Ć

wiczenie nr 3

(03-06.03.2014)

GRONKOWCE

Rodzaj

Staphylococcus

1.

Czynniki determinujące chorobotwórczość

2.

Epidemiologia i klinika zakażeń wywoływanych przez gronkowce

3.

Mechanizmy oporności gronkowców na antybiotyki (produkcja β-laktamaz,

metycylinooporność, MLS

B

, oporność na glikopeptydy)

4.

Diagnostyka laboratoryjna zakażeń gronkowcowych

Demonstracja:
1.

Wzrost szczepów: Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis i Micrococcus

spp. na podłożu agarowym z krwią baranią i na podłożu Chapmana

2.

Oznaczenie koagulazy

3.

Badanie mechanizmów lekooporności gronkowców

−

oznaczanie wrażliwości na penicylinę

a.

test cefinazowy (krążek z nitrocefiną)

b.

metoda dyfuzyjno-krążkowa (krążek z penicyliną)

−

określenie metycylinooporności
a.

metoda dyfuzyjno-krążkowa (krążek z cefoksytyną)

b.

testy wykrywające białka PBP 2a, produktu genu mecA, warunkującego

oporność na meticylinę (dla Staphylococcus aureus)

c.

wykrywanie obecności genu mecA z wykorzystaniem techniki PCR

−

identyfikacja i interpretacja fenotypów oporności na makrolidy, linkosamidy
i streptograminy B
a.

metoda dwóch krążków

−

badanie wrażliwości na glikopeptydy

o

oznaczanie MIC glikopeptydów

o

metoda mikrorozcieńczeń w bulionie

o

metoda dyfuzji w agarze z paska nasączonego gradientem antybiotyku

Do wykonania:

1.

barwienie metodą Grama preparatu z hodowli Staphylococcus aureus

2.

oznaczenie katalazy i czynnika CF