na tym, że do rozpoczęcia PCR niezbędna jest znajomość początkowego i końcowego fragmentu DNA, który ma być powielany, a niewymagana jest obecność wektorów ani bakterii. W przypadku klonowania sytuacja jest dokładnie odwrotna Wykorzystanie PCR: badanie śladów zbrodni, diagnostyka chorób oraz zakażeń wirusowych u roślin i zwierząt, kontrolowanie pochodzenia żywności (rozróżnianie żywności transgenicznej i nietransgenicznej)
Organizmy transgeniczne
Organizm transgeniczny to taki, którego wszystkie komórki zawierają w swoich chromosomach transgen (obcy fragment DNA) wprowadzony za pomocą metod inżynierii genetycznej (transformacja) = GMO
6 Otrzymywanie roślin transgenicznych z zastosowaniem plazmidu Ti
Warunek: transgen musi być w komórce transkrybowany, a jego transkrypt wykorzystywany w komórce do syntezy
białka (obecność w transgenie genu kodującego białko oraz promotora pozwalającego na jego transkrypcję) Cel: zmiana właściwości organizmu, do którego wprowadzany jest transgen poprzez ekspresję zawartej w nim informacji
Otrzymywanie roślin transgenicznych
■S Z wykorzystaniem plazmidu Ti z bakterii Agrobacterium tumefaciens, po usunięciu z niego fragmentu DNA odpowiedzialnego za wywoływaną przez te bakterie chorobę roślin,
S Przy użyciu strzelby genowej z kuleczkami złota, do których przylepione są fragmenty DNA, które po wniknięciu do komórki dostają się do jądra i są włączane do genomu Wprowadzanie obcego DNA do komórek zwierzęcych (nie są to organizmy transgeniczne!)
S Zakażanie komórek wirusem pozbawionym sekwencji DNA