BIOCHEMIA DŻEJ DŻEJA by JJ Jernajczyk

background image

Biochemia

Dżej Dżeja

1

J. J. Jernajczyk

Poznań 2014

background image

SPIS TREŚCI:

1. AMINOKWASY:

4

- BIOSYNTEZA AMINOKWASÓW ENDOGENNYCH................................................... 4

- PRZEMIANY SZKIELETÓW WĘGLOWYCH AMINOKWASÓW

6

- PRZEMIANA AMINOKWASÓW W INNE PRODUKTY O FUNKCJACH
BIOLOGICZNYCH............................................................................................................... 12

2. ZWIĄZKI AZOTOWE:

16

- PURYNY................................................................................................................................16

- PIRYMIDYNY

18

- BILANS AZOTOWY I CYKL MOCZNIKOWY..............................................................20

3. WĘGLOWODANY:

24

- GLIKOLIZA.........................................................................................................................24

- CYKL KWASU CYTRYNOWEGO

26

- GLIKOGENOGENEZA......................................................................................................29

- GLIKOGENOLIZA

29

- GLUKONEOGENEZA...................................................................................................... 30

- SZLAK PENTOZOFOSFORANOWY

33

- SZLAK KWASU URONOWEGO...................................................................................... 34

- FRUKTOZA

35

- GALAKTOZA...................................................................................................................... 36

- AMINOCUKRY

36

4. LIPIDY:............................................................................................................................... 38

- BIOSYNTEZA KWASÓW TŁUSZCZOWYCH

38

- β-OKSYDACJA KWASÓW TŁUSZCZOWYCH............................................................ 39

- KETOGENEZA

40

- BIOSYNTEZA TRIACYLOGLICEROLI I POCHODNYCH LIPIDÓW.....................41

2

background image

- TRAWIENIE LIPIDÓW

45

- CHOLESTEROL................................................................................................................. 46

- LIPOPROTEINY

48

- POCHODNE CHOLESTEROLU...................................................................................... 50

5. ŁAŃCUCH ODDECHOWY

56

6. ENZYMY............................................................................................................................. 61

7. WITAMINY I KOENZYMY

66

8. HORMONY PRZYSADKI................................................................................................ 72

3

background image

1. AMINOKWASY

Aminokwasy egzogenne:

- Izoleucyna (Ile) [I]
- Leucyna (Leu) [L]
- Lizyna (Lys) [K]
- Metionina (Met) [M]
- Fenyloalanina (Phe) [F]
- Treonina (Thr) [T]
- Tryptofan (Trp) [W]
- Walina (Val) [V]
- Histydyna (His) [H]

- Arginina (Arg) [R] jest syntetyzowana przez ludzki organizm, ale w trakcie rozwoju szybkość tej
syntezy jest niewystarczająca do pokrycia zapotrzebowania organizmu dziecka

Aminokwasy endogenne:

- Alanina (Ala) [A]
- Asparagina (Asn) [N]
- Asparaginian (Asp) [D]
- Cysteina (Cys) [C]
- Glutaminian (Glu) [E]
- Glutamina (Gln) [Q]
- Glicyna (Gly) [G]
- Prolina (Pro) [P]
- Seryna (Ser) [S]
- Tyrozyna (Tyr) [Y]

- Hydroksyprolina i hydroksylizyna powstają podczas syntezy kolagenu w wyniku zmian
potranslacyjnych.

BIOSYNTEZA AMINOKWASÓW ENDOGENNYCH:

1. Glutaminian.
α-ketoglutaran + NH

4

+

+ NADH + H

+

-> glutaminian + H

2

O + NAD

+

enzym: dehydrogenaza glutaminianowa
- dehydrogenaza glutaminianowa może wykorzystywać także NADP

2. Glutamina.
glutaminian + NH

4

+

+ ATP -> glutamina + ADP + Pi

enzym: syntetaza glutaminowa

3. Alanina.
pirogronian + glutaminian <-> alanina + α-ketoglutaran
lub

4

background image

pirogronian + asparaginian <-> alanina + szczawiooctan
enzym: aminotransferaza alaninowa

4. Asparaginian.
alanina + szczawiooctan <-> pirogronian + asparaginian
enzym: aminotransferaza alaninowa

5. Asparagina.
asparaginian + glutamina + ATP -> asparagina + glutaminian + AMP + PPi
enzym: syntetaza asparaginowa

6. Seryna.
3-fosfo-D-glicerynian + NAD

+

-> fosfohydroksypirogronian + NADH + H

+

fosfohydroksypirogronian + α-aminokwas -> fosfo-L-seryna + α-ketokwas

fosfo-L-seryna + H

2

O -> L-seryna + Pi

Seryna może także powstawać z glicyny:
glicyna + metylenotetrahydrofolian -> seryna + tetrahydrofolian
enzym: hydroksymetylotransferaza serynowa

7. Glicyna.
Z choliny:
cholina -> aldehyd betainy -> betaina -> dimetyloglicyna -> sarkozyna -> glicyna

Z CO2:
CO

2

+ NH

4

+

+ metylenotetrahydrofolian + NADH + H

+

-> glicyna + tetrahydrofolian + NAD

+

Z glioksalanu:
glioksalan + glutaminian -> glicyna + α-ketoglutaran
lub
glioksalan + alanina -> glicyna + szczawiooctan
enzym: aminotransferaza glicynowa

8. Prolina.
glutaminian + NADH + H

+

-> glutamylo-γ-semialdehyd + H

2

O + NAD

+

glutamylo-γ-semialdehyd + NADH + H

+

-> prolina + H

2

O + NAD

+

9. Cysteina.
metionina + ATP + H

2

O -> S-adenozylometionina + PPi + Pi

enzym: adenozylotransferaza L-metioninowa

S-adenozylometionina + akceptor grupy metylowej -> S-adenozylohomocysteina + CH

3

-akceptor

S-adenozylohomocysteina + H

2

O -> homocysteina + adenozyna

L-homocysteina + L-seryna -> cystationina + H

2

O

enzym: β-syntaza cystationinowa

5

background image

cystationina + H

2

O -> L-cysteina + L-homoseryna

10. Tyrozyna.

fenyloalanina + O

2

+ tetrahydrobiopteryna -> tyrozyna + H

2

O + dihydrobiopteryna

enzym: hydroksylaza fenyloalaninowa

dihydrobiopteryna + NADPH + H

+

-> tetrahydrobiopteryna + NADP

+

11. Hydroksyprolina i hydroksylizyna to prolina i lizyna poddane reakcji hydroksylacji dopiero po
wbudowaniu do peptydu. Hydroksylacja ta odbywa się kosztem przemiany α-ketoglutaranu w
bursztynian. Enzymami są odpowiednio: hydroksylaza prolilowa i hydroksylaza lizylowa,
wymagające do działania witaminy C. Brak witaminy C uniemożliwia syntezę kolagenu i
powoduje szkorbut.

Selenocysteina:

- jest 21. aminokwasem białkowym

- znajduje się w miejscach aktywnych oksydoreduktaz i uczestniczy w ich aktywności
katalitycznej

- ma swoje specyficzne tRNA (w przeciwieństwie do hydroksyproliny i hydroksylizyny)

- powstawanie:
SeO

4

2-

+ ATP -> selenofosforan + AMP + Pi

enzym: syntetaza selenofosforanu

selenofosforan + seryna -> selenocysteina + Pi
Ta reakcja zachodzi już po połączeniu seryny z tRNA.

PRZEMIANY SZKIELETÓW WĘGLOWYCH AMINOKWASÓW:

- aminokwasy ketogenne: leucyna, izoleucyna, lizyna, fenyloalanina, tryptofan, tyrozyna –
przekształcają się do acetylo-CoA:

1. Fenyloalanina.
fenyloalanina + tetrahydrobiopteryna + O

2

-> tyrozyna + dihydrobiopteryna + H

2

O

enzym: hydroksylaza fenyloalaninowa

2. Tyrozyna.
tyrozyna + α-ketoglutaran <-> parahydroksyfenylopirogronian + glutaminian
enzym: aminotransferaza tyrozynowa
koenzym: fosforan pirydoksalu (witamina B

6

)

p-hydroksyfenylopirogronian + [O] -> homogentyzynian + CO

2

enzym: dioksygenaza parahydroksyfenylopirogronianowa

6

background image

koenzymy: witamina C, Cu

2+

homogentyzynian + [O] -> mealeiloaccetooctan
enzym: oksydaza homogentyzynianowa

maleiloacetooctan <-> fumaryloacetooctan

fumaryloacetooctan + H

2

O -> fumaran + acetooctan

enzym: fumaryloacetoacetaza

acetooctan + CoA-SH -> acetylo-CoA + octan

3. Lizyna.
lizyna -> sacharopina -> δ-semialdehyd-L-α-aminoadypinowy
enzym (do obu reakcji): syntaza semialdehydu aminoadypinowego

δ-semialdehyd-L-α-aminoadypinowy -> L-α-aminoadypinian -> α-ketoadypinian -> glutarylo-CoA
Zachodzi tu reakcja transaminacji, w wyniku której powstaje glutaminian, który może
przekształcać się w α-ketoglutaran i wchodzić do cyklu Krebsa (dlatego lizyna jest też
glukogenna).

glutarylo-CoA + NAD

+

-> krotonylo-CoA + NADH + H

+

+ CO

2

Krotonylo-CoA jest rozkładany do acetylo-CoA i CO

2

w procesie β-oksydacji kwasów

tłuszczowych.

4. Tryptofan.
tryptofan + O

2

-> N-formylokinurenina

enzym: oksygenaza tryptofanowa
inhibitor: pochodne kwasu nikotynowego (np. NADPH)
aktywator: Fe

2+

, tryptofan, kortykosteroidy

N-formylokinurenina + H

2

O -> kinurenina + mrówczan

enzym: formylaza kinureninowa

kinurenina -> 3-hydroksykinurenina

3-hydroksykinurenina -> 3-hydroksyantranian
enzym: kinureninaza
koenzym: fosforan pirydoksalu (witamina B

6

)

- w wypadku niedoboru witaminy B

6

3-hydroksykinurenina przekształca się w ksanturenian

3-hydroksyantranian -> -> α-ketoadypinian -> -> krotonylo-CoA (rozkładane do acetylo-CoA i CO

2

w procesie β-oksydacji)

- aminokwasy glukogenne: alanina, arginina, asparagina, asparaginian, cysteina, glutamina,
glutaminian, glicyna, histydyna, hydroksyprolina, metionina, prolina, seryna, treonina, walina -
przekształcają się do związków biorących udział w cyklu kwasu cytrynowego:

7

background image

* do pirogronianu:

1. Alanina.
alanina + α-ketoglutaran <-> pirogronian + glutaminian
enzym: aminotransferaza glutaminianowa

2. Treonina.
treonina -> aldehyd octowy + glicyna
enzym: aldolaza treoninowa

3. Glicyna.
glicyna + metylenotetrahydrofolian <-> seryna + tetrahydrofolian
enzym: hydroksymetylotransferaza serynowa

4. Seryna.
seryna -> pirogronian + NH

4

+

enzym: dehydrataza serynowa

5. Cysteina.
cystyna + NADH + H

+

<-> cysteina + NAD

+

enzym: reduktaza cystynowa

Cysteina ma 2 drogi przemian do pirogronianu:
A.cysteina -> cysteinosulfonian -> sulfinylopirogronian -> pirogronian

B. cysteina -> 3-merkaptopirogronian (tiolopirogronian) -> pirogronian + 3-merkaptomleczan

6. 4-hydroksyprolina.

* do α-ketoglutaranu:

1. Arginina.
arginina + H

2

O -> mocznik + ornityna

enzym: arginaza

ornityna + α-ketoglutaran -> γ-semialdehyd-L-glutaminowy + glutaminian
enzym: δ-aminotransferaza ornitynowa

2. Prolina.
prolina + NAD

+

+ H

2

O -> γ-semialdehyd-L-glutaminowy + NADH + H

+

enzym: dehydrogenaza prolinowa

γ-semialdehyd-L-glutaminowy + NAD

+

-> glutaminian + NADH + H

+

enzym: dehydrogenaza γ-semialdehydo-L-glutaminowa

3. Histydyna.
histydyna -> urokanian + NH

4

+

enzym: amoniakoliaza histydynowa (histydaza)

urokanian -> 4-imidazolono-5-propionian -> N-formiminoglutaminian (Figlu)

8

background image

Figlu + tetrahydrofolian -> glutaminian + N

5

-formiminotetrahydrofolian

enzym: formiminotransferaza glutaminianowa

4. Glutamina.
glutamina + H

2

O -> glutaminian + NH

4

+

enzym: glutaminaza

5. Glutaminian.
glutaminian + pirogronian -> α-ketoglutaran + alanina
enzym: aminotransferaza alaninowa

* do bursztynylo-CoA:
1. Izoleucyna (patrz niżej).
2. Walina (patrz niżej).

3. Metionina.
metionina + ATP + H

2

O -> S-adenozylometionina + PPi + Pi

enzym: adenozylotransferaza L-metioninowa

S-adenozylometionina + akceptor grupy metylowej -> S-adenozylohomocysteina + CH

3

-akceptor

S-adenozylohomocysteina + H

2

O -> homocysteina + adenozyna

L-homocysteina + L-seryna -> cystationina + H

2

O

enzym: β-syntaza cystationinowa

cystationina + H

2

O -> L-cysteina + L-homoseryna

Cysteina przekształca się w pirogronian (patrz wyżej).

L- homoseryna -> α-ketoizomaślan -> propionylo-CoA -> metylomalonylo-CoA -> bursztynylo-
CoA

* fumaran powstaje w reakcjach katabolizmu fenyloalaniny i tyrozyny (patrz wyżej)

* do szczawiooctanu:

1. Asparagina.
asparagina + H

2

O -> asparaginian + NH

4

+

enzym: asparaginaza

2. Asparaginian.
asparaginian + pirogronian -> szczawiooctan + alanina
enzym: aminotransferaza alaninowa

* katabolizm szkieletów węglowych aminokwasów o rozgałęzionych łańcuchach (leucyny,
izoleucyny i waliny)

9

background image

Pierwsze 3 reakcje przebiegają w ten sam sposób i przy użyciu tych samych enzymów:
I. Transaminacja.
enzym: odpowiednia aminotransferaza

II. Dekarboksylacja oksydacyjna.
enzym: dehydrogenaza α-ketokwasów o rozgałęzionych łańcuchach (aktywna, gdy jest
defosforylowana)

III. Dehydrogenacja.

W wyniku tych 3 procesów powstają odpowiednio:

leucyna -> β-metylokrotonylo-CoA
izoleucyna -> tyglilo-CoA
walina -> metakrylilo-CoA

Dalszy katabolizm:

A. Leucyny.
β-metylokrotonylo-CoA -> -> acetooctan + acetylo-CoA

W jednym z etapów koenzymem jest biotyna.

Leucyna jest tylko ketogenna!!

B. Izoleucyny.
tyglilo-CoA -> -> acetylo-CoA + propionylo-CoA

propionylo-CoA -> metylomalonylo-CoA -> bursztynylo-CoA

C. Waliny.
metakrylilo-CoA -> -> metylomalonylo-CoA + β-aminoizomaślan

metylomalonylo-CoA -> bursztynylo-CoA
Koenzymem w tej reakcji jest witamina B

12

.

!!! Izoleucyna, lizyna, fenyloalanina, tryptofan i tyrozyna są aminokwasami zarówno gluko- jak
i ketogennymi !!!

Choroby związane z katabolizmem szkieletów węglowych:

Choroba

Aminokwas Co jest uszkodzone?

Objawy

Hiperprolinemia typu I prolina

dehydrogenaza prolinowa

opóźnienie umysłowe

Hiperprolinemia typu II prolina

dehydrogenaza
semialdehydo-L-
glutaminowa

opóźnianie umysłowe, w
moczu występuje Δ

1

-pirolino-

3-hydroksy-5-karboksylan

Histydynemia

histydyna

amoniakoliaza histydynowa zwiększone stężenie histydyny

we krwi i w moczu

10

background image

Atrofia zakrętowa
siatkówki

ornityna

δ-aminotransferaza
ornitynowa

utrata widzenia obwodowego,
podwyższony poziom ornityny
w osoczu i moczu

Zespół
hiperornitynemii-
hiperamonemii

ornityna

transporter mitochondrialny
dla ornityny i cytruliny

zwiększone stężenie ornityny i
amoniaku we krwi

Glicynuria

glicyna

wchłanianie zwrotne
glicyny w kanalikach
nerkowych

zwiększone wydalanie glicyny
z moczem, szczawianowe
kamienie nerkowe

Pierwotna
hiperoksaluria

glicyna

katabolizm glioksalanu

kamica moczowa, wapnica
nerek, niewydolność nerek,
nadciśnienie

Sulfituria

cysteina

oksydaza siarczanowa

Disulfiduria 3-
merkaptopirogroniano-
cysteinowa

cysteina

siarkotransferaza 3-
merkaptopirogronianowa

cystynuria
(cystynolizynuria)

cystyna,
lizyna,
arginina,
ornityna

wchłanianie zwrotne
wymienionych
aminokwasów

cystynowe kamienie nerkowe,
wydalanie mieszanego
disiaczku L-cysteiny z L-
homocysteiną

Cystynoza

cystyna

funkcjonowanie lizosomów odkładanie się kryształów

cystyny w tkankach,
niewydolność nerek

Hiperfenyloalaninemia
typu I
(fenyloketonuria)

fenyloalanin
a

4-monooksygenaza
fenyloalaninowa
(hydroksylaza
fenyloalaninowa)

wydzielanie alternatywnych
katabolitów fenyloalaniny
(fenylomleczan,
fenylopirogronian, ...),
opóźnienie umysłowe, objawy
neurologiczne, zapach mysi

Hiperfenyloalaninemia
typu II i III

fenyloalanin
a

reduktaza
dihydrobiopterynowa

j.w.

Hiperfenyloalaninemia
typu IV i V

fenyloalanin
a

biosynteza
dihydrobiopteryny

j.w.

Tyrozynemia typu I
(tyrozynoza)

tyrozyna

hydrolaza
fumaryloacetooctanowa

niewydolność wątroby

Tyrozynemia typu II
(zespół Richnera -
Hanharta)

tyrozyna

aminotransferaza
tyrozynowa

Tyrozynemia
noworodków

tyrozyna

hydroksylaza para-hydro-
ksyfenylopirogronianu

Alkaptonuria

tyrozyna

oksydaza (1,2-
dioksygenaza)
homogentyzynianowa

mocz ciemnieje na powietrzu
(przez homogentyzynian),
zapalenie stawów, pigmentacja
tkanki łącznej

11

background image

Okresowa
hiperlizynemia z
hiperamonemią

lizyna

syntaza semialdehydu
aminoadypinowego (I
reakcja)

Trwała hiperlizynemia
bez hiperamonemii

lizyna

syntaza semialdehydu
aminoadypinowego (II
reakcja)

nadmiar sacharopiny we krwi

Choroba Hartnupa

tryptofan

wchłanianie tryptofanu

niedobór niacyny, pelagra -
zapalenie skóry, objawy
neurologiczne

Homocystynuria typu I metionina

β-syntaza cystationinowa

Homocystynuria typu
II

metionina

reduktaza N

5

,N

10

-

metylenotetrahydrofoliano
wa

Homocystynuria typu
III

metionina

synteza metylokobalaminy

Homocystynuria typu
IV

metionina

wchłanianie kobalaminy

Hipermetioninemia

metionina

adenozylotransferaza
metioninowa (w wątrobie)

Cystationuria

metionina

γ-liaza cystationinowa
(cystationaza)

Ketonuria łańcuchów
rozgałęzionych – może
być zwykła lub
nawracająca
(łagodniejsza)

leucyna,
izoleucyna,
walina

dekarboksylaza α-
ketokwasów

mocz o zapachu syropu
klonowego, dużo Leu, Ile, Val,
α-ketokwasów i α-
hydroksykwasów w osoczu i
moczu

acydemia
izowalerianowa

leucyna

dehydrogenaza
izowalerylo-CoA

wymioty, kwasica i śpiączka
po spożyciu nadmiaru białka

acyduria
metylomalonylowa

izoleucyna,
walina,
metionina

mutaza metylomalonylo-
CoA przez niedobór
witaminy B

12

kwas metylomalonowy w
moczu

acydemia
propionianowa

izoleucyna,
walina,
metionina

karboksylaza propionylo-
CoA

podwyższony poziom
propionylo-CoA we krwi

PRZEMIANA AMINOKWASÓW W INNE PRODUKTY O FUNKCJACH
BIOLOGICZNYCH:

1. Katecholaminy.
fenyloalanina + tetrahydrobiopteryna + O

2

-> tyrozyna + dihydrobipteryna + H

2

O

tyrozyna + tetrahydrobiopteryna -> DOPA + dihydrobiopteryna
enzym: 3-monooksygenaza tyrozynowa

12

background image

DOPA -> dopamina + CO

2

enzym: dekarboksylaza DOPA
koenzym: fosforan pirydoksalu (witamina B

6

)

dopamina + O

2

-> noradrenalina

enzym: β-oksydaza dopaminowa
koenzym: witamina C, Cu

2+

noradrenalina + S-adenozylometionina -> adrenalina + S-adenozylohomocysteina
enzym: N-metylotransferaza fenyloetanoloaminowa

- katabolizm:
adrenalina -> metanefryna
enzym: O-metylotransferaza katecholowa (COMT)

metanefryna -> kwas 3-metoksy-4-hydroksymigdałowy
enzym: oksydaza monoaminowa (MAO)

noradrenalina -> normetanefryna
enzym: COMT

normetanefryna -> kwas 3-metoksy-4-hydroksymigdałowy
enzym: MAO

lub
adrenalina/noradrenalina -> kwas dihydroksymigdałowy
enzym: MAO

kwas migdałowy -> kwas 3-metoksy-4-hydroksymigdałowy
enzym: COMT

dopamina -> -> kwas homowanilinowy
enzymy: COMT, MAO

- podczas występowania guza chromochłonnego w rdzeniu nadnerczy wydalane są metanefryna i
kwas 3-metoksy-4-hydroksymigdałowy

2. Serotonina.
tryptofan + H

2

O -> 5-hydroksytryptofan

enzym: hydroksylaza tyrozynowa (w wątrobie)

5-hydroksytryptofan -> 5-hydroksytryptamina (serotonina) + CO

2

- serotonina powoduje skurcz mięśni gładkich i zwężenie naczyń

- serotonina jest metabolizowana przez oksydazę monoaminową (MAO) do 3-octanu 5-
metoksyindolu, który jest wydalany w postaci sprzężonej

- iproniazyd hamuje MAO, przez co wydłuża działanie serotoniny – efektem jest pobudzenie
psychiczne

13

background image

- serotonina może też być przekształcana w melatoninę:
serotonina + acetylo-CoA -> N-acetyloserotonina + CoA-SH

N-acetyloserotonina + CH

3

-> N-acetylometoksyserotonina (melatonina)

- w rakowiaku złośliwym 60% tryptofanu jest przekształcane do serotoniny

3. Spermina i spermidyna.
arginina + H

2

O -> mocznik + ornityna

enzym: arginaza

ornityna -> putrescyna + CO

2

enzym: dekarboksylaza ornitynowa

putrescyna + dekarboksylowana S-adenozylometionina -> spermidyna + metylotioadenozyna
enzym: syntaza spermidynowa

spermidyna + dekarboksylowana S-adenozylometionina -> spermina + metylotioadenozyna
enzym: syntaza sperminowa

- spermidyna składa się z putrescyny i 1,3-diaminopropanu, pochodzącego z metioniny

- spermina składa się z 1 cząsteczki putrescyny i 2 cząsteczek 1,3-diaminopropanu

- chronią DNA plemników przed kwaśnym środowiskiem pochwy

- katabolizm:
spermina -> spermidyna -> putrescyna
enzym: oksydaza poliaminowa

putrescyna -> NH

4

+

+ CO

2

4. Melaniny.
tyrozyna + tetrahydrobiopteryna -> DOPA + dihydrobiopteryna
enzym: 3-monooksygenaza tyrozynowa

DOPA -> dopachinon
enzym: oksydaza katecholowa

Dopachinon przekształca się w eu- i feomelaniny.

- synteza melanin zachodzi w melanocytach

- defekt powoduje albinizm – tyrozynazo-dodatni przechodzi łagodniej niż tyrozynazo-ujemny

5. Kreatyna.

arginina + glicyna -> glikocyjamina (guanidynooctan) + ornityna
enzym: transamidynaza arginino-glicynowa (w nerkach)

14

background image

glikocyjamina + S-adenozylometionina -> kreatyna + S-adenozylohomocysteina
enzym: metylotransferaza guanidynooctanowa (w wątrobie)

- katabolizm:
kreatyna + ATP -> fosforan kreatyny + ADP
enzym: kinaza kreatynowa (w wątrobie)

fosforan kreatyny -> kreatynina + Pi + H

2

O

Ostatnia reakcja zachodzi w mięśniach.

6. γ-aminomaślan (GABA).
α-aminokwas + α-ketoglutaran -> α-ketokwas + glutaminian
enzym: aminotransferaza
koenzym: fosforan pirydoksalu

glutaminian -> γ-aminomaślan + CO2
enzym: dekarboksylaza glutaminianowa
koenzym: fosforan pirydoksalu

GABA jest katabolizowany do semialdehydu bursztynowego, który dalej może przekształcać się w
bursztynian lub w γ-hydroksymaślan.

15

background image

ZWIĄZKI AZOTOWE

PURYNY

Synteza puryn:

rybozo-5-fosforan + ATP -> pirofosforan fosforybozylu (PRPP) + AMP
enzym: syntaza PRPP
kofaktor: Mg

2+

PRPP -> monofosforan inozyny (IMP)
Tutaj jest milion tysięcy etapów przejściowych, więc przejdźmy do meritum:

Skąd pochodzą poszczególne atomy pierścienia purynowego?
In order of appearance:

- N9 – z glutaminy
- C4, C5 i N7 – z glicyny
- C8 - z N

5

,N

10

-metenylotetrahydrofolianu

- N3 – z glutaminy
- C6 – z CO2
- N1 – z asparaginianu
- C2 – z N

10

-formylotetrahydrofolianu

Jak IMP przekształca się w adeninę lub guaninę?

Szlak do adeniny:

IMP + asparaginian -> adenylobursztynian (AMPS) + H

2

O

enzym: syntaza adenylobursztynianowa
kofaktory: GTP, Mg

2+

adenylobursztynian -> monofosforan adenozyny (AMP) + fumaran
enzym: liaza adenylobursztynianowa

Szlak do guaniny:

IMP + NAD

+

+ H

2

O -> monofosforan ksantozyny (XMP) + NADH + H

+

enzym: dehydrogenaza IMP

monofosforan ksantozyny + glutamina -> monofosforan guanozyny (GMP) + glutaminian
enzym: transamidynaza
kofaktor: ATP

Jakie są sposoby regulacji syntezy puryn?

16

background image

- zahamowanie syntezy tetrahydrofolianu -> brak 2 atomów C -> brak syntezy puryn
W ten sposób działają takie leki jak azaseryna i 6-merkaptopuryna.

- syntaza PRPP jest hamowana zwrotnie przez PRPP i rybonukleotydy purynowe

- AMP hamuje zwrotnie syntazę adenylobursztynianową

- GMP hamuje zwrotnie dehydrogenazę IMP

- do syntezy ATP potrzeba GTP i odwrotnie – po to, żeby była między nimi równowaga

Reakcje typu Salvage:

A. puryna + PRPP -> 5’-mononukleotyd puryny + PPi

np.: adenina + PRPP -> AMP + PPi
enzym: fosforybozylotransferaza adeninowa

guanina + PRPP -> GMP + PPi
hipoksantyna + PRPP -> IMP + PPi
enzym: fosforybozylotransferaza hipoksantynowo-guaninowa

B. nukleozyd purynowy + ATP -> nukleotyd purynowy + ADP

np.: adenozyna + ATP -> AMP + ADP
enzym: kinaza adenozynowa

Jak powstają deoksyrybonukleotydy?

difosforan rybonukleozydu + zredukowana tioredoksyna -> difosforan 2’-rybonukleozydu +
utleniona tioredoksyna
enzym: reduktaza rybonukleotydowa

np.: ADP + zredukowana tioredoksyna -> dADP + utleniona tioredoksyna

Regeneracja tioredoksyny:
utleniona tioredoksyna + NADPH + H

+

-> zredukowana tioredoksyna + NADP

+

Katabolizm puryn:

1. adenozyna + H

2

O -> inozyna + NH

4

+

enzym: deaminaza adenozynowa

2. inozyna + Pi -> hipoksantyna + rybozo-1-fosforan

lub

guanozyna + Pi -> guanina + rybozo-1-fosforan

17

background image

3. hipoksantyna + H

2

O + O

2

-> ksantyna + H

2

O

2

lub

guanina -> ksantyna + NH

3

4. ksantyna + H

2

O + O

2

-> kwas moczowy + H

2

O

2

enzym: oksydaza ksantynowa

PIRYMIDYNY

Synteza pirymidyn:

1. CO

2

+ glutamina + ATP -> karbamoilofosforan + glutaminian + ADP

enzym: syntaza karbamoilofosforanowa II (cytoplazmatyczna)

2. karbamoilofosforan + asparaginian -> kwas karbamoiloasparaginowy (CAA) + Pi
enzym: karbamoilotransferaza asparaginianowa

3. kwas karbamoiloasparaginowy -> kwas dihydroorotowy + H

2

O

enzym: dihydroorotaza

4. kwas dihydroorotowy + NAD

+

-> kwas orotowy + NADH + H

+

enzym: dehydrogenaza dihydroorotanowa

5. kwas orotowy + PRPP -> orotydyno-5’-monofosforan (OMP/orotodylan) + PPi
enzym: fosforybozylotransferaza orotanowa

6. OMP -> urydylan (UMP) + CO

2

enzym: dekarboksylaza orotydyno-5’-fosofranowa (dekarboksylaza orotydylanowa)

7. UMP + ATP -> UDP + ADP

UDP może się przekształcać do CTP (5’-trójfosforan cytydyny) lub TMP (5’-trójfosforan
tymidyny).

Szlak do cytozyny:

UDP + ATP -> UTP + ADP

UTP + ATP + glutamina -> CTP + ADP + Pi
enzym: syntaza CTP

Szlak do tyminy:

UDP + NADPH + H+ -> dUDP + NADP+
enzym: reduktaza rybonukleotydowa

18

background image

dUDP + H2O -> dUMP + Pi

dUMP + N

5

,N

10

-metylenotetrahydrofolian -> TMP + dihydrofolian

enzym: syntaza tymidylanowa

Regulacja syntezy pirymidyn:

- metotreksat – hamuje redukcję dihydrofolianu – nie ma tetrahydrofolianu – nie może
powstawać TMP

- analogi zasad: allopurinol i 5-fluorouracyl – blokują fosforybozylotransferazę orotanową

- UTP i puryny hamują syntetazę karbamoilofosforanową II

- PRPP aktywuje syntetazę karbamoilofosforanową II

- karbamoilotransferaza asparaginianowa jest hamowana przez CTP, a aktywowana przez ATP


Reakcje typu salvage:

nukleozyd + ATP -> nukleotyd + ADP:

urydyna + ATP -> UMP + ADP
cytydyna + ATP -> CMP + ADP
enzym: kinaza urydynowo-cytydynowa

tymidyna + ATP -> dTMP + ADP
enzym: kinaza tymidynowa

deoksycytydyna + ATP -> dCMP + ADP
enzym: kinaza deoksycytydynowa

orotan + ATP -> OMP + ADP
enzym: rybozylotransferaza orotanowa

Katabolizm pirymidyn:

Szlak cytozyny i uracylu:

2 cytozyna + O

2

-> 2 uracyl + 2 NH

3

uracyl + NADPH + H+ -> dihydrouracyl

dihydrouracyl + H

2

O -> N-karbamoilo-

β

-alanina (inaczej

β

-ureidopropionian)

N-karbamoilo-

β

-alanina ->

β

-alanina + CO

2

+ NH

3

19

background image

Szlak tyminy:

tymina + NADPH+ H

+

-> dihydrotymina + NADP

+

dihydrotymina + H

2

O -> N-karbamoilo-

β

-aminoizomaślan (

β

-ureidoizomaślan)

N-karbamoilo-

β

-aminoizomaślan ->

β

-aminoizomaślan + CO

2

+ NH

3

* Orotoacyduria – nadmiar kwasu orotowego w cytoplazmie spowodowany niezdolnością
mitochondriów do rozkładania karbamoilofosforanu (towarzyszy zespołowi Reye’a):

- typ I – niedobór fosforybozylotransferazy orotanowej i dekarboksylazy orotydylanowej

- typII – niedobór dekarboksylazy orotydylanowej

BILANS AZOTOWY I CYKL MOCZNIKOWY

Degradacja białek:

- proteazy – hydrolizują wewnętrzne wiązanie peptydowe

- endopeptydazy – rozkładają peptydy powstałe w wyniku działania proteaz do aminokwasów

-sekwencja PEST – region bogaty w prolinę, glutaminian, serynę i treoninę – białko, które go
posiada jest szybciej degradowane

- peptydy z krążenia tracą kwas sjalowy i wtedy są internalizowane do hepatocytów przez receptory
asjaloglikoproteinowe i degradowane przez katepsyny w lizosomach

Katepsyny są proteazami.

- szlak ATP-niezależny – białka pozakomórkowe, błonowe i wewnątrzkomórkowe długożyjące – w
lizosomach

-szlak ATP-zależny – białka wewnątrzkomórkowe krótkożyjące i białka nieprawidłowe – wymaga
ubikwityny, która przyłącza się do grupy

ε

-aminowej lizyny białka i powoduje skierowanie go do

proteasomu.

Reakcja z ubikwityną jest łatwiejsza, gdy na N-końcu znajdują się asparaginian lub arginina, a
trudniejsza, gdy znajdują się tam metionina lub seryna.

T

1/2

białek: 0,5-150 h

- enzymy metabolizmu podstawowego >100 h
- enzymy regulatorowe 0,5-2 h

20

background image

Wydalanie azotu – biosynteza mocznika:

Zwierzęta dzielą się na ammonoteliczne (wydalają amoniak), urykoteliczne (wydalają kwas
moczowy) i ureoteliczne (wydalają mocznik).

My wytwarzamy mocznik w 4 etapach:

1. Transaminacja.

α

-aminokwas +

α

-ketoglutaran <->

α

-ketokwas + L-glutaminian

- nie podlegają jej lizyna, treonina, prolina i hydroksyprolina

- enzymem jest aminotransferaza glutaminianowa, jej koenzymem – fosforan pirydoksalu
(witamina B

6

)

- szkielet węglowy aminokwasu (

α

-ketokwas) jest dalej katabolizowany

-

δ

-aminowa grupa ornityny także ulega transaminacji

- grupa aminowa może być przenoszona także na pirogronian – powstaje wtedy alanina, która i tak
przekształca się w wyniku transaminacji w glutaminian

2. Deaminacja oksydacyjna glutaminianu.

glutaminian + NAD

+

<->

α

-ketoglutaran + NADH + H

+

+ NH

3

- enzymem jest dehydrogenaza L-glutaminianowa (GDH), której inhibitorami są ATP, GTP, NADH,
a aktywatorem jest ADP

- dehydrogenaza L-glutaminianowa może także wykorzystywać NADP

- istnieje też możliwość uzyskania NH

3

poprzez działanie oksydaz aminokwasowych:

α

-aminokwas + flawina <->

α

-iminokwas + flawina-H

2

(zredukowana)

enzym: oksydaza aminokwasowa

α

-iminokwas + H

2

O ->

α

-ketokwas + NH

4

+

Regeneracja flawiny:
flawina-H

2

+ O

2

-> flawina + H

2

O

2

2 H

2

O

2

-> 2 H

2

O + O

2

enzym: katalaza

- amoniak jest toksyczny, ponieważ reaguje z

α

-ketoglutaranem, tworząc glutaminian (odwraca

równowagę reakcji deaminacji) – niedobór

α

-ketoglutaranu hamuje cykl kwasu trikarboksylowego

(TCA) w neuronach

3. Magazynowanie, transport i uwalnianie amoniaku.

21

background image

- amoniak jest magazynowany i transportowany jako azot amidowy glutaminy – reakcja zachodzi w
nerkach

L-glutaminian + NH

3

+ ATP -> L-glutamina + H

2

O + ADP + Pi

enzym: syntetaza glutaminowa

-uwalnianie amoniaku w wątrobie:

L-glutamina + H

2

O -> glutaminian + NH

4

+

enzym: glutaminaza

- od równowagi pomiędzy działaniem syntetazy glutaminowej i glutaminazy zależy równowaga
kwasowo-zasadowa – nadmiar amoniaku powoduje zasadowicę metaboliczną, niedobór – kwasicę
metaboliczną

4. Cykl mocznikowy.

I. CO

2

+ NH

4

+

+ ATP -> karbamoilofosforan + ADP + Pi

enzym: syntetaza kabamoilofosforanowa I (mitochondrialna)
aktywator: N-acetyloglutaminian

II. karbamoilofosforan + ornityna -> cytrulina + Pi
enzym: transkarbamoilaza ornitynowa

III. cytrulina + asparaginian + ATP -> argininobursztynian + AMP + PPi
enzym: syntetaza argininobursztynianowa

IV. argininobursztynian -> arginina + fumaran
enzym: argininobursztynaza (liaza argininobursztynianowa)

- fumaran przechodzi w szczawiooctan, a szczawiooctan w asparaginian

V. arginina + H

2

O -> mocznik + ornityna

enzym: arginaza

- reakcje I i II zachodzą w mitochondrium, reszta w cytoplazmie – CO

2

, NH

4

+

i ornityna są

transportowane do matrix, a cytrulina do cytozolu przez przenośniki w błonie mitochondrialnej

- wydajność cyklu mocznikowego zależy od podaży N-acetyloglutaminianu, który powstaje z
acetylo-CoA i glutaminianu w reakcji katalizowanej przez syntazę N-acetyloglutaminianową

- w trakcie głodowania synteza mocznika jest większa, bo w wyniku rozkładu białek powstaje
więcej amoniaku

Zaburzenia cyklu mocznikowego:

Choroba

Enzym

Hiperamonemia typu I

Syntetaza karbamoilofosforanowa I

22

background image

Hiperamonemia typu II

Transkarbamoilaza ornitynowa

Cytrulinemia

Syntetaza argininobursztynianowa

Acyduria argininobursztynianowa

Argininobursztynaza

Hiperargininemia

Arginaza

Kreatynina – inny sposób na wydalanie azotu:

1. arginina + glicyna -> glikocyjamina (guanidynooctan) + ornityna
enzym: transamidynaza arginino-glicynowa

2. glikocyjamina + S-adenozylometionina -> kreatyna + S-adenozylohomocysteina
enzym: metylotransferaza guanidynooctanowa

3. kreatyna + ATP -> fosforan kreatyny + ADP
enzym: kinaza kreatynowa

4. fosforan kreatyny -> kreatynina + Pi + H

2

O

- reakcja 1. zachodzi w nerkach, 2.i 3.- w wątrobie, 4. – w mięśniach

23

background image

WĘGLOWODANY

GLIKOLIZA

- zachodzi w cytozolu

- zaczyna się od tego, że glukoza jest transportowana do komórki przez transportery:

* SGLT 1 – w jelicie cienkim i nerkach – symport glukozy i Na

+

* GLUT 1 – w mózgu i erytrocytach
* GLUT 2 – w wątrobie, trzustce, jelicie cienkim
* GLUT 3 – w mózgu
* GLUT 4 – w tkance tłuszczowej
* GLUT 5 – w jelicie cienkim

1. glukoza + ATP -> glukozo-6-fosforan + ADP
enzym: heksokinaza/glukokinaza

Glukokinaza występuje tylko w hepatocytach i ma mniejsze powinowactwo do glukozy – działa
tylko po posiłku, gdy stężenie glukozy we krwi jest wysokie.

Glukozo-6-fosforan może także powstawać z glikogenu i przekształcać się w niego:
glikogen <-> glukozo-1-fosforan <-> glukozo-6-fosforan

2. glukozo-6-fosforan <-> fruktozo-6-fosforan
enzym: izomeraza fosfoheksozowa

3. fruktozo-6-fosforan + ATP -> fruktozo-1,6-bisfosforan + ADP
enzym: fosfofruktokinaza
kofaktor: Mg

2+

inhibitory: ATP, cytrynian
aktywatory: AMP, fruktozo-6-fosforan, fruktozo-2,6-bisfosforan

4. fruktozo-1,6-bisfosforan <-> fosfodihydroksyaceton (dhiydroksyacetonofosforan) <->
gliceraldehydo-3-fosforan (aldehyd 3-fosfoglicerynowy)

lub: fruktozo-1,6-bisfosforan <-> gliceraldehydo-3-fosforan

enzymy: aldolaza, izomeraza fosfotriozowa

Z 1 cząsteczki heksozofosforanu powstają 2 cząsteczki triozofosforanu.

5. gliceraldehydo-3-fosforan + NAD

+

+ Pi <-> 1,3-bisfosfoglicerynian + NADH + H

+

enzym: dehydrogezaza gliceraldehydo-3-fosforanowa
inhibitor: jodooctan

Aktywność dehydrogenazy gliceraldehydo-3-fosforanowej zależy od podaży NAD

+

.

6. 1,3-bisfosfoglicerynian + ADP <-> 3-fosfoglicerynian + ATP
enzym: kinaza glicerynianowa

24

background image

kofaktor: Mg

2+

Tu powstaje ATP !!!!!!!

Arsenian wciska się w reakcji 5. zamiast Pi i powstaje 1-arseno-3-fosfoglicerynian, który w reakcji
6. przekształca się do 3-fosofglicerynianu bez powstania ATP (bo i skąd wziąć fosforan do tego?).

7. 3-fosfoglicerynian <-> 2-fosfoglicerynian
enzym: mutaza fosfoglicerynianowa

8. 2-fosfoglicerynian <-> fosfoenolopirogronian + H

2

O

enzym: enolaza
kofaktor: Mg

2+

/Mn

2+

inhibitor: fluorki

9. fosfoenolopirogronian + ADP -> pirogronian + ATP
enzym: kinaza pirogronianowa
kofaktor: Mg

2+

inhibitor: glukagon (przez cAMP), alanina
aktywator: fruktozo-1,6-bisfosforan

Tu też powstaje ATP !!!!!!

Pirogronian samorzutnie przechodzi z formy enolowej w ketonową.

Teraz mamy 3 możliwe szlaki przemian:

A. Powstanie mleczanu.

pirogronian + NADH + H

+

<-> mleczan + NAD

+

enzym: dehydrogenaza mleczanowa

-zachodzi w warunkach niedotlenienia tkanki (np. mięśnie szkieletowe w trakcie wysiłku) lub przy
braku mitochondriów (np. erytrocyty).

- celem jest odzyskanie NAD

+

zredukowanego w procesie glikolizy

- mleczan jest pobierany przez wątrobę, korę nerek i serce i tam utleniany do pirogronianu

B. Utlenianie pirogronianu.

* TDP = difosfotiamina

pirogronian + H

+

+ TDP -> TDP-hydroksyetyl + CO

2

enzym: dehydrogenaza pirogronianowa
kofaktor: tiamina
inhibitory: ATP, NADH, acetylo-CoA -> wszystkie przez układ kinazy – bo dehydrogenaza
pirogronianowa jest nieaktywna w formie ufosforylowanej
aktywator: insulina (w tkance tłuszczowej – tam potrzeba dużo acetylo-CoA do lipogenezy – a dupa
rośnie)

25

background image

TDP-hydroksyetyl + utleniony liponoamid -> acetyloliponoamid + TDP
enzym: acetylotransferaza dihydroliponoamidowa
inhibitory: arsenian(III), jony rtęci – reagują z grupami -SH kwasu liponowego

acetyloliponoamid + CoA-SH -> acetylo-CoA + dihydroliponoamid
enzym: acetylotransferaza dihydroliponoamidowa

dihydroliponoamid + FAD -> utleniony liponoamid + FADH

2

enzym: dehydrogenaza dihydroliponoamidowa

FADH

2

+ NAD

+

-> FAD + NADH + H

+

i mamy zregenerowany NADH

C. Powstanie szczawiooctanu.

pirogronian + CO

2

+ ATP -> szczawiooctan + ADP + Pi

enzym: karboksylaza pirogronianowa
kofaktor: Mg

2+

, biotyna

aktywator: acetylo-CoA

Podsumowanie:

- zysk – w wersji z utlenianiem pirogronianu – 38 mol ATP z 1 mol glukozy; w wersji z powstaniem
mleczanu – 2 mol ATP na 1 mol glukozy

- jeżeli jemy dużo i produkujemy więcej pirogronianu niż potrzeba nam szczawiooctanu do
produkcji energii przez napędzanie cyklu Krebsa i łańcucha oddechowego, to pirogronian
przekształca się w acetylo-CoA, który idzie do szlaku lipogenezy

- fruktoza wchodzi do szlaku jako fruktozo-1-fosforan i omija punkty kontrolne – dlatego spożycie
dużej ilości fruktozy powoduje, że wytwarzamy więcej pirogronianu niż potrzebujemy do produkcji
energii – i dupa rośnie

- w erytrocytach są enzymy – mutaza bisfosfoglicerynianowa i fosfataza-2,3-
bisfosfoglicerynianowa – dzięki którym 1,3-bisfosfoglicerynian może przejść w 3-fosfoglicerynian
przez 2,3-bisfosfoglicerynian – a to nie powoduje wytwarzania ATP, ale za to dostarcza 2,3-BPG,
który zmniejsza powinowactwo hemoglobiny do tlenu i powoduje oddawanie go tkankom

- niedobór tiaminy/ zatrucie arsenianem (III) lub rtęcią -> nagromadzenie się pirogronianu ->
kwasica mleczanowa

CYKL KWASU CYTRYNOWEGO (cykl Krebsa/cykl kwasów trikarboksylowych/TCA)

- zachodzi w macierzy mitochondrialnej
- poszczególne procesy mogą mieć miejsce w komórkach różnych tkanek, ale cały cykl od początku
do końca zachodzi głównie w hepatocytach

1. szczawiooctan + acetylo-CoA + H

2

O -> cytrynian + CoA-SH

26

background image

enzym: syntaza cytrynianowa

Wiązanie powstaje między węglem z grupy C=O szczawiooctanu a węglem z grupy CH

3

acetylo-

CoA.

2. cytrynian -> cis-akonitan -> izocytrynian
enzym: akonitaza (hydrataza akonitanowa)
inhibitor: fluorocytrynian (powstaje z fluorooctanu) – dlatego fluor jest toksyczny

3. izocytrynian -> szczawiobursztynian -> α-ketoglutaran + CO

2

enzym: dehydrogenaza izocytrynianowa
kofaktor: Mg

2+

/Mn

2+

Jednocześnie zachodzi redukcja – zależnie od izoenzymu dehydrogenazy:

NAD

+

-> NADH + H

+

- tylko w mitochondriach

NADP

+

-> NADPH + H

+

- w cytozolu i mitochondriach

4.

α

-ketoglutaran + CoA-SH -> bursztynylo-CoA (sukcynylo-CoA) + CO

2

enzym: dehydrogenaza

α

-ketoglutaranowa

kofaktory: difosfotiamina, liponian, NAD

+

, FAD

+

, CoA

inhibitor: arsenian (III)

- reakcja jednokierunkowa (wszystkie poza tą i 1. są dwukierunkowe)
- jednocześnie zachodzi redukcja NAD

+

NAD

+

-> NADH + H

+

- atomy węgla odpadające jako CO

2

w etapach 3. i 4. pochodzą ze szczawiooctanu – nigdy z

acetylo-CoA !

5. bursztynylo-CoA -> bursztynian + CoA-SH
enzym: tiokinaza bursztynianowa (syntetaza sukcynylo-CoA)
kofaktor: Mg

2+

- jednocześnie zachodzi reakcja:
ADP + Pi -> ATP

lub

GTP + Pi -> GTP

JEDYNA FOSFORYLACJA W CYKLU KREBSA!!!
- w wątrobie i nerkach może powstawać i ATP i GTP (GTP jest zużywane do glukoneogenezy)
- w pozostałych tkankach powstaje tylko ATP

***W tkankach pozawątrobowych w metabolizmie ciał ketonowych zachodzi taka reakcja:
bursztynylo-CoA + acetooctan -> bursztynian + acetoacetylo-CoA
enzymem jest transferaza CoA sukcynylo-CoA:acetooctan

6. bursztynian -> fumaran
enzym: dehydrogenaza bursztynianowa
inhibitor: malonian

- na tym etapie zachodzi również redukcja FAD:
FAD -> FADH

2

- dehydrogenaza bursztynianowa zawiera FAD i białko żelazowo-siarkowe
- dehydrogenaza bursztynianowa redukuje ubichinon w łańcuchu przenoszącym elektrony

27

background image

7. fumaran + H

2

O -> L- jabłczan

enzym: fumaraza (hydrataza fumaranowa)

8. jabłczan -> szczawiooctan
enzym: dehydrogenaza jabłczanowa

- na tym etapie zachodzi też redukcja NAD

+

:

NAD

+

-> NADH + H

+

Podsumowanie:

- zysk: 3 NADH + 1 FADH

2

+ 1 ATP,

ale NADH i FADH idą do łańcucha oddechowego, gdzie powodują powstawanie ATP (1 NADH ->
3 ATP; 1 FADH

2

-> 2 ATP)

w związku z tym zysk energetyczny z cyklu Krebsa to tak naprawdę 12 cząsteczek ATP na każdą
cząsteczkę acetylo-CoA wchodzącą w cykl

- kofaktory:
CoA – zawiera kwas pantotenowy
FAD – zawiera ryboflawinę (witamina B

2

)

NAD – zawiera niacynę (witamina B

3

)

Tiamina (witamina B

1

) – jest kofaktorem dehydrogenazy

α

-ketoglutaranowej

- wszystkie związki cyklu Krebsa poza acetylo-CoA są glukogenne, bo powstaje z nich
szczawiooctan, a z niego w procesie glukoneogenezy powstaje glukoza

- acetylo-CoA nie jest glukogenne – 2 węgle wchodzą do cyklu i 2 wychodzą (jako CO

2

)

- szczawiooctan może powstawać z pirogronianu

- aminokwasy wchodzą do cyklu przez reakcje:
* asparaginian <-> szczawiooctan
* glutaminian <->

α

-ketoglutaran

* alanina <-> pirogronian

W wyniku odwrotnych reakcji metabolity cyklu Krebsa mogą być źródłem szkieletów węglowych
aminokwasów.

Hydroksyprolina, seryna, cysteina, treonina i glicyna także mogą przekształcać się do pirogronianu,
ale działa to tylko w jedną stronę (pirogronian nie może być dla nich źródłem szkieletu
węglowego).
Podobnie arginina, prolina, glutamina i histydyna przekształcają się w

α

-ketoglutaran; izoleucyna,

metionina i walina w bursztynylo-CoA; tyrozyna i fenyloalanina w fumaran – „one way ticket”.

- regulacja cyklu kwasu cytrynowego – kontrola oddechowa – działanie cyklu zależy od podaży
NAD

+

, powstającego w łańcuchu oddechowym i ADP, powstającego w wyniku zużywania energii

- regulacja enzymów cyklu kwasu cytrynowego – dehydrogenaza pirogronianowa, syntaza
cytrynianowa, dehydrogenaza izocytrynianowa, dehydrogenaza

α

-ketoglutaranowa – aktywowane

28

background image

są przez Ca

2+

, których jest więcej w czasie skurczu mięśnia, hamowanie przez ATP/NADH/produkt

– w zależności od enzymu

GLIKOGENOGENEZA

- zachodzi w mięśniach i w wątrobie

1. glukoza + ATP -> glukozo-6-fosforan + ADP
enzym: heksokinaza(w mięśniach)/glukokinaza(w wątrobie)

2. glukozo-6-fosforan <-> glukozo-1-fosforan
enzym: fosfoglukomutaza
kofaktor: Mg2+

3. glukozo-1-fosforan + UTP -> UDPGlc (urydynodifosfoglukoza) + PPi
enzym: pirofosfataza UDPGlc

PPi -> 2 Pi – usuwamy produkt reakcji i dzięki temu zachodzi szybciej !
enzym: pirofosfataza

4. UDPGlc jest dołączane do glikogenu wiązaniem

α

-1-4 i łańcuch jest wydłużany (UDP jest

uwalniany).
enzym: syntaza glikogenowa
inhibitor: cAMP

Na początku UDPGlc reaguje z glikogeniną i tworzy primer glikogenu, do którego są przyłączane
jednostki UDPGlc.

5. Rozgałęzianie łańcucha – enzym rozgałęziający ucina kilka (co najmniej 6) reszt glukozowych z
końca jednego łańcucha i dołącza je do drugiego wiązaniem

α

-1,6.

Gałęzie są dalej wydłużane przez tworzenie wiązań

α

-1,4.

6. Regeneracja UTP.

UDP + ATP -> UTP + ADP

GLIKOGENOLIZA

1. glikogen + Pi -> glukozo-1-fosforan + glikogen krótszy o 1 resztę glukozową
enzym: fosforylaza glikogenowa
aktywator: cAMP

Usuwanie rozgałęzień – gdy jedno z rozgałęzień jest już skrócone do długości 4 reszt, ostatnie 3 z
tych reszt są przenoszone przez transferazę glukanową na koniec drugiego łańcucha. Ostatnia
pozostała reszta (ta połączona z łańcuchem wiązaniem

α

-1,6) jest usuwana przez enzym

usuwający rozgałęzienia jako cząsteczka wolnej glukozy. Na łańcuch dalej działa fosforylaza
glikogenowa.

29

background image

2. glukozo-1-fosforan <-> glukozo-6-fosforan
enzym: fosfoglukomutaza
kofaktor: Mg2+

3. glukozo-6-fosforan + H2O -> glukoza + Pi
enzym: glukozo-6-fosfataza

TYLKO W WĄTROBIE I NERKACH !!! W mięśniach powstaje glukozo-6-fosforan i on wchodzi
do glikolizy.

Podsumowanie:

- glikogen:
* ¾ w mięśniach – źródło glukozy dla mięśni
* ¼ w wątrobie – do utrzymywania stałego poziomu glukozy we krwi

- cAMP aktywuje glikogenolizę (przez fosforylazę glikogenową) i hamuje glikogenogenezę (przez
syntazę glikogenową) – jedno i drugie przez układ kinaz i fosfataz

- insulina hamuje powstawanie cAMP, więc stymuluje glikogenogenezę

- glukagon i adrenalina zwiększają powstawanie cAMP, więc aktywują glikogenolizę

- fosfataza-1-białek inaktywuje fosforylazę glikogenową – czyli hamuje glikogenolizę

Fosfataza -1-białek jest hamowana przez cAMP.

GLUKONEOGENEZA

1. pirogronian + CO

2

+ ATP -> szcawiooctan + ADP

enzym: karboksylaza pirogronianowa
kofaktor: Mg

2+

, biotyna

aktywator: acetylo-CoA

- rola biotyny – wiąże CO

2

i oddaje go pirogronianowi:

biotyna + CO

2

-> karboksybiotyna

karboksybiotyna + pirogronian -> biotyna + szczawiooctan

- karboksylacja pirogronianu zachodzi w mitochondrium, a reszta reakcji glukoneogenezy – w
cytozolu
. Żeby przetransportować szczawiooctan do cytozolu, jest on redukowany do jabłczanu,
który przechodzi przez błonę mitochondrialną i jest z powrotem utleniany do szczawiooctanu (obu
reakcjom towarzyszy utlenienie/redukcja NAD).

2. szczawiooctan + GTP -> fosfoenolopirogronian + GDP + CO

2

enzym: karboksylaza fosfoenolopirogronianowa

30

background image

- GTP powstaje w cyklu kwasu cytrynowego w reakcji rozpadu bursztynylo-CoA, katalizowanej
przez tiokinazę bursztynianową, ale tylko w wątrobie i nerkach – w reszcie powstaje ATP.

3. Reakcje od fosfoenolopirogronianu do fruktozo-1,6-bisfosforanu zachodzą w odwrotnym
kierunku do reakcji glikolizy – enzymy są te same.

4. fruktozo-1,6-bisfosforan + H

2

O -> fruktozo-6-fosforan + Pi

enzym: fruktozo-1,6-bisfosfataza
inhibitor: fruktozo-2,6-bisfosforan (cAMP hamuje jego powstawanie), AMP

- fruktozo-1,6-bisfosfataza występuje w wątrobie, nerkach i mięśniach szkieletowych

- tylko komórki posiadające fruktozo-1,6-bisfosfatazę mogą syntetyzować glukozę z pirogronianu,
fosofotrioz i aminokwasów glukogennych

5. Glukozo-6-fosforan może powstawać z fruktozo-6-fosforanu (enzym: izomeraza fosfoheksozowa
– ten sam, co w glikolizie) lub z glikogenu w wyniku glikogenolizy.

6. glukozo-6-fosforan + H

2

O -> glukoza + Pi

enzym: glukozo-6-fosfataza

- glukozo-6-fosfataza występuje tylko w wątrobie i w nerkach

Wejście aminokwasów glukogennych i innych związków do szlaku glukoneogenezy:

-tryptofan -> alanina

alanina <-> pirogronian
enzym: aminotransferaza

- hydroksyprolina / seryna / cysteina / treonina / glicyna -> pirogronian

- histydyna / prolina/ glutamina / arginina -> glutaminian

glutaminian <->

α

-ketoglutaran

enzym: aminotransferaza

α

-ketoglutaran -> szczawiooctan -> fosfoenolopirogronian

- metionina / walina -> bursztynylo-CoA

bursztynylo-CoA -> szczawiooctan -> fosfoenolopirogronian

- tyrozyna / fenyloalanina -> fumaran

fumaran -> szczawiooctan -> fosfoenolopirogronian

- asparaginian <-> szczawiooctan

31

background image

enzym: aminotransferaza

szczawiooctan -> fosfoenolopirogronian

- izoleucyna -> propionian -> ... (patrz niżej)

- mleczan + NAD

+

-> pirogronian + NADH + H

+

enzym: dehydrogenaza mleczanowa

W wyniku przekształcenia mleczanu powstaje pirogronian w formie ketonowej.

- propionian:

propionian + CoA-SH + ATP -> propionylo-CoA + AMP + PPi
enzym: syntetaza acylo-CoA
kofaktor: Mg

2+

propionylo-CoA + CO

2

+ H

2

O + ATP -> metylomalonylo-CoA + ADP + Pi

enzym: karboksylaza propionylo-CoA
kofaktor: biotyna

metylomalonylo-CoA <-> bursztynylo-CoA
enzym: mutaza metylomalonylo-CoA
kofaktor: witamina B

12

bursztynylo-CoA -> szczawiooctan -> fosfoenolopirogronian

Niedobór witaminy B

12

powoduje acydurię metylomalonylową (wysikujemy kwas

metylomalonylowy).

- łańcuch boczny cholesterolu -> propionian -> ...

- kwasy tłuszczowe -> acetylo-CoA / propionian

acetylo-CoA + szczawiooctan -> cytrynian -> jabłczan -> szcawiooctan -> fosfoenolopirogronian

- glicerol + ATP -> glicerolo-3-fosforan + ADP
enzym: kinaza glicerolowa

glicerolo-3-fosforan + NAD

+

<-> fosfodihydroksyaceton + NADH + H

+

enzym: dehydrogenaza glicerolo-3-fosforanowa

fosfodihydroksyaceton <-> fruktozo-1,6-bisfosforan

Regulacja glukoneogenezy:

- glukagon i adrenalina aktywują glukoneogenezę:

glukagon/adrenalina aktywuje cyklazę adenylanową

32

background image

cAMP aktywuje kinazę białek

kinaza białek aktywuje kinazę pirogronianową

- acetylo-CoA aktywuje karboksylazę pirogronianową allosterycznie

- fruktozo-2,6-bisfosforan aktywuje fosfofruktokinazę (pobudza glikolizę) i inaktywuje fruktozo-
2,6-bisfosfatazę – hamuje glukoneogenezę

SZLAK PENTOZOFOSFORANOWY

1. glukozo-6-fosforan + NADP

+

+ H

2

O -> 6-fosfoglukonian + NADPH + H

+

enzym: dehydrogenaza glukozo-6-fosforanowa

2. 6-fosfoglukonian + NADP

+

-> rybulozo-5-fosforan + NADPH + H

+

+ CO

2

enzym: dehydrogenaza 6-fosfoglukonianowa

Reakcje 1. i 2. są NIEODWRACALNE i służą do wytworzenia NADPH, potrzebnego do syntezy
kwasów tłuszczowych i cholesterolu.

3. rybulozo-5-fosforan <-> ksylulozo-5-fosforan
enzym: 3-epimeraza

lub

rybulozo-5-fosforan <-> rybozo-5-fosforan
enzym: ketoizomeraza

Rybozo-5-fosforan może być zużywany do syntezy nukleotydów.

4. ksylulozo-5-fosforan + rybozo-5-fosforan <-> gliceraldehydo-3-fosforan + sedoheptulozo-7-
fosforan
enzym: transketolaza
kofaktory: Mg

2+

, difosforan tiaminy (witamina B

1

)

Gliceraldehydo-3-fosforan posiada 3 atomy węgla, a sedoheptulozo-7-fosforan – 7 atomów węgla –
wcześniej były 2 związki po 5 węgli: 5+5=10=7+3, czyli hajs się zgadza.

5. gliceraldehydo-3-fosforan + sedoheptulozo-7-fosforan <-> fruktozo-6-fosforan + erytrozo-4-
fosforan
enzym: transaldolaza

Fruktozo-6-fosforan ma 6 atomów węgla, a erytrozo-4-fosforan – 4 atomy węgla: 6+4=10, więc
nadal jest wszystko ok.

6. erytrozo-4-fosforan + ksylulozo-5-fosforan <-> fruktozo-6-fosforan + gliceraldehydo-3-fosforan
enzym: transketolaza

Ksylulozo-5-fosforan pochodzi z etapu 3.

33

background image

Fruktozo-6-fosforan i gliceraldehydo-3-fosforan są przekształcane do glukozo-6-fosforanu – reakcje
i enzymy identyczne jak w glukoneogenezie.

Podsumowanie:

- szlak pentozofosforanowy zachodzi w cytozolu praktycznie wszystkich komórek, ale reakcje 1. i
2. tylko w tkankach odpowiedzialnych za metabolizm tłuszczów i steroidów: wątrobie, korze
nadnerczy, tkance tłuszczowej, tarczycy, jądrach, gruczole sutkowym, erytrocytach – reszta
komórek wytwarza rybozę odwracając reakcje 4-6.

- reakcje 1. i 2. zachodzą po to, by wyprodukować NADPH do syntezy kwasów tłuszczowych i
steroidów

- reakcje 4., 5., 6. i przemiana fruktozo-6-fosforanu i gliceraldehydo-3-fosforanu do glukozo-6-
fosforanu są odwracalne – dzięki temu można zachować równowagę między nimi – w zależności,
czy potrzeba więcej rybozo-5-fosforanu do syntezy nukleotydów, czy glukozo-6-fosforanu do
innych szlaków, reakcje mogą biec w odpowiednim kierunku

- transketolaza przenosi jednostkę CH2OH-C=O (czyli jednostkę ketonową) z ketozy na aldozę, w
wyniku czego ketoza przekształca się w aldozę krótszą o 2 atomy węgla (z jednostki ketonowej), a
aldoza w ketozę dłuższą o te same 2 atomy węgla:

ketozaX + aldozaY -> aldozaX + ketozaY

np. ksylulozo-5-fosforan (ketoza C5) + rybozo-5-fosforan (aldoza C5) -> gliceraldehydo-3-fosforan
(aldoza C3) + sedoheptulozo-7-fosforan (ketoza C7)

- transaldolaza przenosi jednostkę CH2OH-C=O-CH-OH z ketozy na aldozę – ketoza zmienia się
w aldozę krótszą o 3 atomy węgla, a aldoza w ketozę dłuższą o te same 3 atomy węgla z jednostki

np. sedoheptulozo-7-fosforan (ketoza C7) + gliceraldehydo-3-fosforan (aldoza C3) -> erytrozo-4-
fosforan (aldoza C4) + fruktozo-6-fosforan (ketoza C6)

- aldozy: rybozo-5-fosforan, gliceraldehydo-3-fosforan, erytrozo-4-fosforan

- ketozy: rybulozo-5-fosforan, ksylulozo-5-fosforan, sedoheptulozo-7-fosforan, fruktozo-6-
fosforan, glukozo-6-fosforan

- brak dehydrogenazy glukozo-6-fosforanowej uniemożliwia wytwarzanie NADPH, przez co nie
można zredukować glutationu
. Zredukowany glutation jest potrzebny do usuwania H

2

O

2

z

erytrocytów, więc jego brak powoduje anemię hemolityczną.

SZLAK KWASU URONOWEGO

1. glukozo-6-fosforan <-> glukozo-1-fosforan
enzym: fosfoglukomutaza

2. glukozo-1-fosforan + UTP -> UDP-glukoza + PPi
enzym: pirofosforylaza UDPGlc

34

background image

3. UDP-glukoza + 2 NAD

+

+ H

2

O -> UDP-glukuronian + 2 NADH + 2 H

+

enzym: dehydrogenaza UDPGlc

UDP-glukuronian może być wykorzystywany do syntezy proteoglikanów lub być sprzęgany z
bilirubiną / hormonami steroidowymi / lekami i wydalany z żółcią lub moczem.

4. UDP-glukuronian + H

2

O -> glukuronian + UDP

5. D-glukuronian + NADPH + H

+

<-> L-gulonian + NADP

+

U niektórych zwierząt L-gulonian jest prekursorem kwasu askorbinowego. Nam, naczelnym i
świnkom morskim brakuje oksydazy L-gulonolaktonowej, więc kwas askorbinowy jest dla nas
witaminą.

6. L-gulonian + NAD

+

-> L-ksyluloza + NADH + H

+

+ CO

2

7. L-ksyluloza + NADPH + H

+

<-> ksylitol + NADP

+

Blok tej reakcji prowadzi do samoistnej pentozurii.

8. Ksylitol + NAD

+

<-> D-ksyluloza + NADH + H

+

enzym: reduktaza D-ksylulozowa

9. D-ksyluloza + ATP -> ksylulozo-5-fosforan + ADP
kofaktor: Mg

2+

Ksylulozo-5-fosforan jest metabolizowany w szlaku pentozofosforanowym.

D-ksyluloza może też być przekształcana w szczawian (szlak wiedzie poprzez glikolan) – czyli
jakby było coś nie tak to mamy ryzyko np. kamieni nerkowych.

FRUKTOZA

Szlaki wejścia do glikolizy:

A. fruktoza + ATP -> fruktozo-6-fosforan + ADP
enzym: heksokinaza

B. fruktoza + ATP -> fruktozo-1-fosforan + ADP
enzym: fruktokinaza

fruktozo-1-fosforan <-> fosfodihydroksyaceton + gliceraldehyd
enzym: aldolaza B

fosfodihydroksyaceton <-> gliceraldehydo-3-fosforan
enzym: izomeraza fosfotriozwa

gliceraldehyd + ATP -> gliceraldehydo-3-fosforan

35

background image

enzym: triozokinaza

- fruktoza wchodzi do glikolizy omijając reakcję katalizowaną przez fosfofruktokinazę – etap
regulacyjny – dlatego nadmierne spożycie fruktozy powoduje zwiększoną syntezę kwasów
tłuszczowych i wydzielanie VLDL -> wzrost TAG w surowicy

- heksokinaza chętniej reaguje z glukozą, ale przy braku glukozy/nadmiarze fruktozy reaguje z
fruktozą

- blok fruktokinazy powoduje samoistną fruktozurię.

- fruktoza występuje w płynie nasiennym – powstaje w wyniku utleniania sorbitolu przez
dehydrogenazę sorbitolową

GALAKTOZA

1. laktoza -> glukoza + galaktoza

2. galaktoza + ATP -> galaktozo-1-fosforan + ADP
enzym: galaktokinaza
kofaktor: Mg

2+

3. galaktozo-1-fosforan + UDP-glukoza <-> glukozo-1-fosforan + UDP-galaktoza
enzym: urydylilotransferaza 1-fosfogalaktozowa

Blok urydylilotransferazy 1-fosfogalaktozowej powoduje galaktozemię.

4. UDP-galaktoza <-> UDP-glukoza
enzym: 4-epimeraza UDP-galaktozowa
kofaktor: NAD

+

UDP-glukoza jest wbudowywana do glikogenu.

Synteza laktozy:

UDP-glukoza <-> UDP-galaktoza
enzym: 4-epimeraza UDP-galaktozowa

UDP-galaktoza + glukoza -> laktoza
enzym: syntaza laktozowa

AMINOCUKRY

1. fruktozo-6-fosforan + glutamina -> glukozamino-6-fosforan + glutaminian
enzym: amidotransferaza
inhibitor: N-acetyloglukozoamino-6-fosforan

2.A. glukozamino-6-fosforan + acetylo-CoA -> N-acetyloglukozamino-6-fosforan

36

background image

Z N-acetyloglukozamino-6-fosforanu powstają:

- N-acetyloglukozoamina

- 9-fosforan kwasu neuraminowego (do kwasu sialowego, gangliozydów i glikoprotein)

- UDP-N-acetyloglukozoamina (do glikozaminoglikanów i glikoprotein)

- UDP-N-acetylogalaktozoamina (do glikozaminoglikanów i glikoprotein)

B. glukozamino-6-fosforan <-> glukozamino-1-fosforan -> UDP-glukozoamina (do
glikozaminoglikanów)

37

background image

LIPIDY

BIOSYNTEZA KWASÓW TŁUSZCZOWYCH

w cytozolu komórek wątroby, nerek, mózgu, płuc, tkanki tłuszczowej, gruczołu sutkowego

kofaktory: NADPH, ATP, Mn

2+

, biotyna, HCO

3

-

acetylo-CoA → palmitynian

e: syntaza kwasu tłuszczowego – 7 enzymów połączonych ze sobą; na jedynm końcu mają cysteinę,

na drugim 4-fosfopanteteinę (pochodną kwasu foliowego); u człowieka – dimer (2 podjednostki

łączą się ze sobą mostkami dwusiarczkowymi);

1. acetylo-CoA + CO2 → malonylo-CoA
e: karboksylaza acetylo-CoA
koenzym: biotyna

2. Acetylo-CoA jest przyłączane do cysteiny syntazy, a malonylo-CoA do pantoteiny.
e: transacylaza acetylowa i malonylowa

3. Grupa acetylowa przyłącza się do malonylo-CoA. Odpada CO

2

.

e: syntaza 3-ketoacylowa

4. Powstała grupa 3-ketoacylowa zostaje zredukowana, odwodniona i jeszcze raz zredukowana.
e: reduktaza 3-ketoacylowa, hydrataza, reduktaza enoilowa

5. Powstała grupa acylowa jest wypierana przez nowe malonylo-CoA i przenosi się na Cys przy
pomocy białka przenoszącego acyl (ACP). Cały cykl powtarza się 6 razy, do powstania reszyt
palmitoilowej. Wtedy tioesteraza odłącza palmitynian, a syntaza zaczyna tworzyć nową cząsteczkę
kwasu.

w gruczole sutkowym jest tioesteraza swoista dla C8, C10 i C12

źródłem NADPH do redukcji w etapie 4. jest zwykle szlak pentozofosforanowy (może też
być z reakcji: jabłczan → pirogronian lub cytrynian → szczawiooctan)

Źródła acetylo-CoA:

Acetylo-CoA powstaje w mitochondriach z pirogronianu (e: dehydrogenaza pirogronianowa) i
nie przenika przez błony mitochondrialne.

Transport acetylo-CoA do cytozolu:

1. acetylo-CoA + szczawiooctan → cytrynian
2. Cytrynian przenika do cytozolu.
3. cytrynian → acetylo-CoA + szczawiooctan
e: liaza ATP-cytrynianowa
4. Acetylo-CoA służy do syntezy kwasów tłuszczowych. Szczawiooctan jest przekształcany w
jabłczan, który wraca do mitochondrium i jest z powrotem przekształcany w szczawiooctan.

Regulacja biosyntezy kwasów tłuszczowych:

karboksylaza acetylo-CoA (etap 1.) jest aktywowana przez cytrynian i insulinę, a

38

background image

hamowana przez glukagon i adrenalinę (insulina i glukagon działają poprzez kinazy i
fosoforylazy)

acylo-CoA hamują dekarboksylazę pirogronianową (acylo-, nie acetylo-! - chociaż wg
prezentacji acetylo- też)

Elongacja:

w siateczce śródplazmatycznej

potrzeba NADPH

wydłużanie o parzystą liczbę atomów węgla

donorem grupy acetylowej jest malonylo-CoA

enzym: elongaza kwasu tłuszczowego

Nienasycone kwasy tłuszczowe:

egzogenne – linolowy, α-linolenowy, arachidonowy (częściowo)

endogenne:

* palmitooleinowy – powstaje z kwasu palmitynowego
* oleinowy – powstaje z kwasu stearynowego
e: Δ

9

desaturaza

* wielonienasycone kwasy tłuszczowe powstają w wyniku desaturacji i elongacji, np. kwas
arachidonowy może powstawać z kwasu linolowego, gdy jest go dużo

β-OKSYDACJA KWASÓW TŁUSZCZOWYCH

1. „Aktywacja” kwasu tłuszczowego.
WKT + CoA + ATP → acylo-CoA + AMP + Ppi
e: syntaza acylo-CoA (tiokinaza)

PPi jest rozkładany z wydzieleniem energii, dzięki czemu proces biegnie w kierunku β-
oksydacji.

Zachodzi w siateczce śródplazmatycznej, peroksysomach, matrix, zewn. błonie
mitochondrialnej.

2. Transport acylo-CoA do matrix.
A. Acylo-CoA przechodzi przez zewnętrzną błonę mitochondrialną, ale przez wewnętrzną nie.
B. W przestrzeni międzybłonowej:

acylo-CoA + karnityna → acylokarnityna + CoA

e: palmitoilotransferaza karnitynowa I

C. Wymiana acylokarnityny z przestrzeni międzybłonowej na karnitynę z macierzy
mitochondrialnej.
Enzym: translokaza karnitynoacylokarnitynowa
D. W macierzy mitochondrialnej:

acylokarnityna + CoA → karnityna + acylo-CoA

e: palmitoilotransferaza karnitynowa II

E. Karnityna wraca jak w podpunkcie C.

3. Odłączanie acetylo-CoA od acylo-CoA.
a. Powstanie wiązania podwójnego między C2 a C3.

39

background image

FAD → FADH2 (do łańcucha oddechowego)
enzym: dehydrogenaza acylo-CoA
b. Przyłączenie cząsteczki H

2

O (-OH do C3; H do C2).

c. Odłączenie H z grupy -OH przy C3 → powstaje grupa ketonowa przy C3.
NAD+ → NADH + H+
d. Odłączenie acetylo-CoA od C3, przyłączenie CoA do C3 (tioliza).

3-ketoacylo-CoA + CoA → acetylo-CoA + acylo-CoA

enzym: tiolaza

Acylo-CoA wchodzi znowu w cykl oksydacyjny. Acetylo-CoA idzie do cyklu kwasu cytrnowego.

Gdy kwas tłuszczowy ma nieparzystą liczbę atomów węgla, na końcu powstają acetylo-CoA i
propionylo-CoA, który trafia do cyklu kwasu cytrynowego jako bursztynylo-CoA (czyli jest
jedynym glukogennym fragmentem kwasów tłuszczowych).

Nienasycone kwasy tłuszczowe są utleniane przy użyciu izomeraz cis-trans (tłuszcz z wiązaniem
trans między C2 a C3 to tłuszcz po etapie a.).

β-oksydacja 1 mol palmitynianu daje 106 mol zysku netto!

Niedobór karnityny powoduje hipoglikmię, gromadzenie tłuszczu i osłabienie mięśni.

KETOGENEZA

Ciała ketonowe: aceton, acetooctan, β-hydroksymaślan.

β-hydroksymaślan ↔ acetooctan → aceton
Enzymem przekształcającym β-hydroksymaślan w acetooctan i odwrotnie jest dehydrogenaza β-
hydroksymaślanowa.

Ketogeneza:

1. acetoacetylo-CoA + acetylo-CoA + H

2

O → HMG-CoA + CoA

e: syntaza HMG-CoA (3-hydroksy-3-metyloglutarylo-CoA)
2. HMG-CoA → acetooctan + acetylo-CoA
e: liaza HMG-CoA

w mitochondriach hepatocytów

acetoacetylo-CoA to produkt przedostatniego etapu β-oksydacji

Zużywanie ciał ketonowych:

1. acetooctan + bursztynylo-CoA → acetoacetylo-CoA + bursztynian

e: transferaza CoA, bursztynian : szczawiooctan

2. acetoacetylo-CoA → acetylo-CoA (idzie do cyklu kwasu cytrynowego)

e: tiolaza

Regulacja ketogenezy:

- zmniejszenie ilości WKT we krwi

40

background image

- malonylo-CoA jest inhibitorem palmitoilotransferazy karnitynowej I w stanie sytośći
- wzrost WKT powoduje, że więcej acetylo-CoA bierze udział w ketogenezie, a mniej w cyklu
kwasu cytrynowego

Ketonemia – wzrost stężenia ciał ketonowych we krwi.
Ketonuria – wydalanie ciał ketonowych z moczem.

BIOSYNTEZA TRIACYLOGLICEROLI I POCHODNYCH LIPIDÓW

Biosynteza triacylogliceroli:

1. Glicerolo-3-fosforan (G-3-P) może powstać z:

glicerolu (e: kinaza glicerolowa) – zużywamy ATP

fosfodihydroksyacetonu (e: dehydrogenaza glicerolo-3-fosforanowa) – redukcja przy
użyciu NADH + H+, zachodzi np. w mięśniach i tkance tłuszczowej

2. Dwie cząsteczki acylo-CoA („aktywny” WKT) łączą się z G-3-P, tworząc kwas fosfatydowy
(inaczej fosfatydan), (e: acylotransferazy: glicerolo-3-fosforanowa i 1-acylo-G-3-P).

3. Kwas fosfatydowy przyłącza cząsteczkę wody - powstaje 1,2-diacyloglicerol.

4. 1,2-DAG + acylo-CoA → TAG(triacyloglicerol) + CoA
e: acylotransferaza diacyloglicerolowa (DGAT)

jest to reakcja swoista dla syntezy triacylogliceroli

ta reakcja i dostępność DGAT ograniczają szybkość syntezy TAG

etapy 1, 2 i 3 mogą zostać zastąpione w jelicie przez acylowanie 2-monoacyloglicerolu (e:
acylotransferaza monoacyloglicerolowa)

Biosynteza fosfogliceroli:

A. Fosfatydylocholina.

etapy 1, 2 i 3 jak wyżej

4A. 1,2-DAG + CDP-cholina → fosfatydylocholina (lecytyna) + CMP

w ten sam sposób może powstać fosfatydyloetanolamina (tylko zamiast CDP-choliny jest
CDP-etanoloamina)

fosfatydyloseryna powstaje w reakcji fosfatydyloetanoloaminy z seryną

lecytyna może powstać z fosfatydyloetanoloaminy (w wątrobie) – kofaktorem jest S-
adenozylometionina

B. Kardiolipina.

etapy 1 i 2 jak wyżej

3B. Kwas fosfatydowy przyłącza cząsteczkę CTP – powstaje CDP-diacyloglicerol.

4B. CDP-DAG + glicerolo-3-fosforan → fosfatydyloglicerol

5B. CDP-DAG + fosfatydyloglicerol → kardiolipina

41

background image

C. Fosfatydyloinozytol.
- etapy 1, 2 i 3B jak wyżej

4C. CDP-DAG + inozytol → fosfatydyloinozytol
e: syntaza fosfatydyloinozytolowa

kinazy mogą przekształcać fosfatydyloinozytol dalej do 4-fosforanu i 4,5-bisfosforanu
inozytolu

Biosynteza plazmalogenu i PAF:

zachodzi w peroksysomach

1. fosfodihydroksyaceton + acylo-CoA → 1-acylofosfodihydroksyaceton
e: acylotransferaza

2. Potem wiązanie estrowe jest zamieniane na eterowe, powstaje 1-alkilofosfodihydroksyaceton.
e: syntaza

3. 1-alkilofosfodihydroksyaceton jest redukowany, acylowany i hydroksylowany – powstaje 1-
alkilo-2-acyloglicerol
.

4. 1-akilo-2-acyloglicerol może się przekształcić na 2 sposoby:

dodanie etanoloaminy i desaturacja – powstaje plazmalogen

dodanie choliny i zamiana reszty acylowej na acetylową – powstaje PAF (jednym z
enzymów jest fosfolipaza A2)

Plazmalogeny:

fosfolipidy mitochondrialne

PAF (czynnik aktywujący płytki):

powoduje agregację płytek

obniża ciśnienie krwi

bierze udział w procesach zapalnych, chemotaksji i fosforylacji białek

sprzyja powstawaniu wrzodów żołądka

Fosfolipazy:

fosfolipaza A2 działa zawsze przed fosfolipazą B

fosfolipaza C (w tym wypadku można mówić na nią fosfoinozytaza) działa na
fosfatydyloinozytol i odcina trifosforan inozytolu, który jest ligandem dla kanałów
wapniowych i powoduje aktywację białka C

fosfolipaza C – w toksynach bakteryjnych

fosfolipaza A2 – w soku trzustkowym i jadzie węża

fosfolipid po działaniu fosfoipazy A2 – lizofosfolipid (w ogóle jak coś ma -OH zamiast
kwasu tłuszczowego to jest lizo-)

Biosynteza sfingolipidów:

42

background image

Ceramid:

powstaje z palmitoilo-CoA i seryny

enzymem 1. etapu jest palmitoilotransferaza serynowa, kofaktorami: fosforan pirydoksalu
(witamina B

6

) i Mn

2+

produkt tej reakcji jest redukowany, N-acetylowany i desaturowany – powstaje ceramid

ceramid jest cząsteczką sygnałową dla ważnych szlaków komórkowych: cyklu
komórkowego, różnicowania, starzenia, apoptozy

Sfingomieliny:

ceramid + fosfatydylocholina → sfingomielina + diacyloglicerol

powstają w aparacie Golgiego i błonie plazmatycznej

Glikosfingolipidy (cerebrozydy):

galaktozyloceramid (GalCer) – w mielinie

glukozyloceramid (GluCer) – w tkankach pozanerwowych

Powstają w reakcji ceramidu odpowiednio z UDP-galaktozą i UDP-glukozą.

sulfogalaktozyloceramid (sulfatyd): GalCer + PAPS („aktywny” siarczan)

gangliozydy : ceramid + dużo UDP-galaktozy/UDP-glukozy + kwas sialowy (np. N-
acetyloneuraminowy)

Glikosfingolipidy powstają w aparacie Golgiego, są składnikami zewnętrznej warstwy błony
plazmatycznej, odgrywają ważną rolę w przyleganiu i rozpoznawaniu komórek, mogą być
antygenami (np. układu AB0), receptorami dla toksyn bakteryjnych (np. toksyny cholery, która
aktywuje cyklazę adenylanową).

Metabolizm nienasyconych kwasów tłuszczowych:

Syntetyzujemy de novo nienasycone kwasy tłuszczowe tylko do Δ

9

(czyli takie, które mają wiązanie

podwójne przy 9. atomie węgla, licząc od grupy COOH lub przy <9. atomie). Te, które mają
wiązenie podwójne przy atomie >9 musimy sobie skonsumować, albo wytwarzać jedne z drugich.

Z kwasu oleinowego powstaje rodzina ω-9.

Z kwasu linolowego – rodzina ω-6.

Z kwasu α-linolenowego – rodzina ω-3.

Najczęściej syntetyzujemy kwasy o wiązaniu podwójnym przy 9. atomie węgla – enzym: Δ

9

desaturaza.

Niezbędne nienasycone kwasy tłuszczowe: linolowy i α-linolenowy.

W syntezie np. kwasu arachidonowego z linolowego (albo przechodzeniu innych nienasyconych w
drugie), biorą udział desaturazy i elongazy.

Kwas dokozaheksaenowy – DHA (ω:3, 22:6) – występuje w tłuszczu ryb, ale może też powstawać z
kwasu α-linolenowego. Jest potrzebny do rozwoju siatkówki oka i kory mózgu, ponadto występuje

43

background image

w jądrach i w nasieniu.

Kwas arachidonowy może powstawać z kwasu linolowego, dlatego nie jest niezbędny w diecie,
jeżeli używamy np. oleju słonecznikowego, który zawiera dużo linolanu. Występuje w błonach
komórkowych.

Egzogenne kwasy tłuszczowe występują w pozycji sn-2 fosfolipidów.

Tłuszcze trans utrudniają metabolizm tłuszczów cis stymulują powstawanie LDL.

Biosynteza eikozanoidów:

Eikozanoidy dzielą się na 3 grupy:
- prostanoidy: prostaglandyny (PG), prostacykliny (PGI) i tromboksany (TX)
- leukotrieny (LT)
- lipoksyny (LX).

Eikozanoidy powstają z nienasyconych kwasów tłuszczowych C20 – arachidonowego,
ikozapentaenowego lub kwasów powstających z kwasu linolowego i α-linolenowego.

Są dwa szlaki syntezy ikozanoidów:

1. Szlak cyklooksygenazy (dla prostaglandyn, prostacyklin i tromboksanów).

- cyklooksygenaza (inaczej syntaza prostaglandyny H) ma 2 aktywności: cyklooksygenazy i
peroksydazy
- ma 2 izoenzymy: COX-1 i COX-2
- oba izoenzymy są blokowane przez aspirynę
- oba izoenzymy są hamowane kompetycyjnie przez ibuprofen i indometacynę
- kortykosteroidy przeciwzpalne hamują transkrypcję tylko COX-2

A. Prostanoidy grupy 1. (te z indeksem

1

na końcu – np. TXA

1

) powstają z ikozatrienoanu –

pochodnej linolanu.
B. Prostanoidy grupy 2 powstają z arachidonianu.
C. Prostanoidy grupy 3 powstają z ikozapentaenoanu, który powstaje z α-linolenianu.

A w jaki sposób powstają?
Najpierw na substrat (np. arachidonian) działa 1. aktywność COX – cyklooksygenaza. Na tym
etapie działają inhibitory (np. aspiryna). Potem działa peroksydaza (2. aktywność COX) i powstaje
w zależność od grupy: PGH

1

lub PGH

2

lub PGH

3

(ogólnie prostaglandyna H :) ). PGH jest

substratem do syntezy prostanoidów, w zależności od enzymu powstają:
- prostaglandyny – PGD i PGE (enzym: izomeraza)
- prostacykliny (enzym: syntaza prostacyklinowa)
- tromboksany – TXA i TXB (enzym: syntaza tromboksanowa, inhibitor: imidazol) – produktami
ubocznymi są malonodialdehyd i HHT

PGF powstaje z PGE (enzym: reduktaza).
TXB powstaje z TXA (enzymu Harper nie podaje).

Funkcje prostanoidów:

44

background image

- Tromboksany działają naczynioskurczowo i prozakrzepowo (powodują agregację płytek krwi) –
najbardziej TXA

2

.

- Prostacykliny rozszerzają naczynia i działają przeciwzakrzepowo – hamują zlepianie się płytek
krwi.
- Prostaglandyny:
* Zapobieganie zapłodnieniu, przerywanie ciąży, prowokowanie porodu.
* Hamują wydzielanie soku żołądkowego – ulga dla chorych na wrzody żołądka.
* Zmniejszają stężenie cAMP w komórkach kanalików nerkowych i tkanki tłusczowej – w innych
miejscach zwiększają.

Dlaczego aspiryna działa przeciwzakrzepowo?
Blokuje cyklooksygenazę, która odpowiada za syntezę prostacyklin i tromboksanów, ale
tromboksany są syntetyzowane w płytkach, które nie mają jądra komórkowego, więc nie są w stanie
sobie zsyntetyzować nowej cyklooksygenazy i dlatego blokada jest trwała. Natomiast komórki
śródbłonka syntetyzują sobie nową cyklooksygenazę i mogą produkować prostacykliny, które
działają przeciwzakrzepowo.

2. Szlak lipooksygenazy (dla leukotrienów i liposkyn).

- leukotrieny też dzielą się na 3 grupy: grupa 1 powstaje z ikozatrienoanu, grupa 2 powstaje z
arachidonianu, a grupa 3 – z ikozapentaenoanu.
Tylko UWAGA – grupa 1 ma indeks

3

(np. LTA

3

), grupa 2 ma indeks

4

, a grupa 3 ma indeks

5

- lipoksyny powstają tylko z arachidonianu – indeks

4

- są 3 różne lipooksygenazy:

* 5 – lipooksygenaza – syntetyzuje leukotrieny A
* 12 – lipooksygenaza i 15 – lipooksygenaza syntetyzują lipoksyny

Ich działanie polega na przyłączaniu tlenu do kwasu arachidonowego w pozycji odpowiednio: 5, 12
lub 15.

Leukotrieny A -> leukotrieny B.
Leukotrieny A -> leukotrieny C -> leukotrieny D -> leukotrieny E.

Funkcje:

- leukotrieny C

4

, D

4

i E

4

wchodzą w skład SRS-A (wolno reagującej substancji anafilaksji) –

zwężają oskrzela
- leukotrieny B

4

, C

4

, D

4

i E

4

zwiększają przepuszczalność naczyń krwionośnych, aktywują

leukocyty i wywołują chemotaksję – regulacja stanów zapalnych i reakcji anafilaktycznych
- lipoksyny mają działanie przeciwzapalne i hamują namnażanie komórek układu
immunologicznego

TRAWIENIE LIPIDÓW

W świetle jelita:

45

background image

A. TAG → 2-monoacyloglicerol + 2 WKT
e: lipaza trzustkowa

B. 2-monoacyloglicerol → 1-monoacyloglicerol
e: izomeraza

C. 1-monoacyloglicerol → glicerol + WKT
e: lipaza trzustkowa
Glicerol jest wchłaniany przez enterocyty do żyły wrotnej.
2-monoacyloglicerol może być też użyty do resyntezy TAG szlakiem jelitowym (e: acylotransferaza
monoacyloglicerolowa) – wtedy są też syntetyzowane białka i fosfolipidy – powstają chylomikrony.

Lipaza trzustkowa potrzebuje kolipazy.

CHOLESTEROL

Cholesterol jest substratem do syntezy:
- kwasów żółciowych
- witaminy D

3

(kalcytriolu)

- hormonów steroidowych
- mineralokortykoidów
- glikokortykoidów
- androgenów
- gestagenów
- estrogenów

Cholesterol zestryfikowany z resztami długołańcuchowych kwasów tłuszczowych jest składnikiem
błon komórkowych, bo jest amfipatyczny.

Połowa cholesterolu pochodzi z diety, a połowa jest syntytyzowana przez nas. Sitosterole
zmniejszają wchłanianie cholesterolu o 10-15% - czyli te wszystkie margaryny chyba jednak
działają :)

Cholesterol jest wydalany z żółcią – w połowie jako sole kwasów żółciowych, a w połowie jako
cholesterol. Błonnik wspomaga wydalanie cholesterolu i chroni przed rozwojem raka jelita
grubego.

Przenoszenie cholesterolu:
- LDL z wątroby do tkanek obwodowych
- HDL z tkanek obwodowych do wątroby

Biosynteza cholesterolu:

- w cytozolu i siateczce śródplazmatycznej
- we wszystkich komórkach jądrzastych
- głównie w skórze, wątrobie i jelitach
- regulowana jest głównie synteza w wątrobie

5 etapów:

46

background image

1. Synteza mewalonianu – najważniejszy, bo regulowany.

A. 2 acetylo-CoA są kondensowane przez tiolazę do acetoacetylo-CoA.

Podobnie wygląda synteza ciał ketonowych, ale ona zachodzi tylko w mitochondriach hepatocytów,
a to w cytozolu i w różnych komórkach.

B. acetoacetylo-CoA + acetylo-CoA + H

2

O -> HMG-CoA + CoA

enzym: syntaza HMG-CoA

HMG-CoA = 3-hydroksy-3-metyloglutarylo-CoA

C. HMG-CoA -> mewalonian
enzym: REDUKTAZA HMG-CoA

Reduktaza HMG-CoA to najważniejszy enzym w syntezie cholesterolu, bo możemy ją reglować.
Jest hamowana przez: cholesterol, kwasy żółciowe, mewalonian, glukagon, glikokortykoidy i
statyny (mewastatyna, lowastatyna). Aktywują ją insulina i hormony tarczycy.

Poziom cholesterolu powinien być regulowany dietą, ale gdy to nie pomaga, podajemy statyny.

Reduktaza HMG-CoA jest aktywna w formie zdefosforylowanej, czyli aktywuje ją fosfataza, a
dezaktywuje kinaza. Glukagon inaktywuje fosfatazę, więc hamuje też reduktazę. Z kolei insulina
inaktywuje kinazę, więc aktywuje reduktazę.

Cholesterol hamuje transkrypcję reduktazy HMG-CoA, bo hamuje uwalnianie białka SREBP
(białko wiążące sterolowy element regulacyjny), które jest przyczepione do błony komórki. Jego
brak uniemożliwia indukcję transkrypcji reduktazy HMG-CoA.

2. Wytworzenie jednostek izoprenoidowych z mewalonianu.

Mewalonian jest fosforylowany przez 3 kinazy: najpierw 2x przy węglu 5, a potem raz przy 3.
Później traci grupę COOH i grupę PO4 od 3. węgla, powstaje wiązanie podwójne, następnie ulega
jeszcze jakimś drobnym modyfikacjom i z 2 cząsteczek difosforanu pentnylu powstaje difosforan
geranylu
. Gdy do difosforanu geranylu dołączymy jeszcze jeden difosforan izopentenylu to
otrzymamy difosforan farnezylu.
Difosforan farnezylu jest substratem do syntezy dolicholu (e: cis-prenylotransferaza), łańcucha
bocznego ubichinonu i hemu a (e: trans-prenylotransferaza). Służy też do prenylowania białek.

3. Powstanie skwalenu.

2 difosforan farnezylu -> skwalen
enzym: syntetaza skwalenu
kofaktory: NADPH, Mg

2+

, Mn

2+

4. Cyklizacja skwalenu.

47

background image

skwalen -> lanosterol (i chyba tyle nam wystarczy :) )

5. Powstanie cholesterolu.

lanosterol -> zymosterol -> desmosterol -> cholesterol

W ostatnim etapie enzymem jest reduktaza Δ

24

, hamowana przez triparanol.

Biosynteza kwasów żółciowych:

1. cholsterol -> 7α-hydroksycholesterol
enzym: 7α-hydroksylaza
kofaktor: witamina C

7α-hydroksylaza jest aktywowana przez cholesterol, a hamowana przez kwasy żółciowe i niedobór
witaminy C
. Kwasy żółciowe wiążą się z FXR (farnezoidowy X receptor) w jądrze komórkowym i
hamują transkrypcję genu 7α-hydroksylazy.

2. To jest etap, na którym bywa różnie:

A. 7α-hydroksycholesterol -> choloilo-CoA -> kwas glikocholowy lub taurocholowy

B. 7α-hydroksycholesterol -> chenodeoksycholoilo-CoA -> kwas glikochenodeoksycholowy lub
taurochenodeoksycholowy

Ostatni etap obu szlaków to reakcja sprzęgania z tauryną lub glicyną.

C. Powstawanie wtórnych kwasów żółciowych.

kwas gliko-/taurocholowy -> kwas deoksycholowy

kwas gliko-/taurodeoksycholowy -> kwas litocholowy (słabo rozpuszczalny w wodzie i słabo
reabsorbowany)

To wszystko ma miejsce w jelicie, przy pomocy flory bakteryjnej.

Prawidłowe stężenia cholesterolu i lipoprotein:

Cholesterol całkowity (T-C): <190 mg/dl (5,2 mmol/l)
LDL: <130 mg/dl
HDL: >40 mg/dl faceci, >50mg/dl kobiety

LIPOPROTEINY

- zawierają apoproteiny:
apo A-I – w HDL, kofaktor LCAT
apo A-II – inhibitor LPL (LCAT podobno też – są różne wersje)
apo B-48 – w chylomikronach, strukturalna
apo B-100 – w VLDL i LDL, strukturalna, ligand dla receptora LDL

48

background image

apo C-I – kofaktor dla białka przenoszącego estry cholesterolu, produkowana w wątrobie
apo C-II – kofaktor LPL, produkowana w wątrobie
apo C-III – inhibitor LPL, produkowana w wątrobie
apo E – w VLDL i HDL, ligand dla receptora LDL, produkowana w wątrobie

Lipaza lipoproteinowa (LPL) – jest zakotwiczona w błonie komórek śródbłonka przy pomocy
siarczanu heparanu, powoduje 2 procesy, uwalniające TAG:

VLDL → IDL

chylomikron → remnant chylomikronu (mniej TAG, brak apo C)

Uwolnione TAG są w większości wchłaniane do otaczającej tkanki.

Kofaktory LPL: fosfolipdy, apo C-II
Inhibitory LPL: apo A-II, apo C-III

W adipocytach insulina pobudza syntezę LPL.
Sercowa LPL ma większe powinowactwo do TAG od LPL tkanki tłuszczowej → transport TAG do
serca w stanie głodu.

Lipaza wątrobowa:

katalizuje hydrolizę TAG i fosfolipidów

jest ligandem dla receptora apo E, który przyłącza remnanty chylomikronów

Acylotransferaza lecytyna:cholesterol (LCAT):

estryfikuje cholesterol, obecny w błonie HDL, przez co trafia on do wnętrza cząsteczki, co
powoduje:

* przejście HDL

3

w HDL

2

* przejście natywnego HDL do HDL

3

HDL:

- apo A-I, apo C, apo E
- powstają w wątrobie i w jelitach
- HDL wątobowe oddają część swoich apo C i apo E HDL jelitowym, VLDL i chylomikronom
- chroni przed zwiększeniem T-C -> odbiera cholesterol z tkanek i przekazuje do wątroby i nerek,
gdzie jest on wykorzystywany do syntezy hormonów steroidowych. Zarówno przy odbieraniu
cholesterolu z tkanek, jak i przy oddawaniu go tkankom steroidogennym bierze udział SR-B1.

HDL

2

– większe, o mniejszej gęstości, transportują cholesterol z obwodu do tkanek

steroidogennych i wątroby, gdzie go oddaje

HDL

3

– mniejsze, o większej gęstości, przejmuje cholesterol z tkanek obwodowych

Receptor oczyszczający klasy B (SR-B1) – ma 2 funkcje:

w tkankach steroidogennych i wątrobie wiąże apo A-I HDL

2

i wyciąga z niego estry

cholesterolu

w tkankach obwodowych pośredniczy w oddawaniu cholesterolu do HDL

3

przez komórki

49

background image

LDL:

apo B-100

jest źródłem cholesterolu dla komórek tkanek obwodowych

jest pobierany do komórek przy użyciu receptora swoistego dla apo B-100, którego defekt
jest przyczyną rodzinnej hipercholesterolemii

VLDL:

apo B-100, apo C, apo E

powstaje w wątrobie

jest źródłem TAG dla tkanek obwodowych

Chylomikrony:

apo B-48, apo C, apo E, jakieś apo A

powstają w enterocytach

transportują egzogenne TAG, fosfolipidy i cholesterol z jelita do wątroby

Triacyloglicerole:
- powstają w wątrobie
- WKT zestryfikowane z glicerolem
- fruktoza stymuluje ich syntezę

Zmniejszenie stężenia triacylogliceroli:
- probukol
- witamina B

3

- klofibrat
- gemfibrozil

POCHODNE CHOLESTEROLU

Witamina D

3

:

- zwiększa wchłanianie Ca

2+

i PO

4

3-

w przewodzie pokarmowym

- skutki niedoboru:
* u dzieci – krzywica
* u dorosłych – osteomalacja
* infekcje autoimmunologiczne
* częstsza zapadalność na nowotwory
* zaburzenia gospodarki węglowodanowej

Biosynteza:
- w skórze, wątrobie i nerkach

1. 7-dehydrocholesterol -> prowitamina D

3

-> witamina D

3

- zachodzi w skórze pod wpływem światła słonecznego (fotoliza)
- witaminę D

3

możemy przyswajać w diecie

50

background image

2. witamina D

3

-> 25-hydroksycholekalcyferol (25-OH-D

3

)

-zachodzi w wątrobie
- enzym: 25-hydroksylaza

3. 25-OH- D

3

-> 1,24,25-(OH)

3

- D

3

(kalcytriol)

- zachodzi w nerkach
- enzymy: 24-hydroksylaza i 1α-hydroksylaza

Parathormon zwiększe ekspresję 1α-hydroksylazy i w ten sposób zwiększa wchłanianie wapnia.

24-hydroksylaza zmniejsza aktywność witaminy D

3

– chroni organizm przed jej nadmiernym

działaniem.

Kalcytriol reguluje swoją syntezę – hamuje 1α-hydroksylazę i aktywuje 24-hydroksylazę –
powstaje 1,24-(OH)

2

-D

3

, która jest nieaktywna.

Działanie na komórki:
- kalcytriol wiąże się z receptorem jądrowym, który zawiera motyw palca cynkowego
- jego receptor należy do nadrodziny receptorów tarczycowych
- w komórkach jelita indukuje biosyntezę białka wiążącego wapń (CBP)
- zwiększa wychwyt wapnia z przewodu pokarmowego przez enterocyty, ich transport do wnętrza
komórki i uwalnianie do płynu pozakomórkowego

Osteodystrofia nerkowa – choroba miąższu nerek – zaburzenie ostatniego etapu syntezy kalcytriolu
– degradacja i zmniejszenie masy kości

Hormony kory nadnerczy:

- warstwa kłębkowata – mineralokortykoidy
- warstwa pasmowata – glikokortykoidy
- warstwa siatkowata – androgeny (wg prezentacji pasmowata i siatkowata wytwarzają
glikokortykoidy i androgeny, ale ja pamiętam z histo taką wersję)

21 atomów węgla we wszystkich tych związkach – pierścień cyklopentano – perhydrofenantrenowy

Glukokortykoidy – najważniejszy kortyzol (ale myszki mają kortykosteron)

Mineralokortykoidy – najważniejszy aldosteron

Androgeny – powstają z dehydroepiandrosteronu (DHEA) i androstendionu.

Biosynteza hormonów kory nadnerczy:

- cholesterol pochodzi głównie z osocza krwi, bardzo mało z syntezy de novo

1. Transport cholesterolu z cytoplazmy do mitochondriów.
2. Białko stymulujące steroidogenezę, zależne od ACTH (StAR) przenosi cholesterol na
wewnętrzną błonę mitochondrium.
3. Tam znajduje się enzym rozszczepaijący łańcuch boczny, zawierający cytochrom P-450 (P-

51

background image

450

scc

), który katalizuje taką reakcję:

cholesterol -> pregnenolon + aldehyd izokapronowy
Cholesterol jest tu podwójnie hydroksylowany (C22 i C20) i traci łańcuch boczny – powstaje
związek 21-węglowy – pregnenolon.

4. Dalsze rekacje zachodzą różnie.

4.1. Synteza aldosteronu – w siateczce śródplazmatycznej gładkiej warstwy kłębkowatej.

A. Pregnenolon pod wpływem dehydrogenazy 3β-hydroksysteroidowej i Δ

5,4

izomerazy

przekształca się w progesteron (czyli na tym etapie mamy załatwioną przy okazji syntezę jednego
z hormonów płciowych). Polega to na tym, że przy węglu 3. grupa -OH jest zamieniona na =O i rzy
okazji wiązanie podwójne się przemieszcza.

B. Progesteron jest najpierw hydroksylowany w pozycji 21 (powstaje 11-deoksykortykosteron – już
aktywny mineralokortykoid), a potem w pozycji 11 (powstaje kortykosteron – ten od myszek – ma
aktywność glikokortykoidową).
enzymy: 21-hydroksylaza, 11β-hydroksylaza

C. Kortykosteron jest najpierw hydrkosylowany w pozycji 18., a potem ta grupa -OH w pozycji 18.
jest przekształcana w grupę -CHO – powstaje aldosteron.
enzymy: 18-hydroksylaza, 18-hydroksydehydrogenaza

Regulacja – układ renina-angiotensyna-aldosteron:
Spadek stężenia Na+ we krwi stymuluje komórki przykłębuszkowe nerki do uwalniania reniny.
Renina powoduje konwersję angiotensynogenu do angiotensyny I. Angiotensyna I jest w płucach
przekształcana w angiotensynę II, która stymuluje wydzielanie aldosteronu przez komórki warstwy
kłębkowatej nadnerczy (a przy okazji zwęża naczynia).

Choroby: pierwotny hiperaldosteronizm (Conna), wtórny hiperaldosteronizm.

W retikulum gładkim komórek warstwy kłębkowatej jest 18-hydroksylaza, ale nie ma 17α-
hydroksylazy, dlatego powstaje aldosteron, a nie może powstać kortyzol.

4.2. Synteza kortyzolu – w siateczce śródplazmatycznej gładkiej warstwy pasmowatej (tu z kolei
jest 17α-hydroksylaza, a nie ma 18-hydroksylazy).

A. (1) Pregnenolon -> progesteron -> 17-hydroksyprogesteron, lub

(2) Pregnenolon -> 17- hydroksypregnenolon -> 17-hydroksyprogesteron

W opcji (1) najpierw działa dehydrogenaza 3β-hydroksysteroidowa, a potem 17α-hydroksylaza, w
opcji (2) – odwrotnie.

B. 17-hydroksyprogesteron -> 11-deoksykortyzol
enzym: 21-hydroksylaza

C. 11-deoksykortyzol -> kortyzol
enzym: 11β-hydroksylaza

52

background image

Z ciekawszych rzeczy:
- 21-hydroksylaza nadaje aktywność mineralokortykosteroidową
- 11β-hydroksylaza nadaje aktywność glikokortykosteroidową
- W siateczce śródplazmatycznej warstwy kłębkowatej nia ma 17α-hydroksylazy, a w warstwie
pasmowatej nie ma 18-hydroksylazy – dlatego są wyspecjalizowane w produkowaniu jednej grupy
hormonów.
- Za transport kortyzolu w osoczu odpowiadają albuminy, α-globulina i transkortyna globulina
wiążąca kortykosteroidy - CBG). CBG jest głównym białkiem transportującym kortyzol.
Inaktywuje go, ale wydłuża jego okres półtrwania. W takiej nieaktywnej formie jest 92% kortyzolu
– czyli tylko 8% wykazuje aktywność biologiczną.
- receptor dla glikokortykoidów zawiera motyw palca cynkowego i należy do nadrodziny
receptorów steroidowo – tarczycowych. Jest podobny do receptora mineralokortykoidowego, więc
gliko- i mineralokortykoidy mogą dublować swoje działanie.
- choroby: pierwotna niewydolność kory nadnerczy (Addisona), wtórna niewydolność kory
nadnerczy, nadczynność kory nadnerczy (Cushinga)

4.3. Synteza androgenów.

A. Znowu mamy 2 opcje:
(1) 17-hydroksypregnenolon -> dehydroepiandrosteron (DHEA) -> Δ

4

androsten-3,17-dion

(2) 17-hydroksyprogesteron -> Δ

4

androsten-3,17-dion (czuli po prostu androstendion)

W (1) przypadku działa 17,20-liaza i dehydrogenaza 3β-hydroksysteroidowa, w (2) tylko 17,20-
liaza.

DHEA jest słabym androgenem, prohormonem androstendionu – jego wytwarzanie nasia się w
zespole nadnerczowo – płciowym.

Zespół nadnerczowo – płciowy jest spowodowany w 90% niedoborem 21-hydroksylazy, a w
pozostałych 10% - niedoborem 11β-hydroksylazy.

B. Powstawanie testosteronu:
- z DHEA:
DHEA -> Δ5- androstendiol -> testosteron
enzymy: dehydrogenaza 17β-hydroksysteroidowa, dehydrogenaza 3β-hydroksysteroidowa

- z androstendionu:
androstendion -> testosteron
enzym: dehydrogenaza 17β-hydroksysteroidowa

Szlak przez Δ5- androstendiol, zwany szlakiem Δ5 jest u ludzi bardziej prawdopodobny.

LH pobudza steroidogenezę w komórkach Leydiga.

Testosteron jest najsilniejszym androgenem. Powstaje głównie w wyniku konwersji w taknkach (w
nadnerczach powstaje głównie androstendion). 97-99% wiąże się z SHBG (Sex Hormone Binding
Globulin) i jest nieaktywna biologicznie. Estrogeny zwiększają produkcję SHBG, dlatego ich
nadmiar prowadzi do spadku stężenia testosteronu i ginekomastii, ale z drugiej strony są w pewnym
stężeniu potrzebne do produkcji plemników.

53

background image

Testosteron działa anabolicznie na kości, zęby, mięśnie, reguluje spermatogenezę, wpływa na
dodatni bilans azotowy.

Nadczynność tarczycy zwiększa syntezę testosteronu, niedoczynność zminiejsza.

17α-hydroksylaza i 17,20-liaza są częściami tego samego enzymu – P450

C17

.

Inaktywacja testosteronu – oksydacja w pozycji 17 – powstają mało aktywne lub w ogóle
nieaktywne 17-ketosteroidy.

Powstawanie dihydrotestosteronu:
testosteron -> dihydrotestosteron (DHT)
enzym: 5α-reduktaza
Proces polega na redukcji wiązania podwójnego i grupy ketonowej przy 3. atomie węgla.
DHT jest bardzo aktywny, powstaje w tkankach docelowych (pęcherzyki nasienne, prostata, skóra
w okolicach narządów płciowych).
Niedobór 5α-reduktazy – obojniactwo.
Niefunkcjonalne receptory dla DHT – zespół feminizujących jąder (niewrażliwość na androgeny).

4.4 Synteza estrogenów.

A. testosteron -> 17β-estradiol (E2)
enzym: aromataza

B. 17β-estradiol <-> estron (E1)
Estron może także powstawać z androstendionu pod wpływem aromatazy. Estradiol i estron mogą
przechodzić w siebie nawzajem.

C. Estron -> estriol
enzym: 16α-hydroksylaza

Aromataza zawiera P-450 monooksydazę.

Głównym estrogenem u kobiet jest 17β-estradiol. W czasie ciąży łożysko wytwarza także estriol.

Tkanka tłuszczowa także wytwarza estrogeny.

Estrogeny wiążą się z SHBG słabiej niż testosteron, ale za to nie osłabia to ich działania. Najsilniej
wiąże się estradiol (ale i tak 5x słabiej od testosteronu), najsłabiej estriol.

4.5 Synteza progesteronu.
Progesteron powstaje w ciałku żółtym z pregnenolonu pod wpływem dehydrogenazy 3β-
hydroksysteroidowej.

Progesteron może się wiązać z CBG (transkortyną).

Progesteron podawany doustnie jest metabolizowany w wątrobie do pregnandiolu, dlatego
podajemy pochodne progesteronu, które nie są metabolizowane, a mają aktywność progestynową –
np. 17α-hydroksyprogesteron. Natomiast estrogeny można podawać doustnie.

54

background image

Nadnercza płodu syntetyzują kortyzol z progesteronu produkowanego przez łóżysko, bo maleństwo
nie ma jeszcze dehydrogenazy 3β-hydroksysteroidowej i Δ

5,4

izomerazy i nie mogą produkować

kortyzolu klasycznym szlakiem.

Gonadotropina kosmówkowa jest produkowana od 2. tygodnia – jest dowodem na ciążę.

Pierwotny hipogonadyzm – uszkodzenie jajników.
Wtórny hipogonadyzm – probemy z gonadotropiną lub z przysadką.

Zespół Turnera – kariotyp X0 – dysgeneza gonad.

55

background image

ŁAŃCUCH ODDECHOWY

Łańcuch oddechowy jest zbudowany z 4 kompleksów białkowych, osadzonych w wewnętrznej
błonie mitochondrialnej:

1. Oksydoreduktaza NADH-CoQ (kompleks I).

- przenosi elektrony z NADH na koenzym Q

- zawiera FMN/FAD i białka żelazowo-siarkowe

- ma kształt litery L

- droga elektronu: NADH -> FMN -> białka Fe-S -> CoQ

- transport elektronów jest sprzężony z przeniesieniem 4 H

+

z matrix do przestrzeni

międzybłonowej

2. Reduktaza busztynian-CoQ (kompleks II).

- przenosi elektrony z bursztynianu na CoQ

- jest wykorzystywana zamiast kompleksu I przez związki o wyższym (bardziej dodatnim)
potencjale red-ox od NADH

- zawiera FMN/FAD i białka żelazowo-siarkowe

- droga elektronu: bursztynian -> FADH

2

-> białka Fe-S -> CoQ

3. Oksydoreduktaza CoQ-cytochrom c (kompleks III).

- przenosi elektrony z koenzymu Q na cytochrom c

- zawiera białka żelazowo-siarkowe

- w przenoszeniu elektronu biorą udział: cytochrom c

1

, cytochrom b

L

, cytochrom b

H

i białko

Rieske Fe-S

- CoQ przenosi 2 elektrony, a na cytochromie c jest miejsce tylko na 1, dlatego utlenienie 1
cząsteczki CoQ powoduje redukcję 2 cząsteczek cytochromu c

- transport elektronu powoduje przeniesienie 4 H

+

do przestrzeni międzybłonowej

4. Oksydaza cytochromu c (kompleks IV).

- przekazuje elektrony z cytochromu c na tlen:

56

background image

O

2

+ 4H

+

+ 4e

-

-> 2H

2

O (w uproszczeniu oczywiście)

- reakcja wymaga hemu a i a

3

oraz jonów miedzi

- droga elektronu: cytochrom c -> centrum Cu

A

-> hem a -> hem a

3

-> centrum Cu

B

-> O

2

- jednocześnie 2 H

+

są przenoszone z matrix do przestrzeni międzybłonowej

Teoria chemiosmotyczna Mitchella:

- wewnętrzna błona mitochondrialna jest nieprzepuszczalna dla jonów

- w wyniku transportu H

+

przez wewnętrzną błonę mitochondrialną w trakcie reakcji łańcucha

oddechowego powstaje gradient protonowy pomiędzy przestrzenią międzybłonową a macierzą
mitochondrium (jony H

+

gromadzą się po stronie przestrzeni międzybłonowej)

- jest to gradient chemiczny (stężenie H

+

w przestrzeni międzybłonowej jest większe) i

elektryczny (ładunek przestrzeni międzybłonowej jest wyższy)

- kompleksy I, III i IV łańcucha oddechowego są pompami protonowymi i odpowiadają za
utrzymanie gradientu protonowego

- syntaza ATP znajduje się w wewnętrznej błonie mitochondrialnej i jest kanałem umożliwiającym
protonom powrót do macierzy mitochondrialnej zgodnie z gradientem stężeń

- syntaza ATP składa się z 2 sztywno połączonych kompleksów białkowych: F

o

– błonowego kanału

protonowego i F

1

– znajdującego się w matrix, odpowiadającego za zamianę energii kinetycznej

protonów na energię chemiczną zmagazynowaną w ATP

- kompleks F

o

składa się z podjednostek C

- kompleks F

1

składa się z ułożonych naprzemiennie 3 podjednostek α i 3 podjednostek β oraz

znajdującej się w środku pojedynczej podjednostki γ, która odpowiada za połączenie z kompleksem
F

o

- przepływ protonów przez kompleks F

o

powoduje jego obrót, przez co obraca się również

kompleks F

1

- w trakcie obrotu zmienia się konformacja podjednostek β kompleksu F

1

, dzięki czemu jedna z

nich uwalnia gotową cząsteczkę ATP, a inna wiąże do siebie ADP i Pi, z których w następnym
obrocie powstanie ATP, a w kolejnym zostaną uwolnione

- obrót syntazy ATP o 180° powoduje powstanie 3 cząsteczek ATP, bo każda z 3 podjednostek β
obraca się o 180°, czyli przechodzi 1 pełny cykl, kończący się uwolnieniem cząsteczki ATP

- jest to proces fosforylacji oksydacyjnej, w przeciwieństiwe do zachodzącej w glikolizie i cyklu
kwasu cytrynowego fosforylacji substratowej

57

background image

Inhibitory łańcucha oddechowego:

- hamujące przenoszenie elektronów na kompleksach łańcucha oddechowego:

* związki blokujące kompleks I: barbiturany (blokują przenoszenie elektronów z białek Fe-S na
CoQ), pierycydyna A, rotenol

* związki blokujące kompleks II: malonian (hamuje go kompetycyjnie), karboksyna, TTFA

* związki blokujące kompleks III: antymycyna A, BAL, dimerkaprol

* związki blokujące kompleks IV: siarkowodór (H

2

S), tlenek węgla (CO), cyjanek (CN

-

)

- hamujące fosforylację oksydacyjną:

* atraktylozyd – hamuje przenśnik nukleotydów adeninowych – ADP nie dostaje się do
mitochondrium

- rozprzęgające fosforylację oksydacyjną – powodują powrót protonów do matrix w inny sposób niż
przez syntazę ATP:

* 2,4-dinitrofenol

* termogenina – występuje w brunatnej tkance tłuszczowej

* oligomycyna

Wahadłowce substratowe:

- przenoszą substraty i produkty łańcucha oddechowego przez wewnętrzną błonę mitochondrialną

- wahadłowiec glicerolofosforanowy:
* przenosi do matrix równoważniki redukujące
* występuje w mózgu i mięśniach białych
* sposób działania:

1. W cytozolu zachodzi reakcja:
NADH + H

+

+ fosfodihydroksyaceton -> NAD

+

+ glicerolo-3-fosforan

2. Glicerolo-3-fosforan przechodzi przez zewnętrzną błonę mitochondrialną.

3. Na wewnętrznej błonie mitochondrialnej zachodzi reakcja:
glicerolo-3-fosforan + FAD -> fosfodihydroksyaceton + FADH

2

I mamy równoważnik redukujący w matrix !

Enzymem dla obu reakcji jest dehydrogenaza glicerolo-3-fosforanowa, która ma 2 izoformy –

58

background image

cytozolową i mitochondrialną.

- wahadłowiec jabłczanowo-asparaginianowy
* występuje we wszystkich komórkach organizmu
* sposób działania:

1. W cytozolu zachodzi reakcja:
NADH + H

+

+ szczawiooctan -> NAD

+

+ jabłczan

enzym: dehydrogenaza jabłczanowa

2. Jabłczan przechodzi przez obie błony mitochondrialne.

3. W macierzy mitochondrialnej zachodzi reakcja:
jabłczan + NAD

+

-> szczawiooctan + NADH + H

+

enzym: dehydrogenaza jabłczanowa

Szczawiooctan nie przechodzi przez wewnętrzną błonę mitochondrialną.

4. W matrix zachodzi reakcja:
szczawiooctan + glutaminian -> α-ketoglutaran + asparaginian
enzym: aminotransferaza

5. α-ketoglutaran przechodzi przez błony mitochondrialne na zasadzie antyportu - jest
wymieniany na jabłczan, a asparaginian – na jon wodorowy.

6. W cytozolu zachodzi reakcja:
α-ketoglutaran + asparaginian -> szczawiooctan + glutaminian
enzym: aminotransferaza

- wahadłowiec fosfokreatynowy
* występuje w mięśniu sercowym i w mięśniach szkieletowych
* pozwala na szybkie przeniesienie wysokoenergetycznego fosforanu z mitochondriów do cytozolu
* zasada działania:

1. ATP przechodzi z macierzy mitochondrialnej do przestrzeni międzybłonowej przy pomocy
przenośnika nukleotydów adeninowych.

2. W przestrzeni międzybłonowej zachodzi reakcja:
ATP + kreatyna -> ADP + fosfokreatyna
enzym: izoenzym mitochondrialny kinazy kreatynowej (CK

m

)

3. Fosfokreatyna przechodzi przez pory białkowe w zewnętrznej błonie mitochondrialnej do
cytozolu.

4. W cytozolu zachodzi reakcja:
fosfokreatyna + ADP -> kreatyna + ATP
enzym: izoenzym kinazy kreatynowej ułatwiający procesy wysokoenergetyczne (CK

a

)

59

background image

Choroby związane z defektami łańcucha oddechowego:

- miopatia mitochondrialna niemowląt – śmiertelna

- dysfunkcja nerek

- mitochondrialna encefalopatia, kwasica mleczanowa i udar (MELAS) – dziedziczny niedobór
kompleksu I lub kompleksu IV łańcucha oddechowego – mutacja mitochondrialnego DNA

60

background image

ENZYMY

Klasyfikacja enzymów:

L.p.

Klasa enzymu

Rodzaj katalizowanej reakcji

1.

Oksydoreduktazy

Reakcje utleniania i redukcji.

2.

Transferazy

Przenoszenie jednostek i grup funkcyjnych.

3.

Hydrolazy

Hydroliza wiązań np. C-C.

4.

Liazy

Rozszczepienie wiązań z pozostawieniem wiązania
podwójnego, np. CH

2

-CH

2

-> CH=CH

5.

Izomerazy

Przejście jednego izomeru w drugi na skutek zmian
geometrycznych lub strukturalnych cząsteczki.

6.

Ligazy

Utworzenie wiązania pomiędzy cząsteczkami przy udziale
energii powstałej w wyniku hydrolizy ATP.

Budowa enzymu:

- miejsce katalityczne – tam zachodzi katalizowana reakcja

- miejsce allosteryczne – nie pasuje kształtem do substratu, za to mogą się tam wiązać inne
cząsteczki, np. regulatory

- apoenzym – białkowa część enzymu

- część niebiałkowa enzymu:
* kofaktor – związany nietrwale z apoenzymem lub substratem
* koenzym – wiąże się nietrwale z substratami i przenosi je do miejsca aktywnego
* grupa prostetyczna – trwale związana z apoenzymem za pomocą wiązań kowalencyjnych lub
niekowalencyjnych

apoenzym + kofaktor/koenzym/grupa prostetyczna = holoenzym

Rodzaje koenzymów:

- przenoszące H

+

, np.: NAD

+

, NADP

+

, FMN, FAD, kwas liponowy, koenzym Q

- przenoszące inne grupy, np.: fosforany cukrów, CoA-SH, pirofosforan tiaminy, fosforan
pirydoksalu, koenzymy folianowe, biotyna, koenzymy kobamidowe, kwas liponowy

61

background image

Entalpia swobodna:

G =

G

prod.

-

G

substr.

G = 0 -> reakcja odwracalna (stan równowagi)

G < 0 -> reakcja biegnie w prawą stronę (samorzutnie)

G > 0 -> reakcja biegnie w lewą stronę lub w prawą stronę w przy nakładzie energii z rozpadu

ATP (reakcja wymuszona)

[

G] = [J] -> czyli entalpia swobodna to pewien rodzaj energii

Stała równowagi reakcji:

nA + mB <-> xC + yD

K = [A]

n

* [B]

m

/ [C]

x

* [D]

y

K =

[ A]

n

[ B]

m

[C ]

x

[ D]

y

Dlatego usuwanie produktu przyspiesza reakcję (zmniejszamy mianownik, substraty
przekształcają się w produkty – to zmniejsza licznik i zwiększa mianownik, więc ułamek wraca do
normalnej wartości).

Stan przejściowy:

1. A-B + C <-> A-B-C

G

1

(energia aktywacji reakcji)

2. A-B-C <-> A + B-C

G

2

Ogółem:
A-B + C <-> A + B-C

G =

G

1

+

G

2

Na podstawie

G nie da się wywnioskować ile jest stanów przejściowych, ani jakie one są.

Szybkość reakcji:

Żeby 2 cząsteczki mogły ze sobą przereagować, muszą się ze sobą zderzyć i mieć w trakcie
zderzenia energię kinetyczną wyższą/równą energii aktywacji przejścia w stan przejściowy.
Dlatego na szybkość reakcji wpływają:

- temperatura – im wyższa, tym wyższą energię kinetyczną mają cząsteczki, więc więcej zderzeń
kończy się wejściem w stan przejściowy, czyli reakcja zachodzi szybciej

- stężenie – im wyższe, tym więcej jest cząsteczek, więc tym częstsze są zderzenia – reakcja
zachodzi szybciej

62

background image

Enzymy:

- stabilizują stan przejściowy

- obniżają energię aktywacji reakcji

- przyspieszają reakcję

- wiążą się z substratami przejściowo – po reakcji są wracają do stanu początkowego:
A + B + E <-> C + D + E

- nie wpływają na stałą równowagi reakcji

K= [A]*[B]*[E] / [C]*[D]*[E] = [A]*[B] / [C]*[D]

K =

[ A]

[B]

[E ]

[C ]

[ D]

[ E ]

=

[ A]

[B]

[C ]

[ D]

- zbyt wysoka temperatura powoduje denaturację enzymu

- pH – wpływając na ładunek enzymu i substratów może zmieniać szybkośc reakcji, może także
powodować denaturację enzymu, gdy jest zbyt wysokie albo zbyt niskie

Mechanizmy działania katalitycznego enzymów:

1. Kataliza przez sąsiedztwo.

- cząsteczki substratu przyłączają się w centrum aktywnym enzymu i są ustawiane w taki sposób,
żeby najłatwiej było im oddziaływać między sobą

- szybkość reakcji rośnie co najmniej 1000 x

2. Kataliza kwasowo-zasadowa.

- grupy prostetyczne i wolne grupy –COOH i –NH

2

reszt aminokwasowych działają na substrat jako

kwasy lub zasady

- kataliza specyficzna – biorą w niej udział tylko jony H

3

O

+

lub OH

-

i tylko ich stężenie warunkuje

aktywność enzymu (czyli też szybkość reakcji)

- kataliza ogólna – jej szybkość zależy od stężenia wszystkich kwasów/zasad

- przykłady katalizy kwasowo-zasadowej: pepsyna, katepsyny, proteaza HIV (wszystkie należą do
rodziny proteaz asparaginianowych)

3. Kataliza przez odkształcenie cząsteczki substratu.

- enzym przyłącza substrat w taki sposób, żeby wywołać naprężenia w konkretnym wiązaniu i
czynią je bardziej podatnym na rozerwanie

- działają tak enzymy katalizujące reakcje lizy (np. liazy)

63

background image

4. Kataliza kowalencyjna.

- powstaje wiązanie kowalencyjne między enzymem a substratem/substratami

- kompleks enzym-substrat staje się substratem katalizowanej reakcji, jednocześnie obniżając jej
energię aktywacji

- po zakończeniu reakcji enzym odłącza się od substratu

- często do wiązania substratu są wykorzystywane reszty cysteiny i seryny, czasami histydyny

- przykłady katalizy kowalencyjnej: chymotrypsyna, fruktozo-2,6-bisfosfataza

Równanie Michaelisa – Menten:

v

i

= v

max.

* [S] / K

m

+ [S]

vi =

vmax.

[S ]

Km+[ S ]

v

i

– szybkość reakcji

v

max.

– maksymalna szybkość reakcji

[S] – stężenie substratu
K

m

– stała Michaelisa – Menten – stężenie substratu, przy którym v

i

= 0,5 v

max

Jeżeli [S] jest dużo mniejsze od K

m

, to:

K

m

+ [S] ≈ K

m

v

i

= v

max.

* [S] / K

m

vmax. i K

m

są stałymi, więc szybkość reakcji zależy od [S].

Jeżeli [S] jest dużo większe od K

m

, to:

K

m

+ [S] ≈ [S]

v

i

= v

max.

* [S] / [S] = v

max.

Dlatego przy wzroście stężenia substratu szybkość reakcji rośnie w kierunku szybkości
maksymalnej. Gdy v

i

= v

max.

, dalszy wzrost stężenia substratu nie wpływa na szybkość reakcji.

Jeżeli [S] = K

m

, to:

K

m

+ [S] = 2 [S]

v

i

= v

max.

* [S] / 2[S] = 0,5 v

max.

Wykres Lineweavera – Burka:

1/ v

i

= K

m

/ v

max.

*[S] + 1/ v

max.

1

vi

=

Km

vmax.

[S ]+

1

vmax.

- służy do wyznaczania v

max.

i K

m

(przy x=0, y=1/ v

max.

; przy y=0, x=1/ K

m

)

Równanie Hilla:

- służy do opisu kinetyki reakcji katalizowanych przez enzymy multimeryczne (takie, które wiążą

64

background image

substrat w więcej niż 1 miejscu, czyli mogą wiązać więcej niż 1 cząsteczkę substratu jednocześnie –
przyłączanie kooperatywne)

Inhibitory:

1. Inhibitory kompetycyjne.

- w budowie podobne do substratów (analogi substratów)

- zajmują miejsce substratu w centrum katalitycznym enzymu i blokują go – zmniejszają liczbę
cząsteczek enzymu gotowych do katalizowania reakcji

- ich działanie można osłabić poprzez zwiększenie stężenia substratu – wtedy cząsteczki substratu
mają większą szansę na wygranie rywalizacji o centrum katalityczne enzymu, bo jest ich więcej

- nie mają wpływu na v

max.

, ale zwiększają K

m

– większe stężenie substratu jest potrzebne do

osiągnięcia szybkości maksymalnej

2. Inhibitory niekompetycyjne.

- przyłączają się do enzymu poza centrum katalitycznym

- zmniejszają zdolność enzymu do przekształcania substratu w produkt, natomiast zwykle nie
wpływają na zdolność enzymu do przyłączania substratu

- zmniejszają v

max.

, ale nie mają wpływu na K

m

, dlatego zwiększenie stężenia substratu nic nie

daje

Regulacja aktywności enzymów:

- wolna:
* regulacja syntezy enzymu – na zasadzie operonu (fragment DNA podlega transkrypcji dopiero,
gdy do nici przyłączy się odpowiedni związek - induktor)
* regulacja degradacji enzymu
* regulacja hormonalna

- szybka:
* modyfikacje kowalencyjne (proteoliza i fosforylacja – mogą być odwracalne lub nieodwracalne)
* modyfikacje allosteryczne (np. sprzężenie zwrotne)

65

background image

WITAMINY

Witamina B

1

(tiamina):

- bierze udział w przemianie węglowodanów

- difosforan tiaminy jest koenzymem dehydrogenaz: pirogronianowej,

α

-ketoglutarowej,

dehydrogenazy ketokwasów o rozgałęzionym łańcuchu (leucyny, izoleucyny i waliny) – ich
produktem jest acetylo-CoA

- difosforan tiaminy jest też koenzymem transketolazy w szlaku pentozofosforanowym – przenosi
aktywną grupę aldehydową

- niedobór tiaminy powoduje:
* chorobę beri-beri (zapalenie nerwów obwodowych, niewydolność serca, obrzęki)
* encefalopatię Wernickiego z psychozą Korsakowa
* kwasicę mleczanową (przy diecie wysokowęglowodanowej – nie można przekształcić
pirogronianu w acetylo-CoA, więc odkłada się mleczan)

- oznacza się ją badając aktywność transketolazy erytrocytów

Witamina B

2

(ryboflawina):

- występuje w mleku

- jest światłoczuła

- jest źródłem mononukleotydu flawinowego (FMN) i dinukleotydu flawinowego (FAD)

- FMN i FAD są koenzymami oksydaz i dehydrogenaz - przenośnikami elektronów w reakcjach
red-ox np. w cyklu Krebsa czy w utlenianiu kwasów tłuszczowych

- jej zawartość można ocenić oznaczając aktywność reduktazy glutationowej erytrocytów

Witamina B

3

(niacyna):

- może być wytwarzana z tryptofanu (czyli jeśli mamy wystarczająco dużo tryptofanu, to w sumie
nie jest witaminą)

- może występować w postaci kwasu nikotynowego lub amidu kwasu nikotynowego

- amid kwasu nikotynowego wchodzi w skład NAD i NADP

- NAD i NADP są koenzymami w reakcjach utleniania i redukcji – przenoszą proton

- NAD jest źródłem ADP-rybozy w procesie ADP-rybozylacji białek podczas naprawy DNA

66

background image

- niedobór niacyny i tryptofanu powoduje pelagrę (światłowrażliwe zapalenie skóry, demencja,
biegunki)

- niedobór niacyny może być spowodowany zarówno zbyt niską podażą, jak i wadami
genetycznymi – zespołem Hartnupa lub zespołem rakowiaka złośliwego

- kwas nikotynowy obniża stężenie cholesterolu w osoczu

- nadmiar niacyny powoduje napadowe rozszerzenie naczyń krwionośnych

Witamina B

6

:

- występuje w postaci pirydoksyny, pirydoksaminy, pirydoksalu oraz ich 5’-fosforanów – aktywny
jest 5’-fosforan pirydoksalu

- fosforan pirydoksalu występuje głównie w mięśniach

- jest koenzymem dla enzymów przekształcających aminokwasy – transaminaz i dekarboksylaz

- jest kofaktorem fosforylazy glikogenowej w procesie glikogenolizy

- przerywa działanie hormonów steroidowych – odłącza kompleks hormon-receptor od DNA

- niedobór witaminy B

6

powoduje:

* zwiększoną wrażliwość na hormony steroidowe – zwiększa ryzyko hormonozależnego raka
piersi, macicy lub prostaty
* zaburzenia przemiany tryptofanu i metioniny

- niedobór może być spowodowany leczeniem izoniazydem

- nadmiar fosforanu pirydoksalu powoduje neuropatię sensoryczną

- jej zawartość oznacza się badając aktywność aminotransferaz w erytrocytach

Witamina B

12

(kobalamina):

- zawiera kobalt w pierścieniu korynowym

- jej źródłem jest pokarm pochodzenia zwierzęcego

- w żołądku jest wiązana z kobalofiliną, która oddziela się od niej w dwunastnicy

- niewydolność zewnątrzwydzielnicza trzustki – brak enzymu hydrolizującego kompleks
kobalofilina-kobalamina – niedobór witaminy B

12

- jest wchłaniana w jelicie, gdy jest związana z czynnikiem wewnętrznym – niedobór czynnika
wewnętrznego powoduje niedobór witaminy B

12

67

background image

- jest magazynowana w wątrobie jako: hydroksykobalamina (nieaktywna), metylokobalamina i
adenozylokobalamina (aktywne)

- niedobór witaminy B

12

powoduje złośliwą niedokrwistość megaloblastyczną

- od witaminy B

12

zależy aktywność 3 enzymów:

* mutazy metylomalonylo-CoA – w glukoneogenezie, katabolizmie waliny, izoleucyny,
cholesterolu i propionylo-CoA (czyli też kwasów tłuszczowych o nieparzystej liczbie atomów
węgla)

* aminomutazy leucynowej

* syntazy metioninowej – w reakcji metylacji homocysteiny przez metylotetrahydrofolian
(regeneracja S-adenozylometioniny) – jeśli ta reakcja jest zablokowana z powodu niedoboru
witaminy B

12

, to mamy do czynienia z „pułapką folianową” - gromadzeniem się

metylotetrahydrofolianu, którego nie można wykorzystać, bo syntaza metioninowa nie działa

- jej zawartość w osoczu mierzy się oznaczając ilość kwasu metylomalonylowego w moczu

Kwas foliowy:

- jego aktywną postacią jest tetrahydrofolian

- tetrahydrofolian może mieć grupę jednowęglową (np. metylową) przyłączoną do atomu N

5

, N

10

lub do obydwu jednocześnie jako coś na kształt mostu (w Harperze jest ładnie narysowane)

- 5-formylotetrahydrofolian (kwas folinowy/leukoworyna) – lek przeciwnowotworowy, często
łączony z 5-fluorouracylem – umożliwia syntezę DNA w wypadku zastosowania metotreksatu

- tetrahydrofolian jest przenośnikiem grup jednowęglowych w procesach syntezy puryn i
powstawania tyminy – jest przekształcany do dihydrofolianu, który jest regenerowany przez
reduktazę dihydrofolianową

- metotreksat (analog 10-metylotetrahydrofolianu) hamuje reduktazę dihydrofolianową –
uniemożliwia syntezę DNA, dlatego jest lekiem przeciwnowotworowym

- trimetoprim – lek przeciwbakteryjny – blokuje reduktazę dihydrofolianową u bakterii

- pyrimetamina – lek przeciwmalaryczny – też blokuje reduktazę dihydrofolianową

- niedobór folianów powoduje niedokrwistość megaloblastyczną

- prawidłowa suplementacja kwasem foliowym zmniejsza ryzyko miażdżycy, zmian zakrzepowych
i nadciśnienia tętniczego, a prowadzona przez rodziców przed poczęciem dziecka zmniejsza
prawdopodobieństwo wystąpienia defektów cewy nerwowej (np. rozszczepu kręgosłupa)

Biotyna:

68

background image

- wytwarzana przez florę bakteryjną jelit

- wiązana przez awidynę – białko występujące w jajkach – dlatego jedzenie dużej ilości surowych
jaj może powodować niedobór biotyny

- występuje w 3 formach: biotyna, biocytyna, karboksybiocytyna

- jest koenzymem karboksylaz – jest przenośnikiem CO2, wiąże się z resztą lizynową apoenzymu

- uczestniczy w regulacji cyklu komórkowego – stymuluje kluczowe jego białka

- niedobór biotyny – depresja, halucynacje, bóle mięśniowe, zapalenie skóry

Kwas pantotenowy:

- jest składnikiem koenzymu A – bierze udział w cyklu Krebsa, β-oksydacji kwasów tłuszczowych,
syntezie cholesterolu i reakcjach acetylacji

- jest składnikiem białka przenoszącego reszty acylowe (ACP) – bierze udział w syntezie kwasów
tłuszczowych

Witamina C (kwas askorbinowy/dehydroaskorbinowy):

- ma właściwości redukujące, dlatego niszczy wolne rodniki (jest przeciwutleniaczem)

- jest koenzymem dla :

* β-hydroksylazy dopaminowej – w syntezie noradrenaliny i adrenaliny (enzym zawierający
miedź)

* hydroksylazy peptydoglicynowej – w procesie tworzenia grupy amidowej z końcowej reszty
glicynowej w białkach (enzym zawierający miedź)

* wielu hydroksylaz zawierających żelazo (np. hydroksylaz prolinowej i lizynowej w syntezie
kolagenu)

- niedobór witaminy C powoduje szkorbut – upośledzoną syntezę kolagenu

KOENZYMY

Dinukleotyd niotynoamidoadeninowy (NAD):

- zawiera amid kwasu nikotynowego (witaminę B

3

)

- może być przenośnikiem protonów lub elektronów

69

background image

- jest utleniany w kompleksie I łańcucha oddechowego

Fosforan dinukleotydu nikonynoamidoadeninowego (NADP):

- zawiera amid kwasu nikotynowego (witaminę B

3

)

- może być przenośnikiem protonów lub elektronów

- jest redukowany w szlaku pentozofosforanowym

- jest wykorzystywany w biosyntezie kwasów tłuszczowych i cholesterolu (w formie
zredukowanej)

Mononukleotyd flawinowy (FMN):

- powstaje z ryboflawiny (witaminy B

2

)

- jest grupą prostetyczną niektórych oksydaz (np. oksydazy aminokwasowej)

Dinukleotyd flawinoadeninowy (FAD):

- zawiera ryboflawinę (witaminę B

2

)

- może być przenośnikiem protonów lub elektronów

- bierze udział w cyklu kwasu cytrynowego (reakcja: bursztynian -> fumaran)

S-adenozylometionina:

- jest donorem grupy metylowej w procesach metylacji

Koenzym A:

- jest zbudowany z: cysteaminy, kwasu pantotenowego i 3'-β-fosforanu ADP

- jest przenośnikiem grup acylowych

- bierze udział w biosyntezie kwasów tłuszczowych i cholesterolu, β-oksydacji kwasów
tłuszczowych, cyklu kwasu cytrynowego

3'-fosfoadenozyno-5'-fosfosiarczan (PAPS):

- nazywany „aktywnym siarczanem”

70

background image

- jest donorem grupy siarczanowej np. w procesie biosyntezy cysteiny

71

background image

HORMONY PRZYSADKI

Dzielą się na 3 grupy:

1. Hormony białkowe.

A. Hormon wzrostu (GH).
- zwiększa syntezę białka w mięśniach, pobieranie aminokwasów przez mięśnie, proliferację
komórek mięśniowych – ogólnie jest dobry na bajceps :)
- zmniejsza katabolizm aminokwasów i stężenie mocznika we krwi
- zwiększa lipolizę, hamuje lipogenezę
- zwiększa glkogenolizę i glukoneogenezę
- indukuje produkcję IGF – I, który odpowiada za wzrost kośći na długość i wzrost apozycyjny
- daje też podobny efekt do prolaktyny

- jest produkowany przez komórki kwasochłonne przedniego płata przysadki
- jego synteza jest regulowana przez podwzgórze przy pomocy liberyn i statyn
- u różnych gatunków jest podobny, ale u nas działa tylko ten od naczelnych

Karłowatość z niedoboru GH – niskie stężenie wszystkich 3 czynników (GH, IGF-I, IGF-II) –
dodatnia reakcja na podanie egzogennego GH.

Pigmeje – niedobór tylko IGF-I – defekt wytwarzania IGF-I – ujemna reakcja na podanie
egzogennego GH.

Karłowatość typu Larona – defekt receptorów dla GH w wątrobie – dużo GH, mało IGF-I i IGF-II –
ujemna reakcja na podanie egzogennego GH.

Nadmiar GH:
- spowodowany przez gruczolaki przedniego płata przysadki
- przed zamknięciem nasad kości długich – gigantyzm
- po zamknięciu nasad kości długich – akromegalia
- powoduje też zwiększenie poziomu glukozy we krwi i zwiększoną ketogenezę

B. Prolaktyna (PRL).

- produkowana przez przedni płat przysadki
- hamowana przez prolaktostatynę
- inicjuje i utrzymuje laktację
- guzy przysadki – nadmiar prolaktyny – mlekotok (u kobiet), ginekomastia i impotencja (u
mężczyzn)

C. Somatomammotropina kosmówkowa (CS).

- produkowana przez syncytium łożyska
- funkcja podobna do hormonu wzrostu

2. Hormony glikoproteinowe.

- zbudowane z 2 podjednostek: α – wspólnej dla wszystkich hormonów i β – decydującej o

72

background image

aktywności biologicznej hormonu.
- łączą się z receptorem i powodują syntezę cAMP

A. Folitropina (FSH).
- pobudza dojrzewanie pęcherzyków Graafa
- zwiększa produkcję estrogenów
- wydzielanie zwiększa się pod wpływem folikuloliberyny (FSH-RH)
- hamowana przez sprzężenie zwrotne ujemne

B. Lutropina (LH).
- zwiększa syntezę testosteronu
- odpowiada za owulację
- odpowiada za przekształcenie komórek ziarnistych w komórki luteinowe, które wytwarzają
progesteron
- odpowiada za przekształcenie komórek warstwy wewnętrznej pęcherzyka w komórki
paraluteinowe, które produkują estrogeny
- podtrzymuje produkcję estrogenów i progesteronu przez ciałko żółte
- wydzielanie jest zwiększane przez gonadotropinę (GnRH)
- niedobór może być spowodowany niedoczynnością tarczycy

C. Gonadotropina kosmówkowa (hCG).
- produkowana przez syncytiotrofoblast łożyska
- funkcje podobne do LH
- utrzymuje funkcje ciałka żółtego

D. Tyreotropina (TSH).
- wiąże się z receptorem błonowym i indukuje syntezę cAMP, co aktywuje wszystkie etapy syntezy
hormonów tarczycy
- powoduje zwiększenie masy tarczycy
- pobudzana przez tyreoliberynę (TRH), stres, zimno
- hamowana przez sprzężenie zwrotne, dopaminę i somatostatynę

3. Peptydy rodziny proopiomelanokortyny (POMC).
- POMC dzieli się w pośrednim płacie przysadki na ACTH, β-lipotropinę (β-LPH) i N-koniec, z
którego powstaje γ-MSH.
- ACTH może rozpaść się na α-MSH i CLIP.
- Z β-LPH powstają β-MSH i β-endorfina.
- β-endorfina jest skracana do pochodnych, które nie mają właściwości opioidowych.
- To wszystko może zachodzić także w przewodzie pokarmowym, łożysku i narządach płciowych
męskich.

A. Kortykotropina (ACTH).
- działa na komórki kory nadnerczy
- wiąże się z receptorem i aktywuje cyklazę adanylanową – pobudza produkcję cAMP
- cAMP indukuje przemiany cholesterolu do kortyzolu i DHEA

B. β-lipotropina (β-LPH).
- pobudza lipolizę
- uwalnia WKT z tkanki tłuszczowej
- powstaje z karboksylowej części prekursora

73

background image

C. Endorfiny.
- regulują odczuwanie bólu poprzez działanie na receptory morfinowe (działają o wiele silniej od
morfiny)
- są acetylowane w pośrednim płacie przysadki, ale powstają gdzie indziej

D. Melanotropina (MSH).
- odpowiada za rozproszenie zianistości melaniny, czyli za kolor skóry
- nadmiar w chorobie Addisona – powoduje przebarwienia

4. Hormony tylnego płata przysadki.
- produkowane przez podwzgórze, uwalniane przez przysadkę
- transportowane dzięki neurofizynom – omijają barierę krew - mózg
- mają wiązanie cykliczne – 2 cysteiny połączone wiązaniem dwusiarczkowym

A. Wazopresyna (ADH).
- produkowana w jądrze nadwzrokowym podwzgórza
- zwiększa wchłanianie zwrotne wody w cewkach zbiorczych poprzez wbudowywanie w nie
akwaporyn – działanie przez receptor V2
- powoduje skurcz naczyń krwionośnych, działając na receptory V1 (pobudza fosfolipazę C)
- powoduje wzrost ciśnienia tętniczego
- wydzielana pod wpływem zwiększenia osmolarności osocza – przywraca prawidłową
osmolarność
- receptory V2 (w nerkach) działają przez cAMP
- receptory V1 (wszędzie indziej) działają przez IP

3

(trifosforan inozytolu)

- sekrecja jest blokowana przez alkohol
- niedobór – moczówka prosta:
* zaburzenia syntezy/ sekrecji
* nerkowopochodna – brak receptorów dla ADH – może być powodowany przez sole litu,
wykorzystywane w leczeniu psychozy maniakalno – depresyjnej

B. Oksytocyna.
- produkowana w jądrze przykomorowym podwzgórza
- wydzielana pod wpływem rozszerzenia macicy w trakcie porodu i pod wpływem drażnienia
gruczołów sutkowych
- powoduje skurcz mięśni gładkich macicy – przyspieszenie porodu i skurcz komórek nabłonkowo
– mięśniowych otaczających pęcherzyki w gruczole sutkowym – wydzielanie mleka
- ilość receptorów dla oksytocyny zwiększa się pod wpływem estrogenów, a zmniejsza pod
wpływem progesteronu

GOSPODARKA WAPNIOWA

47% w formie zjonizowanej – najbardziej aktywne
47% związane z albuminami
6% związane z anionami cytrynianowymi i fosforanowymi

Parathormon (PTH):
W siataczce śródplazmatycznej szorstkiej odcinana jest sekwencja sygnalna, w aparacie Golgiego –
sekwencja pro – i mamy parathormon.

74

background image

Synteza PTH jest stała – regulujemy sekrecję. Nadmiar Ca

2+

zwiększa degradację PTH i przez to

jest go mniej. Ogólnie ok. 80-90% PTH jest degradowane i w tym przedziale zachodzi regulacja.
Z kolei spadek stężenia Ca

2+

powoduje wzrost stężenia cAMP, który zmniejsza degradację PTH.

PTH działa przez cyklazę adenylanową.

PTH oddziaływuje na nerki – powoduje dojrzewanie kalcytriolu.

PTH zmniejsza wydalanie Ca

2+

z moczem, za to zwiększa wydalanie PO

4

3-

.

75


Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
proj sygnalizacja by JJ id 3975 Nieznany
notatki inż ruchu by JJ
MK proj by JJ
BIOCHEMIA cw.2 made by Tomek - białka, biochemia
proj sygnalizacja by JJ id 3975 Nieznany
biochemia pytania z forum by ściech
Some tips on drying foods at home By Jj Fallick
BIOCHEMIA II termin egzaminu 06 i 07 LEK i STOMA by KaMilka
zgapa egzam JJ by Chickas
biochem k2 by sweeet, biochemia koła
Egzamin biochemia - stomatologia 2009 - I termin by ja, BIOCHEMIA
Confocal optics microscopy for biochemical and cellular high throughput screening by Lenka Zemanová,
11 BIOCHEMIA horyzontalny transfer genów
Biochemia z biofizyką Seminarium 2

więcej podobnych podstron