisujemy kryptozoospermia.
Ocena żywotności plemników
Badanie odsetka żywych plemników ocenia się poprzez identyfikację plemników z nienaruszoną integralnością błony komórkowej. Ocenę można wykonywać rutynowo we wszystkich próbkach nasienia, jednak wymagane jest jej wykonanie w próbkach, gdzie ruch postępowy plemników był poniżej wartości referencyjnych (tzn. < 40% plemników poruszających się ruchem postępowym).
Ocena żywotności plemników powinna być wykonana zaraz po upłynnieniu próbki, najlepiej w czasie do 30 min., jednak nie później niż w ciągu 60 min. od ejakulacji.
Zalecane testy oceny żywotności plemników:
a) test eozyna-nigrozyna
b) przyżyciowy test eozynowy
c) test pęcznienia plemników (HOS test, ang. hypo-osmotic swelling test)
Test eozyna-nigrozyna oraz przyżyciowy test eozynowy opierają się na zasadzie przepuszczalności błony komórkowej martwego plemnika dla barwnika. Nigrozyna jest uży-
Tabela 6.
Wartości referencyjne dla parametrów nasienia wg WHO 2010.
Badanie nasienia
Parametr
objętość ejakulatu (ml) całkowita liczba plemników (10E/ejakulat) koncentracja plemników (106/ ml) całkowity ruch plemników (%) ruch postępowy plemników (%) żywe plemniki (%)
prawidłowa morfologia plemników (%)
Dolne wartości referencyjne
1.5
39 15
40 32 58
czas upłynnienia ejakulatu PH
leukocyty peroksydazo-dodatnie (106/ ml) komórki okrągłe (106/ ml)
Dodatkowe testy
Pozostałe, uzgodnione wartości progowe do 60 min.
MAR-test
(% ruchomych plemników związanych z kuleczkami) Immunobead test
(% ruchomych plemników związanych z kuleczkami)
Testy biochemiczne plazmy nasienia
cynk (pmol/ejakulat) fruktoza (pmol/ejakulat) a-glukozydaza obojętna (mU/ejakulat)
167