2906542934

190 W. MAKAREWICZ [22]

także badając glikozę w ekstrakcie z mięśnia sercowego wołu. Wykazano, że za takie oscylacje odpowiedzialne są właściwości regulacyjne fosfofruk-tokinazy — enzymu katalizującego reakcję ograniczającą prędkość ciągu glikolitycznego (85).

Tornheim i Lowenstein (25, 52) badając in vitro cykl nukleo-tydów purynowych w ekstraktach z mięśni szkieletowych szczura, zaobserwowali oscylacyjne zmiany stężeń AMP, adenylobursztynianu i IMP. Oscylacje stężeń metabolitów cyklu nukleotydów purynowych były zsyn-

Czas (min.)

Ryc. 7. Oscylacje całkowitego stężenia nukleotydów adeninowych, IMP oraz glukozo--6-fosforanu, fruktozo-6-fosforanu, fruktozo-l,6-awufcsforanu, fosfodwuhydroksyacetonu i aldehydu 3-fosfoglicerynowego w przebiegu cyklu nukleotydów purynowych w ekstrakcie z mięśni szkieletowych szczura (52).

Mieszanina inkubacyjna zawierała: 0,5 mM ATP; 0,3 mM GTP; 4 mM asparaginian; 0.03 j/ml heksokinazy drożdżowej; 1 nM NAD+; 7,5 mM ortofosforan; 27 mM bufor imidazol-HCl pH 6,6; 8,3 mM MgCl₂. Reakcję rozpoczynało dodanie bezpośrednio po sobie ekstraktu mięśniowego w ilości 1,3 mg białka na mililitr i glukozy o stężeniu 10 mM. Wraz z ekstraktem mięśniowym wprowadzono dodatkowo do mieszaniny inkubacyjnej: KC1 47 mM; EDTA 0,83 mM; ditiotreitol 17 nM i ortofosforan 2,5 mM. Temperatura inkubacji 30°C.