3071580082

Na pierwszą nanosimy próbkę aminokwasu oraz otrzymaną próbkę a na drugą monosacharyd oraz otrzymaną próbkę. Płytkę pierwszą wywołuje się przez spryskanie roztworem ninhydryny a następnie wygrzewanie w podwyższonej temperaturze. Aminokwasy wybarwiają się na kolor czerwony do fioletowego. Płytkę z naniesionym monosacharydem wybarwia się przez spryskanie roztworem kwasu siarkowego i wygrzanie w podwyższonej temperaturze. Monosacharydy wybarwiają się na kolor od zielonego do czarnego. Porównać reakcje barwne wzorców z próbką.

Uwaga: wygrzewanie należy przeprowadzić ostrożnie, zbyt gwałtowne ogrzanie może doprowadzić do ściemnienia całej powierzchni płytki, co uniemożliwi obserwację plamek.

III. Analiza jakościowa - właściwa analiza TLC

Na płytce o wymiarach 4x3 cm zaznaczamy cztery punkty startowe w odległości ok. 0,5 cm jeden od drugiego. Na zaznaczone punkty nanosimy roztwory wzorcowe w kolejności: aminokwas, monosacharyd, amina aromatyczna oraz roztwór próbki badanej. Płytkę umieszczamy w komorze zawierającej roztwór B metanokchloroform (1:4). Po rozwinięciu, wywołujemy osuszoną płytkę w jodzie. Obrysowujemy powstałe plamki. Obliczamy Rf. Następnie desublimujemy jod z powierzchni płytki poprzez wygrzanie strumieniem ciepłego powietrza. Płytkę spryskujemy roztworem ninhydryny, wygrzewamy i obrysowujemy powstałe plamki. Postępujemy analogicznie z roztworem kwasu siarkowego.

Na podstawie względnego położenia plamek i ćwiczenia II należy określić prawdopodobną przynależność związku nieznanego do jednej z trzech klas: aminokwasy, aminy aromatyczne, monosacharady.

Zaliczenie ćwiczenia

Zaliczenie ćwiczenia następuje po poprawnym wykonaniu wszystkich trzech składowych elementów analizy TLC, na podstawie opracowanego sprawozdania (wnioski!!!), oraz pozytywnym napisaniu kolokwium zaliczeniowego.

UWAGA: Na ćwiczenia każdy student powinien przynieść: okulary, fartuch, rękawiczki np. lateksowe, ołówek, linijkę, nożyczki, taśmę klejąca. Dodatkowo na grupę -mydło, płyn do mycia naczyń i ścierkę. Jest to warunkiem przystąpienia do zajęć!!!!!!!!!!