W przypadku próbki naniesionej na reflektor w postaci cienkiej warstwy kąt dostrojenia powinien być mniejszy od kąta krytycznego (50-70%). Kąt padania wiązki wzbudzającej powinien być tak ustawiony, aby nie nastąpiła zbyt głęboka penetracja materiału reflektora, gdyż spowodowałoby to zwiększenie sygnału tła. Z kolei przy zbyt małym kącie materiał próbki nie zostanie wzbudzony i intensywność sygnału będzie zbyt niska. Schematycznie sytuację tę pokazuje rysunek 3.
Wiązka padająca |
Wiązka odbita |
pod różnymi |
wnikająca na różną |
kątami |
głębokość |
materiału _ | |
d ^ |
^ =r |
Rys.3. Schematyczne przedstawienie zależności głębokości penetracji wiązki wzbudzającej od kąta jej padania.
Optycznie gładka powierzchnia sprawia, że udział promieniowania rozproszonego dyfuzyjnie jest dużo mniejszy od rozproszonego z udziałem zwierciadlanego odbicia [2]. Dzięki temu - poprzez redukcje promieniowania rozproszonego następuje polepszenie stosunku sygnału do tła. Próbka wzbudzana jest zarówno przez wiązkę padającą jak i odbitą, co w efekcie zwiększa wydajność fluorescencji. Geometria pomiarowa umożliwia położenie próbki w odległości około lmm od okienka detektora, co dodatkowo wpływa korzystnie na intensywność sygnału obniżając absorpcję w powietrzu.
13