1588094231

1588094231



poliakrylamidowym.

2.    Kapilarny lub elektryczny transfer DNA z żelu na filtr nylonowy.

3.    Hybrydyzacja przeniesionego na filtr DNA z wyznakowanym (zazwyczaj radioaktywnie) fragmentem kwasu nukleinowego, komplementarnym do poszukiwanej cząsteczki DNA.

Northern

Detekcja RN A

1.    Rozdział RNA w denaturującym żelu agarozowym lub poliakrylamidowym.

2.    Kapilarny lub elektryczny transfer RNA na filtr nylonowy.

3.    Hybrydyzacja przeniesionego na filtr RNA z wyznakowanym (zazwyczaj radioaktywnie) fragmentem kwasu nukleinowego, komplementarnym do poszukiwanej cząsteczki RNA.

Western

Detekcja białek

1.    Rozdział białek w żelu poliakryloamidowym.

2.    Elektryczny transfer białek na filtr nitrocelulozowy.

3.    Wykrywanie danych białek za pomocą specyficznych przeciwciał i skierowanych przeciwko nim przeciwciał drugorzędowych, których obecność można wykryć przy użyciu odpowiednich systemów detekcji (np. poprzez aktywność enzymu dołączonego do przeciwciała).

5. DYSRUPCJA GENÓW

Ostatecznym celem analizy genu jest poznanie funkcji jego produktu w organizmie. Dowodem na udział białka czy składnika rybonukleinowego w danym szlaku metabolicznym jest zaburzenie tego procesu spowodowane brakiem funkcji badanego czynnika.

U drożdży S. cerevisiae stosuje się wiele metod służących do „wyłączania” ekspresji genu. Dla genów, których produkty są niezbędne do życia komórki można uzyskać mutanty warunkowe, na przykład temperaturowrażliwe (ts - temperaturę sensitive i cs - cold sensitive) lub geny te umieszcza się pod kontrolą promotorów reprymowalnych lub indukowalnych (na przykład promotorów galaktozowych i tetracyklinowych). Natomiast funkcja większości pozostałych genów jest badana w mutantach, w których dany gen został zinaktywowany przez delecję lub insercję.



Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
Transfer DNA z żelu agarozowego na filtr nylonowy (Southern biot) Materiały: -    fil
Zakład Biologii Molekularnej UMCS, luty 2015 ELEKTROFORETYCZNY ROZDZIAŁ DNA W ŻELU AGAROZOWYM Agaroz
Elektrody są wykonane głównie z miedzi, mosiądzu lub grafitu, a cieczą dielektryczną jest na ogół na
5 (675) iA.ruuais elektroforezy DNA w żelu migruje: a- od (+) do (-) b- od (-) do (+) c- to zal
00 Ćwiczenie 10.37. Elektroforeza DNA w żelu agarozowym (J. Sambrook i wsp. 1989: Molecular cloning
CCF20150312008 (2) elektroporacja - czyste DNA wprowadzane do zawiesiny komórek (komórki krwiotwórc
Elektryczne zespoły trakcyjne eksploatowane na PKP mogą być trójczłonowe (EN57) lub czteroczłonowe
Img00146 150Powłoki ochronne 2.109. Powłoki ochronne mogą być wytwarzane chemicznie lub elektrochemi
3tom138 4. STACJE ELEKTROENERGETYCZNE 278 W rozwiązaniu podanym na rys. 4.14a, zwanym układem grzebi
3tom174 5. ELEKTROENERGETYKA PRZEMYSŁOWA 350 Jeżeli na odbiór 110 kV lub SN składają się odbiorniki
Elektrofereza 3. Elektroforeza3.1. Wiadomości ogólne Cząsteczki DNA, posiadające na swej powierzchni
DSC01332 (12) ELEKTRONÓW W komórce transfer elektronów w reakcji redoks z donora na akceptor zachodz
Utrzymanie szlaku żeglownego polegająca na: •    zachowaniu lub odtworzeniu stanu dna

więcej podobnych podstron