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Planches pour le diagnostic microscopique du paludisme

Planche 10a

Organisation mondiale de la Sante

Coloration rapide des frottis sanguins pour la recherche des parasites du paludisme

On considere que la coloration au Giemsa est la reference pour le diagnostic des infections palustres au microscope, mais les colo-rations rapides peuvent ćgalement jouer un role utile lorsqu’il faut examiner d urgence une goutte ćpaisse. Dans la plupart des cas, les colorations rapides sont a base d eau et ont une propension au developpement des moisissures. Une filtration regułiere aide a lutter contrę cet inconvćnient. En generał, la coloration est tres satisfaisante et dc nombreux laboratoires utilisent couramment ces methodes. Nous allons decrire ici la coloration de Field, mais il existe d autres techniques, comme JSB et Wright (voir les references bibliographiques).

Preparations des solutions-meres pour la coloration de Field

On utilise ces Solutions pour la detection rapide des parasites du paludisme dans la goutte ćpaisse: le cytoplasme se colore en bleu, la chromatine en rouge, les granulations de Schiiffner napparaissent pas toujours clairement et la qualite de la coloration peut etre inegale d une partie a lautre du frottis, en partie a cause des differences d’epaisseur. Les Solutions A et B utilisees pour cette methode peuvent etre preparees a partir de poudres pretes a Femploi.

Solution-mere du colorant A de Field:

■    Mettre 5,9 g de poudre de colorant A de Field dans 600 ml deau distillee chaude (a 60 °C).

■    Melanger jusqu’a dissolution.

■    Filtrer a froid.

Solution-mere du colorant B de Field

■    Mettre 4,8 g de poudre de colorant B de Field dans 600 ml d eau distillee chaude (a 60 °C).

■    Melanger jusqu'a dissolution.

■    Filtrer a froid.

Coloration de Field de la goutte epaisse

II ne faut pas fixer la goutte epaisse.

■    Tremper le frottis pendant 4 secondes dans une cuve de Coplin remplie de colorant A de Field.

■    Rincer doucement a leau proprependant 5 secondes.

■    Tremper la lamę prendant 4 secondes dans la cuve remplie de colorant B de Field.

■    Rincer doucement le frottis a leau propre pendant 5 secondes.

■    Laisser secher a Fair librę sur un ratelier.

Coloration de Field des frottis

■    Fixer le frottis au methanol pendant une minutę.

■    Rincer a leau propre.

■    Couvrir le frottis de colorant B de Field dilue (1 volume de solution-mere dans quatre volumes deau tamponnee a pH 7,2).

■    Ajouter immediatement un volume egal de colorant A de Field et bien melanger le tout en remuant la lamę.

■    Laisser colorer une minutę.

■    Rincer le colorant avec de leau propre.

■    Laisser secher a Fair librę sur un ratelier.

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